| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-21页 |
| 一、恶性肿瘤的治疗方法 | 第10-14页 |
| (一)手术治疗 | 第10-11页 |
| (二)放射治疗 | 第11页 |
| (三)免疫治疗 | 第11-12页 |
| (四)药物治疗 | 第12-14页 |
| 二、恶性肿瘤的发生机制 | 第14-15页 |
| (一)外源性因素 | 第14页 |
| (二)内源性因素 | 第14-15页 |
| (三)原癌基因在肿瘤发生中的作用 | 第15页 |
| 三、Cripto-1的研究进展 | 第15-18页 |
| (一)Cripto-1概述 | 第15-16页 |
| (二)Cripto-1与肿瘤的关系 | 第16-17页 |
| (三)Cripto-1基因的表达调控 | 第17-18页 |
| 四、真核基因的表达调控 | 第18-20页 |
| (一)转录前水平的调控 | 第18页 |
| (二)转录水平的调控 | 第18-19页 |
| (三)转录后水平的调控 | 第19页 |
| (四)翻译水平的调控 | 第19页 |
| (五)翻译后水平的调控 | 第19-20页 |
| 五、研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第21-30页 |
| 一、实验仪器和材料 | 第21-24页 |
| (一)实验仪器 | 第21页 |
| (二)实验试剂及材料 | 第21-23页 |
| (三)溶液的配制 | 第23-24页 |
| 二、实验方法 | 第24-30页 |
| (一)细胞培养相关方法 | 第24页 |
| (二)Cripto-1启动子的钓取 | 第24-27页 |
| (三)pGL3-Cripto-1启动子荧光素酶报告载体的构建与鉴定 | 第27页 |
| (四)pGL3-Cripto-1启动子荧光素酶报告载体的活性鉴定 | 第27页 |
| (五)Cripto-1表达抑制剂的筛选 | 第27-28页 |
| (六)蛋白免疫印迹分析 | 第28页 |
| (七)MTT检测 | 第28页 |
| (八)细胞形态观察 | 第28页 |
| (九)BrdU掺入实验 | 第28-29页 |
| (十)细胞周期检测 | 第29页 |
| (十一)DAPI染色 | 第29页 |
| (十二)细胞凋亡检测 | 第29页 |
| (十三)细胞划痕实验 | 第29-30页 |
| 第三部分 实验结果 | 第30-53页 |
| 一、pGL3-Cripto-1启动子荧光素酶报告载体的构建及鉴定 | 第30-32页 |
| (一)pGL3-Cripto-1启动子荧光素酶报告载体的构建 | 第30-31页 |
| (二)Cripto-1启动子荧光素酶报告载体的鉴定 | 第31-32页 |
| 二、靶向Cripto-1启动子的化合物筛选 | 第32-38页 |
| (一)抑制Cripto-1表达的化合物的初步筛选 | 第32-37页 |
| (二)抑制Cripto-1表达的化合物的复筛 | 第37页 |
| (三)候选化合物对Cripto-1表达的影响 | 第37-38页 |
| 三、靶向Cripto-1mRNA3'UTR的化合物筛选 | 第38-44页 |
| (一)抑制Cripto-1表达的化合物的初步筛选 | 第38-43页 |
| (二)抑制Cripto-1表达的化合物的复筛 | 第43页 |
| (三)候选化合物对Cripto-1表达的影响 | 第43-44页 |
| 四、化合物T150、T173的体外抗肿瘤作用研究 | 第44-52页 |
| (一)T150、T173对肿瘤细胞活力的影响 | 第44-46页 |
| (二)T150、T173对肿瘤细胞形态的影响 | 第46页 |
| (三)T150、T173对肿瘤细胞增殖能力的影响 | 第46-49页 |
| (四)T150、T173对肿瘤细胞凋亡的影响 | 第49-51页 |
| (五)T150、T173对肿瘤细胞迁移能力的影响 | 第51-52页 |
| 五、过表达Cripto-1对T150、T173抗肿瘤作用的影响 | 第52-53页 |
| 第四部分 讨论 | 第53-56页 |
| 一、pGL3-Cripto-1启动子荧光素酶报告载体的构建和化合物筛选 | 第53-54页 |
| 二、T150、T173的体外抗肿瘤活性研究 | 第54-56页 |
| 第五部分 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
