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小麦田看麦娘(Alopecurus aequalis)对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆抗性研究

中文摘要第11-14页
Abstract第14-17页
1 前言第18-45页
    1.1 抗性杂草发生与发展概况第18-23页
    1.2 ACCase与ALS抑制剂类除草剂第23-28页
        1.2.1 ACCase抑制剂类除草剂第23-25页
            1.2.1.1 植物的ACCase与功能第23-24页
            1.2.1.2 ACCase抑制剂类除草剂作用机理第24页
            1.2.1.3 ACCase抑制剂类除草剂选择性原理第24-25页
        1.2.2 ALS抑制剂类除草剂第25-28页
            1.2.2.1 植物的ALS与功能第25-26页
            1.2.2.2 ALS抑制剂类除草剂作用机理第26-27页
            1.2.2.3 ALS抑制剂类除草剂选择性原理第27-28页
    1.3 杂草抗药性产生的学说第28-29页
    1.4 杂草对ACCase和ALS抑制剂类除草剂抗性机理第29-39页
        1.4.1 ACCase和ALS抑制剂类除草剂靶标抗性机理第30-36页
            1.4.1.1 ACCase抑制剂类除草剂靶标抗性机理与交互抗性第31-33页
            1.4.1.2 ALS抑制剂类除草剂靶标抗性机理与交互抗性第33-36页
        1.4.2 ACCase和ALS抑制剂类除草剂非靶标抗性机理第36-39页
            1.4.2.1 杂草对除草剂代谢能力增强第36-38页
            1.4.2.2 杂草对除草剂吸收、转运减少第38页
            1.4.2.3 非靶标抗性机理引起的抗性谱第38-39页
    1.5 抗药性杂草检测方法第39-42页
    1.6 杂草的抗性适合度第42页
    1.7 本研究的目的意义第42-45页
2 材料与方法第45-63页
    2.1 供试杂草与除草剂第45-48页
        2.1.1 看麦娘种子的采集第45-47页
        2.1.2 供试杂草种子催芽及植株培养第47页
        2.1.3 供试除草剂第47页
        2.1.4 施药方法第47-48页
    2.2 看麦娘对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆抗性测定第48-49页
        2.2.1 单剂量测定第48页
        2.2.2 看麦娘田间种群整株抗性水平测定第48-49页
            2.2.2.1 试验方法第48-49页
            2.2.2.2 数据处理第49页
    2.3 细胞色素P450单加氧酶(P450)活性差异研究第49-50页
    2.4 看麦娘ACCase和ALS基因片段差异研究第50-53页
        2.4.1 供试材料第50页
        2.4.2 主要试剂第50页
        2.4.3 主要仪器设备第50页
        2.4.4 看麦娘基因组DNA提取第50-51页
        2.4.5 引物设计与合成第51页
        2.4.6 ACCase和ALS基因片段扩增第51-52页
        2.4.7 目的条带的回收第52-53页
        2.4.8 目的DNA片段的连接、转化和测序第53页
    2.5 (d)CAPS法分析ACCase和ALS基因突变位点单核苷酸多态性第53-56页
        2.5.1 主要试剂与仪器第54页
        2.5.2 CTAB法提取看麦娘基因组DNA第54页
        2.5.3 (d)CAPS分析相关引物设计第54-55页
        2.5.4 (d)CAPS分析PCR、限制性酶切及电泳第55-56页
    2.6 ACCase和ALS突变纯合型看麦娘对不同除草剂敏感性测定第56-59页
        2.6.1 突变纯合型看麦娘种群的获取第56-57页
        2.6.2 对ACCase和ALS抑制剂类除草剂交互抗性测定第57-58页
        2.6.3 对其他除草剂的敏感性测定第58-59页
    2.7 ALS离体酶活性测定第59-61页
        2.7.1 供试材料第59页
        2.7.2 主要试剂与仪器第59页
        2.7.3 ALS酶提取及活性测定第59-61页
            2.7.3.1 蛋白标准曲线第59-60页
            2.7.3.2 3 -羟基-2-丁酮标准曲线第60页
            2.7.3.3 看麦娘ALS提取第60-61页
            2.7.3.4 看麦娘ALS酶活性测定第61页
            2.7.3.5 数据处理第61页
    2.8 看麦娘抗性、敏感生物型萌发、出苗特性分析第61-63页
        2.8.1 供试材料第61页
        2.8.2 光照对种子萌发的影响第61-62页
        2.8.3 温度对种子萌发的影响第62页
        2.8.4 埋藏深度对出苗的影响第62页
        2.8.5 数据处理第62-63页
            2.8.5.1 温度对种子萌发的影响第62页
            2.8.5.2 埋藏深度对出苗的影响第62-63页
3 结果与分析第63-90页
    3.1 看麦娘对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆抗性测定第63-67页
        3.1.1 单剂量测定结果第63-65页
        3.1.2 看麦娘田间种群对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆抗性水平第65-67页
    3.2 细胞色素P450氧化酶(P450)活性差异第67-68页
    3.3 看麦娘抗性、敏感种群ACCase和ALS基因片段序列差异第68-72页
        3.3.1 质体型ACCase基因片段序列差异分析第68-69页
        3.3.2 ALS基因片段序列差异分析第69-72页
    3.4 (d)CAPS分析看麦娘ACCase和ALS基因特定位点单核苷酸多态性第72-77页
        3.4.1 看麦娘ACCase基因突变(d)CAPS分析第72-75页
            3.4.1.2 看麦娘ACCaseIle1781位点dCAPS分析第72页
            3.4.1.2 看麦娘ACCaseIle2041位点CAPS分析第72-73页
            3.4.1.3 看麦娘ACCaseIle-2041-Thr突变dCAPS分析第73-74页
            3.4.1.4 看麦娘ACCaseAsp2078位点dCAPS分析第74-75页
        3.4.2 看麦娘ALS基因突变dCAPS分析第75-77页
            3.4.2.1 看麦娘ALSPro197位点dCAPS分析第75-76页
            3.4.2.2 看麦娘ALSTrp574位点dCAPS分析第76-77页
    3.5 ALS离体活性测定第77-78页
    3.6 ACCase或ALS突变纯合种群对不同除草剂的敏感性第78-85页
        3.6.1 对ACCase抑制剂类除草剂的交互抗性第78-81页
        3.6.2 对ALS抑制剂类除草剂的交互抗性第81-82页
        3.6.3 对其他除草剂的敏感性测定第82-85页
    3.7 看麦娘萌发、出苗特性分析第85-90页
        3.7.1 光照对种子萌发的影响第85-86页
        3.7.2 温度对种子萌发的影响第86-87页
        3.7.3 埋藏深度对出苗的影响第87-90页
4 讨论第90-100页
    4.1 看麦娘对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆抗性的产生第90-91页
    4.2 看麦娘对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆抗性机理第91-94页
        4.2.1 靶标抗性机理具有多样性第91-93页
        4.2.2 非靶标抗性与靶标抗性在看麦娘抗性植株中同时存在第93-94页
    4.3 突变纯合型看麦娘对相同作用靶标除草剂的交互抗性第94-97页
        4.3.1 ACCase突变纯合种群交互抗性谱第95-96页
        4.3.2 ALS突变纯合种群交互抗性谱第96-97页
    4.4 ACCase和ALS抑制剂类除草剂抗性治理策略第97-98页
    4.5 (d)CAPS分子标记检测看麦娘靶标抗性突变第98-100页
5 结论第100-102页
6 论文创新与有待研究之处第102-103页
7 参考文献第103-130页
8 致谢第130-131页
9 攻读学位期间发表论文情况第131-134页
附图第134页

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