| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 材料与方法 | 第13-29页 |
| 一、实验材料 | 第13-17页 |
| 1. 细胞 | 第13页 |
| 2.免疫组化芯片 | 第13页 |
| 3. 动物 | 第13页 |
| 4. 主要试剂 | 第13-16页 |
| 5. 主要仪器与设备 | 第16页 |
| 6. 计算机分析软件 | 第16页 |
| 7. 主要试剂及其配方 | 第16-17页 |
| 二、实验方法 | 第17-29页 |
| 1. 肝癌细胞的培养 | 第17-18页 |
| 2. 肝癌干细胞相关亚群的无血清悬浮培养(sphere培养) | 第18页 |
| 3. 杂交瘤细胞的培养 | 第18页 |
| 4. 无血清杂交瘤上清的收集 | 第18-19页 |
| 5. ELISA酶联免疫吸附试验 | 第19-20页 |
| 6. 流式细胞荧光 | 第20-21页 |
| 7. 细胞免疫荧光 | 第21-22页 |
| 8. 肝癌干细胞体外生物学特征的分析 | 第22-24页 |
| 9. 抗肝癌干细胞单抗对肝癌干细胞生物学功能影响的分析 | 第24-25页 |
| 10. 动物实验 | 第25页 |
| 11. Western-Blotting实验 | 第25-27页 |
| 12. 亲和层析纯化IgG抗体 | 第27页 |
| 13. 免疫组织化学检测 | 第27-28页 |
| 14. 杂交瘤单抗库的制备 | 第28页 |
| 15. 统计学分析 | 第28-29页 |
| 实验结果 | 第29-55页 |
| 一、抗人肝癌干细胞单抗的制备与筛选 | 第29-30页 |
| 1. 抗人肝癌干细胞单抗的制备 | 第29页 |
| 2. 筛选抗人肝癌干细胞单抗细胞模型的建立 | 第29-30页 |
| 3. 抗人肝癌干细胞单抗的筛选 | 第30页 |
| 二、抗人肝癌干细胞单抗的鉴定 | 第30-55页 |
| 1. 28C10单克隆抗体的纯化 | 第30-31页 |
| 2. 活细胞流式荧光术检测28C10+细胞在Bel7402-V13 sphere和MHCC97-L sphere细胞中的富集 | 第31-32页 |
| 3. 细胞免疫荧光术检测单抗28C10识别抗原在Bel7402-V13细胞和MHCC97-L细胞中的定位 | 第32-33页 |
| 4. 双色细胞免疫荧光检测28C10与肝癌干细胞的共染 | 第33-35页 |
| 5. 双色流式荧光术检测单抗28C10与肝癌干细胞标志物共染 | 第35-36页 |
| 6. 单抗28C10对人肝癌组织细胞的识别情况 | 第36-37页 |
| 7. 单抗28C10对人肝癌组织的识别情况及临床相关性分析 | 第37页 |
| 8. 28C10+细胞自我更新能力的分析 | 第37-38页 |
| 9. 28C10+细胞侵袭能力的分析 | 第38-39页 |
| 10. 28C10+细胞的耐药性分析 | 第39-40页 |
| 11. 28C10+细胞裸鼠体内致瘤性分析 | 第40-41页 |
| 12. 单抗28C10抑制肝癌细胞自我更新能力的分析 | 第41-43页 |
| 13. 单抗28C10抑制肝癌细胞侵袭能力的分析 | 第43-44页 |
| 14. 单抗28C10降低肝癌干细胞耐药能力的检测 | 第44-45页 |
| 15. 单抗28C10靶向肝癌干细胞治疗肝癌的体内试验研究 | 第45-46页 |
| 16. Western-Blot鉴定28C10识别的靶抗原及其分子量 | 第46-47页 |
| 17. 单抗28C10靶抗原的分离 | 第47-48页 |
| 18. 单抗28C10靶抗原的鉴定 | 第48页 |
| 19. 细胞免疫荧光共定位验证单抗28C10识别的靶抗原 | 第48-49页 |
| 20. Western-Blot验证单抗28C10的靶抗原 | 第49-51页 |
| 21. 免疫共沉淀验证单抗28C10识别的靶抗原 | 第51-52页 |
| 22. HSP90α对人肝癌组织细胞的识别情况 | 第52-53页 |
| 23. HSP90α对人肝癌组织的识别情况及临床相关性分析 | 第53-55页 |
| 讨论 | 第55-58页 |
| 小结 | 第58-60页 |
| 论文综述 | 第60-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 个人简历 | 第68-69页 |
