| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1.前言 | 第12-21页 |
| 1.1 植物先天免疫反应 | 第12-13页 |
| 1.2 植物类受体胞质激酶RLCK/RLK | 第13-16页 |
| 1.2.1 类受体蛋白激酶和类受体蛋白胞质激酶的结构 | 第13-14页 |
| 1.2.2 RLCK的生物学功能 | 第14-16页 |
| 1.3 植物类受体胞质激酶BIK | 第16-20页 |
| 1.3.1 BIK1的基本结构与功能 | 第16页 |
| 1.3.2 BIK1介导的信号途径 | 第16-20页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第20页 |
| 1.5 研究的主要内容 | 第20-21页 |
| 2.材料与方法 | 第21-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 真菌材料 | 第21页 |
| 2.1.3 菌株和质粒 | 第21页 |
| 2.1.4 酶及生化试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.5 PCR引物及测序 | 第22页 |
| 2.1.6 培养基 | 第22页 |
| 2.1.7 抗生素配制 | 第22页 |
| 2.1.8 溶液配制 | 第22-23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 植物总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.2 RNA浓度检测 | 第24-25页 |
| 2.2.3 反转录cDNA的合成 | 第25页 |
| 2.2.4 CTAB法提取DNA | 第25-26页 |
| 2.2.5 荧光定量 | 第26-27页 |
| 2.2.6 基因克隆 | 第27页 |
| 2.2.7 PCR产物纯化 | 第27页 |
| 2.2.8 酶切 | 第27-28页 |
| 2.2.9 琼脂糖凝胶DNA回收 | 第28-29页 |
| 2.2.10 连接 | 第29页 |
| 2.2.11 大肠杆菌感受态的转化 | 第29-30页 |
| 2.2.12 菌落PCR | 第30页 |
| 2.2.13 三步法提质粒 | 第30-31页 |
| 2.2.14 农杆菌感受态的制备 | 第31页 |
| 2.2.15 农杆菌感受态的转化 | 第31页 |
| 2.2.16 转化苹果‘王林’愈伤组织 | 第31-32页 |
| 2.2.17 蛋白质免疫印迹Westernblot | 第32-34页 |
| 2.2.18 转基因愈伤接菌测试 | 第34页 |
| 2.2.19 病原菌的抗病性评定方法 | 第34页 |
| 2.2.20 蛋白质免疫共沉淀 | 第34-36页 |
| 3.结果与分析 | 第36-53页 |
| 3.1 苹果MdBIK1S基因的克隆与载体构建 | 第36-39页 |
| 3.1.1 MdBIK1s基因的克隆 | 第36-38页 |
| 3.1.2 MdBIK1的氨基酸序列分析 | 第38-39页 |
| 3.2 超表达MdBIK1转基因苹果愈伤的生物学功能分析 | 第39-49页 |
| 3.2.1 超表达MdBIK1-2转基因愈伤的验证 | 第39-41页 |
| 3.2.2 超表达MdBIK1转基因愈伤的抗病性 | 第41-42页 |
| 3.2.3 超表达MdBIK1的苹果王林愈伤的转录组测序分析 | 第42-47页 |
| 3.2.4 接种灰霉病对MdBIK1转基因愈伤相关基因的差异表达分析 | 第47-48页 |
| 3.2.5 超表达MdBIK1转基因愈伤对腐烂病抗病性检测 | 第48-49页 |
| 3.3 超表达MdBIK1和MdBAK1双转基因苹果愈伤的生物学功能 | 第49-53页 |
| 3.3.1 超表达MdBIK1和MdBIK1双转基因苹果愈伤的验证 | 第50-51页 |
| 3.3.2 超表达MdBIK1和MdBAK1双转基因苹果愈伤对轮纹病抗病性的研究 | 第51-53页 |
| 4.讨论 | 第53-56页 |
| 4.1 苹果MdBIK1与MdBAK1等类受体蛋白激酶的互作预测 | 第53-54页 |
| 4.2 MdBIK1提高了苹果愈伤对灰霉病的抗性 | 第54页 |
| 4.3 MdBIK1影响苹果乙烯等氧化酶类的基因表达 | 第54-55页 |
| 4.4 转基因技术防治灰霉病对苹果产业的影响 | 第55-56页 |
| 5.结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间发表的论文及成果 | 第68页 |
