中文摘要 | 第5-6页 |
英文摘要 | 第6页 |
第一章 引言 | 第7-9页 |
1.1 GIPC2相关介绍 | 第7页 |
1.2 PDZ结构域相关介绍 | 第7页 |
1.3 待解决问题 | 第7-8页 |
1.4 研究要点与技术流程 | 第8-9页 |
第二章 GIPC2相互作用蛋白的初筛 | 第9-55页 |
2.1 前言 | 第9-11页 |
2.1.1 酵母双杂交实验原理 | 第9页 |
2.1.2 免疫沉淀-质谱联用实验原理 | 第9-11页 |
2.2 实验材料 | 第11-16页 |
2.3 实验方法 | 第16-32页 |
2.3.1 通过配体文库研究GIPC2 PDZ配体结合特点及其相互作用蛋白 | 第16-22页 |
2.3.2 通过筛选cDNA文库研究GIPC2的相互作用蛋白 | 第22-26页 |
2.3.3 通过免疫沉淀-质谱联用的方法研究293T细胞中GIPC2的相互作用蛋白 | 第26-32页 |
2.4 实验结果 | 第32-53页 |
2.4.1 通过配体文库研究GIPC2 PDZ配体结合特点及其相互作用蛋白 | 第32-37页 |
2.4.2 通过筛选cDNA文库研究GIPC2的相互作用蛋白 | 第37-42页 |
2.4.3 通过免疫沉淀-质谱联用的方法研究293T细胞中GIPC2的相互作用蛋白 | 第42-52页 |
2.4.4 结果总结 | 第52-53页 |
2.5 实验讨论 | 第53-55页 |
第三章 GIPC2相互作用蛋白的验证 | 第55-72页 |
3.1 前言 | 第55-57页 |
3.1.1 荧光共振能量转移实验原理 | 第55页 |
3.1.2 免疫共沉淀实验原理 | 第55页 |
3.1.3 NONO相关介绍 | 第55-57页 |
3.2 实验材料 | 第57-59页 |
3.3 实验方法 | 第59-65页 |
3.3.1 利用FRET的实验方法验证初筛所得配体蛋白与GIPC2的相互作用 | 第59-62页 |
3.3.2 利用CO-IP的方法验证有意义配体蛋白与GIPC2的相互作用 | 第62-65页 |
3.4 实验结果 | 第65-70页 |
3.4.1 利用FRET的实验方法验证初筛所得配体蛋白与GIPC2的相互作用 | 第65-68页 |
3.4.2 利用CO-IP的方法验证有意义配体蛋白与GIPC2的相互作用 | 第68-70页 |
3.5 实验讨论 | 第70-72页 |
第四章 实验结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-79页 |
附录 | 第79-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
个人简历 | 第81-82页 |