| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-27页 |
| 1.1 萜类化合物 | 第14-15页 |
| 1.1.1 番茄红素 | 第14页 |
| 1.1.2 α-檀香烯 | 第14-15页 |
| 1.2 萜类化合物的生产方式 | 第15-17页 |
| 1.3 微生物异源合成萜类化合物的进展 | 第17-25页 |
| 1.3.1 宿主细胞的选择 | 第17-18页 |
| 1.3.2 萜类化合物生物合成途径 | 第18-19页 |
| 1.3.3 萜类天然产物微生物合成手段 | 第19-21页 |
| 1.3.4 几种重要萜类化合物微生物合成进展 | 第21-25页 |
| 1.4 研究意义及内容 | 第25-27页 |
| 第二章 基于链霉菌底盘的番茄红素高产研究 | 第27-51页 |
| 2.1 前言 | 第27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27-36页 |
| 2.2.1 菌株和质粒 | 第27-30页 |
| 2.2.2 引物 | 第30-31页 |
| 2.2.3 重要培养基和缓冲液 | 第31-35页 |
| 2.2.4 重要试剂和试剂盒 | 第35页 |
| 2.2.5 仪器设备 | 第35-36页 |
| 2.3 实验方法 | 第36-43页 |
| 2.3.1 CTAB法提取链霉菌基因组 | 第36-37页 |
| 2.3.2 常规PCR反应体系 | 第37-38页 |
| 2.3.3 限制性酶切反应以及酶切或PCR产物回收 | 第38页 |
| 2.3.4 T4连接酶催化的DNA连接反应 | 第38页 |
| 2.3.5 Gibson Assembly连接反应 | 第38-39页 |
| 2.3.6 Golden Gate连接反应 | 第39-40页 |
| 2.3.7 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒转化 | 第40页 |
| 2.3.8 克隆的验证和质粒提取 | 第40页 |
| 2.3.9 大肠杆菌-链霉菌接合转移 | 第40-41页 |
| 2.3.10 链霉菌转化子的验证 | 第41-42页 |
| 2.3.11 阿维链霉菌的番茄红素发酵培养 | 第42页 |
| 2.3.12 番茄红素的产量检测 | 第42-43页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第43-51页 |
| 2.4.1 激活沉默的番茄红素基因簇 | 第43-46页 |
| 2.4.2 发酵条件的优化 | 第46-47页 |
| 2.4.3 系列启动子驱动番茄红素基因簇的表达 | 第47-49页 |
| 2.4.4 绝缘子元件促进番茄红素的高产 | 第49-51页 |
| 第三章 基于酵母底盘的α-檀香烯高产研究 | 第51-75页 |
| 3.1 前言 | 第51页 |
| 3.2 实验材料 | 第51-58页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第51-54页 |
| 3.2.2 引物 | 第54-57页 |
| 3.2.3 重要培养基和缓冲液 | 第57-58页 |
| 3.2.4 重要试剂和试剂盒 | 第58页 |
| 3.2.5 仪器设备 | 第58页 |
| 3.3 实验方法 | 第58-61页 |
| 3.3.1 酿酒酵母菌落PCR方法 | 第58-59页 |
| 3.3.2 酿酒酵母转化方法 | 第59-60页 |
| 3.3.3 酵母重组菌株发酵方法 | 第60页 |
| 3.3.4 α-檀香烯检测方法 | 第60-61页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第61-75页 |
| 3.4.1 底盘细胞的初选 | 第61-62页 |
| 3.4.2 tHMG1和ERG20的过表达 | 第62-65页 |
| 3.4.3 酿酒酵母代谢工程改造 | 第65-72页 |
| 3.4.4 重组菌株的发酵和产量检测 | 第72-74页 |
| 3.4.5 引入SanSyn合酶提升产物特异性 | 第74-75页 |
| 第四章 结论与展望 | 第75-79页 |
| 4.1 结论 | 第75-76页 |
| 4.2 展望 | 第76-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 附录 | 第83-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章和专利 | 第91页 |