| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-31页 |
| 1.1 种子的萌发 | 第13-16页 |
| 1.1.1 环境因素对种子萌发的影响 | 第13-14页 |
| 1.1.1.1 温度 | 第13页 |
| 1.1.1.2 光照 | 第13页 |
| 1.1.1.3 水分 | 第13-14页 |
| 1.1.1.4 氧气 | 第14页 |
| 1.1.1.5 盐 | 第14页 |
| 1.1.2 内部因素对种子萌发的影响 | 第14-16页 |
| 1.1.2.1 糖类 | 第14-15页 |
| 1.1.2.2 蛋白质 | 第15页 |
| 1.1.2.3 脂肪 | 第15页 |
| 1.1.2.4 脱落酸对种子萌发的影响 | 第15-16页 |
| 1.2 脱落酸信号路径核心组分 | 第16-20页 |
| 1.2.1 信号路径的负调控因子2C型蛋白磷酸酶 | 第17-18页 |
| 1.2.2 信号路径的正调控因子SnRK2 | 第18-19页 |
| 1.2.3 ABA受体PYR/PYL/RCAR | 第19-20页 |
| 1.3 ABA经典信号路径的创建 | 第20-22页 |
| 1.3.1 中心调控复合物PP2C.SnRK2 | 第20页 |
| 1.3.2 ABA信号模型PYR/PYI/RCAR-PP2C-SnRK2 | 第20-21页 |
| 1.3.3 ABA信号路径的调控因子组合 | 第21-22页 |
| 1.4 植物中PYR/PYL/RCAR-PP2C-SnRK2的调控信号网络 | 第22-24页 |
| 1.4.1 AREB/ABF bZIP型转录因子 | 第22-23页 |
| 1.4.2 ABA信号路径膜蛋白 | 第23-24页 |
| 1.5 植物种子贮藏蛋白质 | 第24-26页 |
| 1.5.1 种子贮藏蛋白质的分类 | 第24-25页 |
| 1.5.1.1 2S白蛋白 | 第24页 |
| 1.5.1.2 球蛋白 | 第24页 |
| 1.5.1.3 醇溶蛋白 | 第24-25页 |
| 1.5.1.4 谷蛋白 | 第25页 |
| 1.5.2 贮藏蛋白质的转运和加工 | 第25页 |
| 1.5.3 贮藏蛋白质品质的影响因素 | 第25-26页 |
| 1.6 植物中的油体蛋白及其生理功能 | 第26-29页 |
| 1.6.1 种子的油体膜蛋白 | 第26-27页 |
| 1.6.2 油体膜蛋白Oleosins的分子功能 | 第27-28页 |
| 1.6.3 油体膜蛋白Oleosins的生理功能 | 第28-29页 |
| 1.6.3.1 Oleosins在种子萌发及低温胁迫时的重要功能 | 第28页 |
| 1.6.3.2 增大的油体对细胞核的破坏 | 第28-29页 |
| 1.6.3.3 Oleosins功能的开发 | 第29页 |
| 1.7 本研究的目的意义 | 第29-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第31页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第31页 |
| 2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第31页 |
| 2.1.4 引物 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-42页 |
| 2.2.1 拟南芥基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| 2.2.2 载体构建 | 第33-34页 |
| 2.2.2.1 PCR扩增 | 第33页 |
| 2.2.2.2 连接反应 | 第33-34页 |
| 2.2.2.3 酶切和凝胶回收 | 第34页 |
| 2.2.2.4 超表达载体的构建 | 第34页 |
| 2.2.3 PCR鉴定突变体纯合植株 | 第34-35页 |
| 2.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第35-36页 |
| 2.2.4.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35页 |
| 2.2.4.2 大肠杆菌细胞的转化 | 第35-36页 |
| 2.2.5 大肠杆菌中质粒的提取 | 第36页 |
| 2.2.6 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第36-37页 |
| 2.2.6.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| 2.2.6.2 冻融法转化农杆菌细胞 | 第37页 |
| 2.2.7 拟南芥的转化及转基因拟南芥的鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.7.1 拟南芥的转化 | 第37页 |
| 2.2.7.2 转基因拟南芥的鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.8 RNA的提取纯化与反转录 | 第38-39页 |
| 2.2.8.1 TRIZOL法提取RNA | 第38页 |
| 2.2.8.2 RNA的纯化 | 第38页 |
| 2.2.8.3 RNA中基因组DNA的去除 | 第38-39页 |
| 2.2.8.4 RNA的反转录 | 第39页 |
| 2.2.9 实时定量PCR | 第39-40页 |
| 2.2.10 半定量RT-PCR | 第40页 |
| 2.2.11 免疫共沉淀分离互作蛋白 | 第40页 |
| 2.2.12 蛋白质SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第40-41页 |
| 2.2.13 蛋白质银染 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-57页 |
| 3.1 拟南芥AtSAG的功能鉴定 | 第42-44页 |
| 3.1.1 AtSAG突变体以及超表达植株的获得 | 第42-43页 |
| 3.1.2 AtSAG突变体和超表达植株对ABA的响应 | 第43-44页 |
| 3.2 AtSAG调节ABA信号的机理 | 第44-46页 |
| 3.2.1 ABA信号通路基因的检测 | 第44-45页 |
| 3.2.2 AtSAG位于ABI5的上游 | 第45-46页 |
| 3.3 AtSAG突变体和超表达植株对盐和甘露醇的反应 | 第46-47页 |
| 3.4 AtSAG互作蛋白的鉴定 | 第47-49页 |
| 3.4.1 免疫共沉淀和LC-MS/MS质谱筛选AtSAG互作蛋白 | 第47-48页 |
| 3.4.2 油体蛋白和种子贮藏蛋白基因表达量检测 | 第48-49页 |
| 3.5 透射电镜观察WT、sag和abi5植株子叶细胞油体和蛋白贮藏液泡 | 第49-50页 |
| 3.6 棉花GhSAG基因的获得与序列分析 | 第50-52页 |
| 3.7 棉花GhSAG功能的分析 | 第52-54页 |
| 3.7.1 GhSAG的内源表达分析 | 第52页 |
| 3.7.2 超表达GhSAG拟南芥的获得 | 第52-53页 |
| 3.7.3 超表达GhSAG拟南芥对ABA的响应 | 第53-54页 |
| 3.8 GhSAG在萌发期正调控ABA信号通路 | 第54-55页 |
| 3.9 超表达GhSAG拟南芥对盐和渗透胁迫的响应 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第74页 |
