| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 马铃薯抗逆性 | 第11-12页 |
| 1.1.1 马铃薯简介 | 第11页 |
| 1.1.2 马铃薯抗逆性问题 | 第11-12页 |
| 1.2 植物抗盐抗旱研究现状 | 第12-16页 |
| 1.2.1 植物抗盐性机制研究 | 第12-13页 |
| 1.2.2 植物抗旱性机制研究 | 第13-14页 |
| 1.2.3 马铃薯的抗盐性研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.4 马铃薯的抗旱性研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 | 第16-19页 |
| 1.3.1 CPI作用及机理研究现状 | 第16-17页 |
| 1.3.2 CPI在植物生长发育中的作用 | 第17-18页 |
| 1.3.3 CPI在植物响应生物胁迫中的作用 | 第18页 |
| 1.3.4 CPI在植物响应非生物胁迫中的作用 | 第18-19页 |
| 1.4 本研究的目的、内容和意义 | 第19-21页 |
| 1.4.1 研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 1.4.2 研究的内容 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第21页 |
| 2.1.3 引物 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 StCPI的克隆及序列分析 | 第23-26页 |
| 2.2.2 StCPI的体外原核表达、蛋白纯化 | 第26-32页 |
| 2.2.3 StCPI的酶活检测及表达StCPI的大肠杆菌抗性试验 | 第32-34页 |
| 2.2.4 过表达StCPI二倍体马铃薯植株的抗逆性实验 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-50页 |
| 3.1 StCPI的克隆及序列分析 | 第36-40页 |
| 3.1.1 马铃薯总RNA的提取 | 第36页 |
| 3.1.2 StCPI基因克隆 | 第36-37页 |
| 3.1.3 测序结果比对 | 第37页 |
| 3.1.4 StCPI基因的生物信息学分析 | 第37-40页 |
| 3.2 StCPI的体外原核表达、蛋白纯化 | 第40-43页 |
| 3.2.1 克隆载体构建及验证 | 第40-41页 |
| 3.2.2 重组表达载体pET28-StCPI的构建及验证 | 第41页 |
| 3.2.3 StCPI蛋白表达 | 第41-42页 |
| 3.2.4 StCPI蛋白纯化 | 第42-43页 |
| 3.2.5 WesternBlot分析 | 第43页 |
| 3.3 StCPI的酶活验证及非生物胁迫 | 第43-46页 |
| 3.3.1 StCPI蛋白的浓度检测结果 | 第43-44页 |
| 3.3.2 StCPI蛋白体外酶活测定 | 第44页 |
| 3.3.3 表达StCPI大肠杆菌的耐NaCl实验 | 第44-45页 |
| 3.3.4 表达StCPI大肠杆菌的耐PEG实验 | 第45-46页 |
| 3.4 StCPI的抗逆性表征 | 第46-50页 |
| 3.4.1 转基因植株PCR鉴定 | 第46页 |
| 3.4.2 转基因植株qRT-PCR表达 | 第46-47页 |
| 3.4.3 转基因马铃薯抗盐性实验 | 第47-48页 |
| 3.4.4 转基因马铃薯抗旱性实验 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
