| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 中英文缩写对照 | 第9-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-23页 |
| 1.1 STIP 蛋白的概述 | 第13页 |
| 1.2 泛素—蛋白酶体途径（UPP） | 第13-16页 |
| 1.2.1 泛素—蛋白酶体途径的组成 | 第13-15页 |
| 1.2.2 泛素—蛋白酶体途径的作用机制 | 第15-16页 |
| 1.3 泛素化的逆调控-去泛素化 | 第16-19页 |
| 1.3.1 去泛素化酶的分类 | 第16-18页 |
| 1.3.2 去泛素化酶的作用机制 | 第18-19页 |
| 1.4 p53 蛋白的概述 | 第19-20页 |
| 1.5 Mdm2 蛋白的概述 | 第20-22页 |
| 1.6 本课题的研究目的、内容和意义 | 第22-23页 |
| 第2章 内源性 STIP 蛋白的表达与定位 | 第23-30页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.2.1 实验试剂与耗材 | 第23-24页 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 | 第24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.3.1 细胞的传代、接板、冻存及复苏 | 第24-25页 |
| 2.3.2 蛋白质检测 | 第25-27页 |
| 2.3.3 免疫荧光（Immunofluorescence，IF） | 第27页 |
| 2.4 实验结果 | 第27-28页 |
| 2.4.1 STIP 蛋白在细胞内的定位 | 第27-28页 |
| 2.4.2 STIP 蛋白在不同细胞系内的表达 | 第28页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第28-30页 |
| 第3章 STIP 影响 Mdm2 和 p53 蛋白的稳定 | 第30-53页 |
| 3.1 前言 | 第30-31页 |
| 3.2 实验材料 | 第31-32页 |
| 3.2.1 实验试剂与耗材 | 第31页 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 | 第31-32页 |
| 3.3 实验方法 | 第32-42页 |
| 3.3.1 所需试剂的配制 | 第32页 |
| 3.3.2 质粒 pCMV-tag2b-p53 与 pCMV-tag2b-mdm2 的构建 | 第32-36页 |
| 3.3.3 特异性 STIP-shRNA 的制备 | 第36-39页 |
| 3.3.4 慢病毒侵染法构建稳定细胞系 | 第39-40页 |
| 3.3.5 转染 siRNA、shRNA 及质粒 | 第40-41页 |
| 3.3.6 免疫共沉淀 | 第41页 |
| 3.3.7 细胞内泛素化实验 | 第41页 |
| 3.3.8 蛋白质半衰期的检测 | 第41页 |
| 3.3.9 Real Time PCR | 第41-42页 |
| 3.4 实验结果 | 第42-52页 |
| 3.4.1 质粒的构建 | 第42-43页 |
| 3.4.2 慢病毒的构建 | 第43-45页 |
| 3.4.3 STIP 在蛋白水平影响 Mdm2 和 p53 | 第45-47页 |
| 3.4.4 STIP 影响 Mdm2 和 p53 蛋白的半衰期 | 第47-48页 |
| 3.4.5 STIP 影响 Mdm2 和 p53 的泛素化 | 第48-49页 |
| 3.4.6 STIP 介导 Mdm2 和 p53 的蛋白酶体降解 | 第49页 |
| 3.4.7 STIP 与 p53 相互作用 | 第49-50页 |
| 3.4.8 STIP 与 Mdm2 相互作用 | 第50-51页 |
| 3.4.9 Mdm2 或 p53 对 STIP 蛋白没有影响 | 第51-52页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第52-53页 |
| 第4章 STIP 促进肿瘤细胞的生长 | 第53-58页 |
| 4.1 前言 | 第53-54页 |
| 4.2 实验材料 | 第54页 |
| 4.2.1 实验试剂与耗材 | 第54页 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 | 第54页 |
| 4.3 实验方法 | 第54-55页 |
| 4.3.1 所需试剂的配制 | 第54页 |
| 4.3.2 集落形成实验 | 第54-55页 |
| 4.3.3 MTT | 第55页 |
| 4.4 实验结果 | 第55-56页 |
| 4.4.1 过表达 STIP 促进肿瘤细胞的增殖 | 第55-56页 |
| 4.4.2 干扰 STIP 导致肿瘤细胞生长缓慢 | 第56页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第56-58页 |
| 结论与展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
