中文摘要 | 第11-14页 |
Abstract | 第14-17页 |
1 前言 | 第18-45页 |
1.1 抗性杂草发生与发展概况 | 第18-23页 |
1.2 ACCase与ALS抑制剂类除草剂 | 第23-28页 |
1.2.1 ACCase抑制剂类除草剂 | 第23-25页 |
1.2.1.1 植物的ACCase与功能 | 第23-24页 |
1.2.1.2 ACCase抑制剂类除草剂作用机理 | 第24页 |
1.2.1.3 ACCase抑制剂类除草剂选择性原理 | 第24-25页 |
1.2.2 ALS抑制剂类除草剂 | 第25-28页 |
1.2.2.1 植物的ALS与功能 | 第25-26页 |
1.2.2.2 ALS抑制剂类除草剂作用机理 | 第26-27页 |
1.2.2.3 ALS抑制剂类除草剂选择性原理 | 第27-28页 |
1.3 杂草抗药性产生的学说 | 第28-29页 |
1.4 杂草对ACCase和ALS抑制剂类除草剂抗性机理 | 第29-39页 |
1.4.1 ACCase和ALS抑制剂类除草剂靶标抗性机理 | 第30-36页 |
1.4.1.1 ACCase抑制剂类除草剂靶标抗性机理与交互抗性 | 第31-33页 |
1.4.1.2 ALS抑制剂类除草剂靶标抗性机理与交互抗性 | 第33-36页 |
1.4.2 ACCase和ALS抑制剂类除草剂非靶标抗性机理 | 第36-39页 |
1.4.2.1 杂草对除草剂代谢能力增强 | 第36-38页 |
1.4.2.2 杂草对除草剂吸收、转运减少 | 第38页 |
1.4.2.3 非靶标抗性机理引起的抗性谱 | 第38-39页 |
1.5 抗药性杂草检测方法 | 第39-42页 |
1.6 杂草的抗性适合度 | 第42页 |
1.7 本研究的目的意义 | 第42-45页 |
2 材料与方法 | 第45-63页 |
2.1 供试杂草与除草剂 | 第45-48页 |
2.1.1 看麦娘种子的采集 | 第45-47页 |
2.1.2 供试杂草种子催芽及植株培养 | 第47页 |
2.1.3 供试除草剂 | 第47页 |
2.1.4 施药方法 | 第47-48页 |
2.2 看麦娘对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆抗性测定 | 第48-49页 |
2.2.1 单剂量测定 | 第48页 |
2.2.2 看麦娘田间种群整株抗性水平测定 | 第48-49页 |
2.2.2.1 试验方法 | 第48-49页 |
2.2.2.2 数据处理 | 第49页 |
2.3 细胞色素P450单加氧酶(P450)活性差异研究 | 第49-50页 |
2.4 看麦娘ACCase和ALS基因片段差异研究 | 第50-53页 |
2.4.1 供试材料 | 第50页 |
2.4.2 主要试剂 | 第50页 |
2.4.3 主要仪器设备 | 第50页 |
2.4.4 看麦娘基因组DNA提取 | 第50-51页 |
2.4.5 引物设计与合成 | 第51页 |
2.4.6 ACCase和ALS基因片段扩增 | 第51-52页 |
2.4.7 目的条带的回收 | 第52-53页 |
2.4.8 目的DNA片段的连接、转化和测序 | 第53页 |
2.5 (d)CAPS法分析ACCase和ALS基因突变位点单核苷酸多态性 | 第53-56页 |
2.5.1 主要试剂与仪器 | 第54页 |
2.5.2 CTAB法提取看麦娘基因组DNA | 第54页 |
2.5.3 (d)CAPS分析相关引物设计 | 第54-55页 |
2.5.4 (d)CAPS分析PCR、限制性酶切及电泳 | 第55-56页 |
2.6 ACCase和ALS突变纯合型看麦娘对不同除草剂敏感性测定 | 第56-59页 |
2.6.1 突变纯合型看麦娘种群的获取 | 第56-57页 |
2.6.2 对ACCase和ALS抑制剂类除草剂交互抗性测定 | 第57-58页 |
2.6.3 对其他除草剂的敏感性测定 | 第58-59页 |
2.7 ALS离体酶活性测定 | 第59-61页 |
2.7.1 供试材料 | 第59页 |
2.7.2 主要试剂与仪器 | 第59页 |
2.7.3 ALS酶提取及活性测定 | 第59-61页 |
2.7.3.1 蛋白标准曲线 | 第59-60页 |
2.7.3.2 3 -羟基-2-丁酮标准曲线 | 第60页 |
2.7.3.3 看麦娘ALS提取 | 第60-61页 |
2.7.3.4 看麦娘ALS酶活性测定 | 第61页 |
2.7.3.5 数据处理 | 第61页 |
2.8 看麦娘抗性、敏感生物型萌发、出苗特性分析 | 第61-63页 |
2.8.1 供试材料 | 第61页 |
2.8.2 光照对种子萌发的影响 | 第61-62页 |
2.8.3 温度对种子萌发的影响 | 第62页 |
2.8.4 埋藏深度对出苗的影响 | 第62页 |
2.8.5 数据处理 | 第62-63页 |
2.8.5.1 温度对种子萌发的影响 | 第62页 |
2.8.5.2 埋藏深度对出苗的影响 | 第62-63页 |
3 结果与分析 | 第63-90页 |
3.1 看麦娘对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆抗性测定 | 第63-67页 |
3.1.1 单剂量测定结果 | 第63-65页 |
3.1.2 看麦娘田间种群对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆抗性水平 | 第65-67页 |
3.2 细胞色素P450氧化酶(P450)活性差异 | 第67-68页 |
3.3 看麦娘抗性、敏感种群ACCase和ALS基因片段序列差异 | 第68-72页 |
3.3.1 质体型ACCase基因片段序列差异分析 | 第68-69页 |
3.3.2 ALS基因片段序列差异分析 | 第69-72页 |
3.4 (d)CAPS分析看麦娘ACCase和ALS基因特定位点单核苷酸多态性 | 第72-77页 |
3.4.1 看麦娘ACCase基因突变(d)CAPS分析 | 第72-75页 |
3.4.1.2 看麦娘ACCaseIle1781位点dCAPS分析 | 第72页 |
3.4.1.2 看麦娘ACCaseIle2041位点CAPS分析 | 第72-73页 |
3.4.1.3 看麦娘ACCaseIle-2041-Thr突变dCAPS分析 | 第73-74页 |
3.4.1.4 看麦娘ACCaseAsp2078位点dCAPS分析 | 第74-75页 |
3.4.2 看麦娘ALS基因突变dCAPS分析 | 第75-77页 |
3.4.2.1 看麦娘ALSPro197位点dCAPS分析 | 第75-76页 |
3.4.2.2 看麦娘ALSTrp574位点dCAPS分析 | 第76-77页 |
3.5 ALS离体活性测定 | 第77-78页 |
3.6 ACCase或ALS突变纯合种群对不同除草剂的敏感性 | 第78-85页 |
3.6.1 对ACCase抑制剂类除草剂的交互抗性 | 第78-81页 |
3.6.2 对ALS抑制剂类除草剂的交互抗性 | 第81-82页 |
3.6.3 对其他除草剂的敏感性测定 | 第82-85页 |
3.7 看麦娘萌发、出苗特性分析 | 第85-90页 |
3.7.1 光照对种子萌发的影响 | 第85-86页 |
3.7.2 温度对种子萌发的影响 | 第86-87页 |
3.7.3 埋藏深度对出苗的影响 | 第87-90页 |
4 讨论 | 第90-100页 |
4.1 看麦娘对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆抗性的产生 | 第90-91页 |
4.2 看麦娘对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆抗性机理 | 第91-94页 |
4.2.1 靶标抗性机理具有多样性 | 第91-93页 |
4.2.2 非靶标抗性与靶标抗性在看麦娘抗性植株中同时存在 | 第93-94页 |
4.3 突变纯合型看麦娘对相同作用靶标除草剂的交互抗性 | 第94-97页 |
4.3.1 ACCase突变纯合种群交互抗性谱 | 第95-96页 |
4.3.2 ALS突变纯合种群交互抗性谱 | 第96-97页 |
4.4 ACCase和ALS抑制剂类除草剂抗性治理策略 | 第97-98页 |
4.5 (d)CAPS分子标记检测看麦娘靶标抗性突变 | 第98-100页 |
5 结论 | 第100-102页 |
6 论文创新与有待研究之处 | 第102-103页 |
7 参考文献 | 第103-130页 |
8 致谢 | 第130-131页 |
9 攻读学位期间发表论文情况 | 第131-134页 |
附图 | 第134页 |