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检测新型鸭源鹅细小病毒的半套式PCR方法的建立及应用

中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 文献综述第13-29页
    1.1 鹅细小病毒简介第13页
    1.2 鹅细小病毒的病原学研究进展第13-15页
        1.2.1 GPV的分类地位第13-14页
        1.2.2 GPV的形态特征及理化特性第14页
        1.2.3 GPV的培养特性第14-15页
    1.3 GPV的分子生物学特征第15-17页
        1.3.1 GPV基因组结构特点第15-16页
        1.3.2 GPV的转录和复制第16-17页
    1.4 GPV的基因编码蛋白第17-18页
        1.4.1 GPV的非结构蛋白第17页
        1.4.2 GPV的结构蛋白第17-18页
    1.5 鹅细小病毒的流行病学第18-19页
    1.6 GPV的致病机理第19-20页
    1.7 临床症状及病理变化第20页
    1.8 GPV的诊断方法第20-25页
        1.8.1 病毒的分离第20-21页
        1.8.2 血清学诊断方法第21-23页
        1.8.3 分子生物学检测方法在GPV的应用第23-25页
    1.9 鹅细小病毒疫苗研究进展第25-27页
        1.9.1 鹅细小病毒灭活疫苗第25页
        1.9.2 鹅细小病毒活疫苗第25-26页
        1.9.3 鹅细小病毒基因工程疫苗第26-27页
    1.10 小鹅瘟的防治第27-28页
    1.11 本研究的目的意义第28-29页
2 材料和方法第29-39页
    2.1 材料第29-30页
        2.1.1 毒株与菌株第29页
        2.1.2 主要仪器第29页
        2.1.3 主要试剂第29-30页
    2.2 方法第30-39页
        2.2.1 送检鸭病料的普通PCR检测第30-34页
        2.2.2 检测NGPV的半套式PCR方法的建立第34-36页
        2.2.3 半套式PCR方法在检测新型鸭源鹅细小病毒中的应用第36页
        2.2.4 2 株NGPV的全基因组测序第36-39页
3 结果第39-50页
    3.1 送检病料的普通PCR方法检测第39-42页
        3.1.1 普通PCR扩增结果第39页
        3.1.2 引物特异性鉴定结果第39-40页
        3.1.3 10 个器官的普通PCR检测第40页
        3.1.4 普通PCR方法对病料检测结果的统计第40-42页
    3.2 半套式PCR方法的建立第42-43页
        3.2.1 引物的最佳反应条件的探索第42页
        3.2.2 引物的特异性分析第42页
        3.2.3 半套式PCR的灵敏性分析第42-43页
    3.3 半套式PCR在检测中的应用第43-45页
        3.3.1 用半套式PCR对10种脏器组织的检测第43页
        3.3.2 半套式PCR方法对病料的检测结果统计第43-45页
    3.4 SD-01 和SD-022 株NGPV全基因组测序第45-50页
        3.4.1 NGPV全基因组的分段PCR扩增第45-46页
        3.4.2 NGPV全基因组的分段酶切鉴定第46页
        3.4.3 全基因组分段测序及进化分析第46-47页
        3.4.4 SD-01 和SD-02 的VP3基因及其蛋白的进化分析第47-50页
4 讨论第50-56页
    4.1 NGPV的组织嗜性的分析第50-52页
    4.2 检测新型鸭源鹅细小病毒的半套式PCR方法的优缺点第52-53页
    4.3 山东、江苏两地的新型鸭源鹅细小病毒的流行情况调查第53页
    4.4 SD-01 和SD-022 株NGPV同源性分析第53-56页
        4.4.1 2 株NGPV的全基因组序列的系统进化分析第53-54页
        4.4.2 SD-01 和SD-02 的VP3基因及其蛋白的进化分析第54-56页
5 结论第56-57页
参考文献第57-65页
致谢第65页

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