| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 杆状病毒的概况 | 第10-15页 |
| 1.1.1 杆状病毒简介 | 第10页 |
| 1.1.2 杆状病毒基因组的研究概况 | 第10-11页 |
| 1.1.3 杆状病毒的生物学 | 第11-12页 |
| 1.1.4 杆状病毒的生活史 | 第12-14页 |
| 1.1.5 杆状病毒在细胞中的增殖 | 第14-15页 |
| 1.2 杆状病毒的应用 | 第15-17页 |
| 1.2.1 用于外源基因的真核表达 | 第15页 |
| 1.2.2 杆状病毒用于基因治疗 | 第15页 |
| 1.2.3 杆状病毒作为生物杀虫剂 | 第15-17页 |
| 1.3 重组杆状病毒杀虫剂的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.4 研究设想 | 第19-21页 |
| 第二章 重组病毒Ac-P7-2的构建 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 载体、菌株及细胞系 | 第21页 |
| 2.1.2 生化试剂及细胞培养基 | 第21-22页 |
| 2.1.3 常规试剂的配制 | 第22页 |
| 2.1.4 实验所用引物 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-29页 |
| 2.2.1 聚合酶链式反应 | 第22-23页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶电泳分析 | 第23页 |
| 2.2.3 目的片段DNA分离回收 | 第23页 |
| 2.2.4 连接反应 | 第23-24页 |
| 2.2.5 限制性内切酶酶切反应 | 第24页 |
| 2.2.6 氯化钙感受态细胞的制备 | 第24页 |
| 2.2.7 质粒DNA的转化 | 第24页 |
| 2.2.8 碱裂解法提取质粒 | 第24-25页 |
| 2.2.9 目的基因的转座 | 第25页 |
| 2.2.10 BacmidDNA提取 | 第25页 |
| 2.2.11 重组Bacmid的转染 | 第25页 |
| 2.2.12 蛋白免疫印迹杂交(Westernblot) | 第25-26页 |
| 2.2.13 供体质粒HTB-phSV40-ie-1-FlagP7-2的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.14 重组BacmidAc-P7-2的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.15 P7-2蛋白表达的鉴定 | 第28页 |
| 2.2.16 实验技术路线 | 第28-29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-32页 |
| 2.3.1 供体质粒HTB-phSV40-ie-1-FlagP7-2的构建 | 第29-31页 |
| 2.3.2 重组bacmidAc-P7-2的构建 | 第31-32页 |
| 2.3.3 P7-2蛋白表达的鉴定 | 第32页 |
| 2.4 小结 | 第32-33页 |
| 第三章 Ac-P7-2的生物学特性研究 | 第33-40页 |
| 3.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.2 方法 | 第33-35页 |
| 3.2.1 重组bacmidAc-P7-2转染sf9细胞的光学显微观察与细胞死亡时间分析 | 第33页 |
| 3.2.2 从感染病毒的细胞中提取病毒基因组 | 第33页 |
| 3.2.3 标准品T-GP41的构建 | 第33页 |
| 3.2.4 病毒DNA复制曲线的测定 | 第33-34页 |
| 3.2.5 病毒生长曲线的测定 | 第34页 |
| 3.2.6 BV的大量制备 | 第34页 |
| 3.2.7 多角体的扩繁 | 第34页 |
| 3.2.8 生物测定 | 第34-35页 |
| 3.2.9 技术路线图 | 第35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-39页 |
| 3.3.1 Ac-P7-2转染sf9细胞的光学显微观察及细胞死亡时间分析 | 第35-36页 |
| 3.3.2 标准品T-GP41的构建 | 第36-37页 |
| 3.3.3 Ac-P7-2的复制曲线 | 第37页 |
| 3.3.4 Ac-P7-2的生长曲线 | 第37-38页 |
| 3.3.5 重组病毒LD50、LD90的测定 | 第38页 |
| 3.3.6 重组病毒LT50、LT90的测定 | 第38-39页 |
| 3.4 小结 | 第39-40页 |
| 第四章 结论 | 第40-41页 |
| 第五章 讨论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 附录 本文所用溶液配方 | 第50-52页 |
| 缩略词 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
