摘要 | 第7-9页 |
abstract | 第9-10页 |
缩略语 | 第11-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-26页 |
第一章 犬细小病毒病研究动态 | 第12-26页 |
1 犬细小病毒病的病原学特性 | 第12-15页 |
1.1 犬细小病毒病原学分类 | 第12页 |
1.2 犬细小病毒的基本生物学特征 | 第12-13页 |
1.3 分子生物学特征 | 第13-14页 |
1.4 致病机理 | 第14-15页 |
2 犬细小病毒病流行病学特点 | 第15-16页 |
3 临床症状 | 第16页 |
4 犬细小病毒病的检测技术 | 第16-19页 |
4.1 免疫学检测技术 | 第16-18页 |
4.2 分子生物学检测技术 | 第18-19页 |
5 犬细小病毒病的防控 | 第19-20页 |
5.1 免疫预防 | 第19页 |
5.2 治疗 | 第19-20页 |
6 本研究目的与意义 | 第20-21页 |
参考文献 | 第21-26页 |
第二部分 试验研究 | 第26-70页 |
第二章 CPV-2单克隆抗体ELISA检测方法的建立 | 第26-42页 |
1 材料 | 第27页 |
1.1 材料 | 第27页 |
1.2 主要试剂 | 第27页 |
2 方法 | 第27-31页 |
2.1 单克隆抗体的纯化 | 第27-28页 |
2.2 单克隆抗体的标记 | 第28页 |
2.3 CPV抗原纯化 | 第28页 |
2.4 单克隆抗体配对试验 | 第28-29页 |
2.5 包被抗体和酶标抗体工作浓度的确定 | 第29页 |
2.6 夹心ELISA试验条件的优化 | 第29-30页 |
2.7 双抗体夹心ELISA检测法临界值的判定 | 第30页 |
2.8 ELISA检测方法的性能评价 | 第30页 |
2.9 临床样品检测 | 第30-31页 |
3 结果 | 第31-36页 |
3.1 CPV抗原纯化 | 第31页 |
3.2 单克隆抗体配对试验 | 第31-32页 |
3.3 捕获抗体和酶标抗体工作浓度的确定 | 第32页 |
3.4 夹心ELISA试验条件的优化 | 第32-34页 |
3.5 双抗体夹心ELISA检测法临界值的判定 | 第34页 |
3.6 ELISA检测法的性能评价 | 第34-36页 |
3.7 临床样品检测 | 第36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
第三章 CPV2单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条制备 | 第42-58页 |
1 材料和方法 | 第43页 |
1.1 材料 | 第43页 |
1.2 主要试剂与耗材 | 第43页 |
2 方法 | 第43-47页 |
2.1 玻璃器皿的处理 | 第43-44页 |
2.2 单克隆抗体的纯化 | 第44页 |
2.3 胶体金溶液的制备与鉴定 | 第44页 |
2.4 胶体金标记抗体技术 | 第44-45页 |
2.5 胶体金免疫层析试纸条的优化 | 第45-46页 |
1.6 胶体金免疫层析试纸条的组装 | 第46页 |
2.7 样品稀释液的确定 | 第46页 |
2.8 胶体金免疫层析试纸条的评价 | 第46-47页 |
2.9 临床样品的检测 | 第47页 |
3 结果 | 第47-55页 |
3.1 胶体金溶液的制备 | 第47-48页 |
3.2 胶体金标记抗体技术 | 第48-49页 |
3.3 胶体金免疫层析试纸条的检测效果 | 第49页 |
3.4 胶体金免疫层析试纸条的优化 | 第49-52页 |
3.5 样品稀释液的确定 | 第52-53页 |
3.6 胶体金免疫层析试纸条的评价 | 第53-54页 |
3.7 临床样品的检测 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-58页 |
第四章 生物素-亲和素在免疫层析试纸条上的应用 | 第58-70页 |
1 材料与方法 | 第59页 |
1.1 材料 | 第59页 |
1.2 主要试剂与耗材 | 第59页 |
2 方法 | 第59-62页 |
2.1 玻璃器皿的处理 | 第59页 |
2.2 单克隆抗体的纯化 | 第59页 |
2.3 生物素标记抗体技术 | 第59-61页 |
2.4 胶体金溶液的制备与鉴定 | 第61页 |
2.5 胶体金标记亲和素技术 | 第61页 |
2.6 检测线、质控线抗体的包被 | 第61-62页 |
2.7 试纸条的组装 | 第62页 |
2.8 试纸条性能的检测 | 第62页 |
3 结果 | 第62-65页 |
3.1 生物素标记抗体技术 | 第62-64页 |
3.2 胶体金溶液的鉴定 | 第64页 |
3.3 试纸条性能的检测 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-70页 |
全文总结 | 第70-72页 |
附录:常用试剂的配制 | 第72-76页 |
致谢 | 第76页 |