| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第12-17页 |
| 1.1 课题的提出 | 第12-14页 |
| 1.1.1 大头菜的发展潜力 | 第12-13页 |
| 1.1.2 大头菜的育种现状 | 第13-14页 |
| 1.2 课题研究的目的、意义 | 第14-17页 |
| 1.2.1 花药培养与游离小孢子培养研究的意义 | 第14-17页 |
| 2 研究进展 | 第17-31页 |
| 2.1 花药培养和游离小孢子培养 | 第17-27页 |
| 2.1.1 影响胚诱导率的因素 | 第18-20页 |
| 2.1.1.1 供体的基因型 | 第18-19页 |
| 2.1.1.2 供体小孢子所处发育时期 | 第19-20页 |
| 2.1.2 供体材料的预处理 | 第20-21页 |
| 2.1.2.1 低温预处理 | 第20-21页 |
| 2.1.3 基本培养基及添加物 | 第21-26页 |
| 2.1.3.1 基本培养基 | 第21-22页 |
| 2.1.3.2 培养基中的碳源及浓度 | 第22-23页 |
| 2.1.3.3 外源有机物 | 第23页 |
| 2.1.3.4 活性炭 | 第23-24页 |
| 2.1.3.5 培养基中激素的种类与含量 | 第24-25页 |
| 2.1.3.6 秋水仙素等 | 第25页 |
| 2.1.3.7 培养基的pH值 | 第25-26页 |
| 2.1.4 小孢子的培养密度 | 第26页 |
| 2.1.5 培养方式 | 第26-27页 |
| 2.2 影响小孢子胚的再生的因素 | 第27-28页 |
| 2.2.1 小孢子胚的类型 | 第27-28页 |
| 2.2.2 小孢子胚在液体培养基中的滞留时间 | 第28页 |
| 2.2.3 再生培养基的琼脂含量 | 第28页 |
| 2.3 小孢子再生植株的倍性鉴定 | 第28-31页 |
| 2.3.1 染色体鉴定 | 第29页 |
| 2.3.2 形态学鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.3.2 保卫细胞的叶绿体数量鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.4 流式细胞仪鉴定 | 第30-31页 |
| 3 材料与方法 | 第31-39页 |
| 3.1 试验材料 | 第31页 |
| 3.2 试验方法 | 第31-38页 |
| 3.2.1 小孢子发育时期观察时染色液的选择 | 第31页 |
| 3.2.2 花蕾发育时期的观测 | 第31-32页 |
| 3.2.3 花序处理及保存 | 第32页 |
| 3.2.4 花药培养 | 第32-33页 |
| 3.2.4.1 花药培养所使用的培养基 | 第32页 |
| 3.2.4.2 花药培养的基础操作过程 | 第32页 |
| 3.2.4.3 花药培养试验 | 第32-33页 |
| 3.2.5. 游离小孢子培养 | 第33-35页 |
| 3.2.5.1 游离小孢子培养所使用到的培养基 | 第33-34页 |
| 3.2.5.2 游离小孢子培养基础操作过程 | 第34页 |
| 3.2.5.3 游离小孢子培养试验 | 第34-35页 |
| 3.2.6 胚状体的再生培养 | 第35页 |
| 3.2.7 再生植株的移栽 | 第35-36页 |
| 3.2.8 再生植株的倍性鉴定 | 第36-38页 |
| 3.2.8.1 根尖染色体计数法 | 第36-37页 |
| 3.2.8.2 形态学鉴定法 | 第37页 |
| 3.2.8.3 气孔保卫细胞叶绿体计数法检测倍性 | 第37-38页 |
| 3.2.8.4 流式细胞仪(FCM)检测再生植株的倍性 | 第38页 |
| 3.2.9 再生植株的加倍 | 第38页 |
| 3.3 统计分析 | 第38-39页 |
| 4 结果与分析 | 第39-53页 |
| 4.1 花蕾发育时期的观察与选择 | 第39-40页 |
| 4.1.1 小孢子不同时期的发育形态 | 第39页 |
| 4.1.2 花蕾长度与小孢子的发育时期 | 第39-40页 |
| 4.2 花药培养 | 第40-44页 |
| 4.2.1 培养基对出胚率的影响 | 第40-42页 |
| 4.2.2 激素对出胚率的影响 | 第42页 |
| 4.2.3 预冷天数对出胚率的影响 | 第42-43页 |
| 4.2.4 热激天数对出胚率的影响 | 第43-44页 |
| 4.3 游离小孢子培养 | 第44-47页 |
| 4.3.1 培养方式对出胚率的影响 | 第44页 |
| 4.3.2 预处理方式对出胚率的影响 | 第44-46页 |
| 4.3.3 添加激素对出胚的影响 | 第46-47页 |
| 4.4 胚状体的再生培养 | 第47-48页 |
| 4.5 再生植株的移栽驯化 | 第48-49页 |
| 4.6 污染植株的挽救 | 第49页 |
| 4.7 再生植株的倍性鉴定 | 第49-53页 |
| 4.7.1 根尖染色体倍性鉴定 | 第49-50页 |
| 4.7.2 再生植株的性状观察 | 第50页 |
| 4.7.3 气孔保卫细胞叶绿体数目鉴定再生植株倍性 | 第50-51页 |
| 4.7.4 流式细胞仪鉴定再生植株倍性 | 第51-53页 |
| 5 讨论 | 第53-61页 |
| 5.1 花蕾和小孢子发育时期的选择 | 第53-54页 |
| 5.2 花蕾的保存 | 第54页 |
| 5.3 花药培养 | 第54-56页 |
| 5.3.1 基本培养基对出胚的影响 | 第54-55页 |
| 5.3.2 培养基中添加激素对出胚的影响 | 第55页 |
| 5.3.3 预冷处理和热激处理对出胚的影响 | 第55-56页 |
| 5.4 游离小孢子培养 | 第56-57页 |
| 5.4.1 培养方式对出胚的影响 | 第56页 |
| 5.4.2 甘露醇预处理对出胚的影响 | 第56-57页 |
| 5.4.3 激素对小孢子培养的影响 | 第57页 |
| 5.5 综合比较各因素对小孢子胚胎发生的影响 | 第57-58页 |
| 5.6 胚状体的再生培养 | 第58-59页 |
| 5.7 促进胚状体发育成熟的尝试 | 第59页 |
| 5.8 再生植株的驯化移栽 | 第59页 |
| 5.9 再生植株的倍性鉴定 | 第59-60页 |
| 5.10 再生植株的继代 | 第60-61页 |
| 展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
| 图版 | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75页 |