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玉米纹枯病病原诱导启动子pGRMZM2G084947调控元件的鉴定与功能验证

符号说明第4-9页
中文摘要第9-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-26页
    1.1 启动子概述第12-21页
        1.1.1 启动子的结构与功能第12-14页
            1.1.1.1 启动子中的保守元件第13-14页
        1.1.2 植物启动子的类型第14-19页
            1.1.2.1 组成型表达启动子第14页
            1.1.2.2 组织特异性启动子第14-15页
            1.1.2.3 诱导型表达启动子第15-19页
                1.1.2.3.1 物理因素诱导的启动子第15-17页
                1.1.2.3.2 化学因素诱导的启动子第17-18页
                1.1.2.3.3 生物因素诱导的启动子第18-19页
        1.1.3 启动子的研究方法第19-21页
        1.1.4 启动子活性检测中使用的报告基因第21页
    1.2 玉米纹枯病概述第21-26页
        1.2.1 病原菌第22页
        1.2.2 症状第22-23页
        1.2.3 病原菌的侵染循环第23页
        1.2.4 玉米纹枯病的防治第23页
        1.2.5 玉米纹枯病菌抗性研究第23-24页
        1.2.6 玉米纹枯病的致病机制第24-26页
    1.3 研究的目的和意义第26页
2 实验材料和方法第26-32页
    2.1 植物材料第26-27页
        2.1.1 菌株与载体第26页
        2.1.2 材料处理方法第26-27页
            2.1.2.1 玉米纹枯病菌的培养第26页
            2.1.2.2 常用酶与生化试剂第26-27页
            2.1.2.3 常用仪器第27页
            2.1.2.4 溶液及培养基的配制第27页
    2.2 pGRMZM2G084947启动子表达载体构建第27-29页
        2.2.1 PCR引物设计第27-28页
        2.2.2 B73基因组DNA的提取第28页
        2.2.3 pGRMZM2G084947启动子片段的扩增第28页
        2.2.4 启动子片段的切胶回收和酶切第28页
        2.2.5 空载体和目的片段的酶切产物纯化第28-29页
        2.2.6 感受态细胞的制备第29页
        2.2.7 热激转化大肠杆菌DH5α第29页
        2.2.8 质粒DNA的提取第29页
        2.2.9 电转化农杆菌感受态细胞第29页
    2.3 转基因阳性水稻的获得第29-31页
        2.3.1 农杆菌介导的遗传转化第30页
        2.3.2 转基因水稻阳性检测第30页
            2.3.2.1 水稻基因组DNA提取第30页
            2.3.2.2 PCR阳性检测第30页
            2.3.2.3 GUS组织化学染色第30页
        2.3.3 GUS定量分析第30-31页
        2.3.4 玉米纹枯病菌YWK-196接种水稻第31页
    2.4 pGRMZM2G084947启动子各截短载体的构建第31页
    2.5 农杆菌介导的烟草瞬时表达转化第31-32页
        2.5.1 玉米纹枯病菌YWK-196接种烟草第31-32页
        2.5.2 农杆菌介导的烟草瞬时表达转化第32页
    2.6 GFP的定性及定量分析第32页
3 结果与分析第32-42页
    3.1 pGRMZM2G084947启动子的结构分析第32-33页
    3.2 pGRMZM2G084947启动子表达载体的构建第33-34页
    3.3 转基因水稻阳性鉴定第34-35页
    3.4 pGRMZM2G084947启动子的组织表达模式第35-36页
    3.5 pGRMZM2G084947启动子的病原诱导表达模式第36-37页
    3.6 构建不同截短启动子的重组载体并在本生烟上瞬时表达验证第37-39页
    3.7 确定pGRMZM2G084947启动子病原诱导的核心区域第39-42页
4 讨论第42-44页
5 结论第44-45页
参考文献第45-54页
致谢第54-55页
附录Ⅰ 实验试剂第55-56页
附录Ⅱ 实验仪器第56-57页
附录Ⅲ 常用培养基配方第57-60页
附录Ⅳ 常用实验方法第60-61页
附录Ⅴ 研究成果第61页

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