| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| 1.1 miRNA的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 miRNA的发现 | 第10页 |
| 1.1.2 miRNA的作用机制 | 第10-11页 |
| 1.1.3 miRNA的检测方法 | 第11页 |
| 1.1.4 miRNA在动物中研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.5 miRNA对奶牛乳房炎调控机制的研究 | 第12页 |
| 1.2 miRNA靶基因的预测与鉴定 | 第12-13页 |
| 1.2.1 生物信息学预测 | 第12-13页 |
| 1.2.2 生物学实验预测 | 第13页 |
| 1.2.3 miRNA靶基因的鉴定 | 第13页 |
| 1.3 miR-214对免疫途径的调节及意义 | 第13-14页 |
| 1.4 miR-214靶基因的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4.1 TRAF3的研究进展 | 第14页 |
| 1.4.2 NFATc3的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第15页 |
| 1.6 研究的技术路线 | 第15-17页 |
| 第二章 miR-214靶基因的鉴定 | 第17-26页 |
| 2.1 材料和方法 | 第17-21页 |
| 2.1.1 主要试剂和试剂盒 | 第17页 |
| 2.1.2 miR-214靶基因的预测 | 第17页 |
| 2.1.3 构建双荧光素酶报告基因载体 | 第17-20页 |
| 2.1.4 293A细胞系的转染 | 第20页 |
| 2.1.5 测定酶活 | 第20-21页 |
| 2.1.6 统计分析 | 第21页 |
| 2.2 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2.2.1 靶基因的预测 | 第21页 |
| 2.2.2 靶基因双荧光素酶报告基因重组载体鉴定 | 第21-23页 |
| 2.2.3 不同靶基因与miR-214作用验证结果 | 第23-24页 |
| 2.3 讨论 | 第24-25页 |
| 2.4 小结 | 第25-26页 |
| 第三章 过表达和干扰miR-214对奶牛乳腺上皮细胞的影响 | 第26-34页 |
| 3.1 材料和方法 | 第26-29页 |
| 3.1.1 主要试剂和试剂盒 | 第26页 |
| 3.1.2 miR-214 mimics转染奶牛乳腺上皮细胞 | 第26-27页 |
| 3.1.3 miR-214 mimics对其靶基因及通路基因和炎症因子表达的影响 | 第27-28页 |
| 3.1.4 miR-214 inhibitor转染奶牛乳腺上皮细胞 | 第28-29页 |
| 3.1.5 miR-214 inhibitor对其靶基因及通路基因表达的影响 | 第29页 |
| 3.1.6 统计分析 | 第29页 |
| 3.2 结果与分析 | 第29-32页 |
| 3.2.1 过表达和干扰表达miR-214后奶牛乳腺上皮细胞总RNA质量检测 | 第29-30页 |
| 3.2.2 过表达miR-214对其靶基因及通路基因和炎症因子表达的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.3 干扰表达miR-214对其靶基因及通路基因和炎症因子表达的影响 | 第31-32页 |
| 3.3 讨论 | 第32-33页 |
| 3.4 小结 | 第33-34页 |
| 第四章 结论及展望 | 第34-35页 |
| 4.1 研究结论 | 第34页 |
| 4.2 主要创新点 | 第34页 |
| 4.3 需要进一步研究的问题 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-40页 |
| 附录 | 第40-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
