| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-32页 |
| 1 鱼类TLRs的研究现状 | 第15-23页 |
| 1.1 TLRs的结构特性 | 第15-16页 |
| 1.2 鱼类TLRs及其识别配体 | 第16-17页 |
| 1.3 TLRs分类 | 第17-21页 |
| 1.4 TLRs信号传递通路 | 第21-23页 |
| 2 TLR22研究进展 | 第23-27页 |
| 2.1 TLR22的研究现状 | 第23页 |
| 2.2 TLR22的结构特征 | 第23-24页 |
| 2.3 TLR22的分布特征 | 第24页 |
| 2.4 TLR22的细胞亚定位及配体识别差异 | 第24-25页 |
| 2.5 TLR22在先天性免疫反应中的调控作用 | 第25-27页 |
| 3 草鱼抗GCRV品种选育 | 第27-29页 |
| 3.1 杂交育种 | 第27-28页 |
| 3.2 细胞工程育种 | 第28页 |
| 3.3 基因工程育种 | 第28-29页 |
| 4 赤眼鳟和草鱼应对GCRV感染的差异 | 第29-30页 |
| 5 研究的目的及意义 | 第30-32页 |
| 第二章 赤眼鳟TLR22基因的克隆及表达特性分析 | 第32-50页 |
| 1 材料方法 | 第32-38页 |
| 1.1 试验鱼和草鱼TLR22序列获得 | 第32-33页 |
| 1.2 总RNA提取 | 第33-34页 |
| 1.3 第一链cDNA合成 | 第34页 |
| 1.4 ScTLR22基因cDNA全长克隆 | 第34-37页 |
| 1.5 ScTLR22序列生物信息学分析 | 第37-38页 |
| 1.6 ScTLR22的组织表达特性分析 | 第38页 |
| 1.7 GCRV感染后TLR22在赤眼鳟和草鱼免疫组织表达水平研究 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-47页 |
| 2.1 ScTLR22基因序列分析 | 第38-39页 |
| 2.2 ScTLR22相似性分析 | 第39-42页 |
| 2.3 系统发育树构建 | 第42页 |
| 2.4 赤眼鳟TLR223D同源建模 | 第42-43页 |
| 2.5 结构域预测分析 | 第43-44页 |
| 2.6 TIR结构域氨基酸序列比对分析 | 第44-45页 |
| 2.7 赤眼鳟TLR22的组织表达特性 | 第45-46页 |
| 2.8 GCRV感染后TLR22在赤眼鳟和草鱼免疫组织表达水平研究 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 4 小结 | 第49-50页 |
| 第三章 赤眼鳟MyD88基因cDNA克隆与表达特性研究 | 第50-62页 |
| 1 材料与方法 | 第51-55页 |
| 1.1 试验鱼及GCRV病毒获取 | 第51页 |
| 1.2 总RNA提取及cDNA合成 | 第51页 |
| 1.3 ScMyD88基因cDNA全长克隆 | 第51-52页 |
| 1.4 ScMyD88序列生物信息学分析 | 第52-53页 |
| 1.5 ScMyD88的组织表达特性分析 | 第53页 |
| 1.6 GCRV感染后MyD88在赤眼鳟免疫组织表达水平研究 | 第53-55页 |
| 2 结果 | 第55-59页 |
| 2.1 赤眼鳟MyD88序列分析 | 第55-56页 |
| 2.2 多序列比对与系统发育树分析 | 第56-58页 |
| 2.3 MyD88在赤眼鳟不同组织的表达 | 第58页 |
| 2.4 GCRV感染后MyD88在赤眼鳟免疫组织的表达水平变化 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| 4 小结 | 第61-62页 |
| 第四章 赤眼鳟IRF3基因cDNA克隆及其抗病毒效应分析 | 第62-77页 |
| 1 材料方法 | 第62-68页 |
| 1.1 材料 | 第62页 |
| 1.2 总RNA提取 | 第62页 |
| 1.3 第一链cDNA合成 | 第62页 |
| 1.4 ScIRF3基因cDNA全长克隆 | 第62-63页 |
| 1.5 ScIRF3序列生物信息学分析 | 第63-64页 |
| 1.6 ScIRF3的组织表达特性分析 | 第64-65页 |
| 1.7 GCRV感染后IRF3和IFN-β在赤眼鳟肠和脾中表达水平研究 | 第65页 |
| 1.8 cDNA真核表达质粒构建 | 第65-66页 |
| 1.9 质粒转化及阳性筛选 | 第66-67页 |
| 1.10 细胞转染及阳性细胞筛选 | 第67页 |
| 1.11 GCRV刺激后CIK细胞中IRF3和IFN-β的表达变化 | 第67页 |
| 1.12 GCRV病毒TCID50测定 | 第67-68页 |
| 1.13 数据分析 | 第68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-74页 |
| 2.1 ScIRF3基因序列分析 | 第68-70页 |
| 2.2 系统发育树分析和3D结构分析 | 第70-71页 |
| 2.3 ScIRF3组织表达特性研究 | 第71-72页 |
| 2.4 GCRV刺激后赤眼鳟脾脏和肠中IRF3和IFN的表达水平变化 | 第72-73页 |
| 2.5 IRF3细胞亚定位研究 | 第73页 |
| 2.6 CIK细胞过表达ScIRF3的抑病毒效果 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| 4 小结 | 第76-77页 |
| 第五章 赤眼鳟和草鱼TLR22识别poly(I:C)模式探讨 | 第77-89页 |
| 1 材料方法 | 第78-79页 |
| 1.1 多序列比对和结构域预测 | 第78页 |
| 1.2 三维模型构建及评价 | 第78页 |
| 1.3 配体分子三维模型获得 | 第78页 |
| 1.4 AutoDock分子对接 | 第78-79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-87页 |
| 2.1 赤眼鳟和草鱼TLR22理化性质比较 | 第79页 |
| 2.2 结构域比较 | 第79-80页 |
| 2.3 同源建模结果 | 第80-83页 |
| 2.4 AutoDock分子对接 | 第83-87页 |
| 3 讨论 | 第87-88页 |
| 4 小结 | 第88-89页 |
| 第六章 赤眼鳟和草鱼TLR22诱导抗病毒因子表达能力比较 | 第89-97页 |
| 1 材料方法 | 第89-93页 |
| 1.1 材料 | 第89页 |
| 1.2 cDNA真核表达质粒构建 | 第89-92页 |
| 1.3 质粒转化及阳性筛选 | 第92页 |
| 1.4 细胞转染及阳性细胞筛选 | 第92页 |
| 1.5 GCRV刺激后CIK细胞中抗病毒因子的表达变化 | 第92页 |
| 1.6 GCRV病毒TCID50测定 | 第92页 |
| 1.7 数据分析 | 第92-93页 |
| 2 结果与分析 | 第93-95页 |
| 2.1 真核表达质粒构建 | 第93页 |
| 2.2 过表达TLR22的抗病毒效应 | 第93-95页 |
| 3 讨论 | 第95-96页 |
| 4 小结 | 第96-97页 |
| 研究总结、创新点及研究展望 | 第97-99页 |
| 1 结论 | 第97页 |
| 2 创新点 | 第97页 |
| 3 研究展望 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-116页 |
| 致谢 | 第116-118页 |
| 作者介绍 | 第118-120页 |
| 附录 本文所用缩略词详细信息 | 第120-121页 |
