| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第12-29页 |
| 1.1 罗汉果研究 | 第13-19页 |
| 1.1.1 罗汉果资源、化学及生物活性研究 | 第13-17页 |
| 1.1.2 植物三萜及罗汉果苷代谢合成途径研究 | 第17-18页 |
| 1.1.3 罗汉果苷代谢酶基因研究 | 第18-19页 |
| 1.2 植物次生代谢糖基转移酶研究 | 第19-27页 |
| 1.2.1 UGT糖基转移酶分类、结构与鉴定 | 第19-21页 |
| 1.2.2 UGT糖基转移酶催化识别机制与亚细胞定位 | 第21-22页 |
| 1.2.3 UGT生理功能与作用 | 第22-27页 |
| 1.3 植物基因组与转录组学研究 | 第27-28页 |
| 1.4 研究目的意义与内容 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-48页 |
| 2.1 罗汉果苷与糖含量测定 | 第29-31页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第30-31页 |
| 2.2 罗汉果醇代谢规律测定 | 第31-32页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第32页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第32页 |
| 2.3 罗汉果苷初期代谢酶基因转录组分析 | 第32-35页 |
| 2.3.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.3.2 实验方法 | 第33-35页 |
| 2.4 葡萄糖基转移酶基因克隆 | 第35-37页 |
| 2.4.1 实验材料 | 第35页 |
| 2.4.2 实验方法 | 第35-37页 |
| 2.5 葡萄糖基转移酶基因时空表达分析 | 第37-40页 |
| 2.5.1 实验材料 | 第37-38页 |
| 2.5.2 实验方法 | 第38-40页 |
| 2.6 葡萄糖基转移酶基因原核表达分析 | 第40-44页 |
| 2.6.1 实验材料 | 第40页 |
| 2.6.2 实验方法 | 第40-44页 |
| 2.7 葡萄糖基转移酶基因真核表达分析 | 第44-47页 |
| 2.7.1 实验材料 | 第44页 |
| 2.7.2 实验方法 | 第44-47页 |
| 2.8 葡萄糖基转移酶基因重组蛋白体外活性筛选 | 第47-48页 |
| 2.8.1 实验材料 | 第47页 |
| 2.8.2 实验方法 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-104页 |
| 3.1 罗汉果苷与糖代谢规律研究 | 第48-53页 |
| 3.1.1 果实发育期罗汉果苷代谢规律 | 第48-49页 |
| 3.1.2 罗汉果苷与糖代谢相关性研究 | 第49-53页 |
| 3.2 罗汉果醇代谢规律研究 | 第53-55页 |
| 3.2.1 罗汉果醇提取方法筛选 | 第53-54页 |
| 3.2.2 罗汉果醇分布及积累规律 | 第54-55页 |
| 3.3 罗汉果苷初期代谢酶基因转录组研究 | 第55-77页 |
| 3.3.1 RNA提取质量 | 第55页 |
| 3.3.2 转录组测序与功能基因筛选分析 | 第55-77页 |
| 3.4 葡萄糖基转移酶基因克隆及序列分析 | 第77-90页 |
| 3.4.1 葡萄糖基转移酶基因RACE克隆 | 第77-78页 |
| 3.4.2 葡萄糖基转移酶基因编码蛋白序列分析 | 第78-90页 |
| 3.5 葡萄糖基转移酶基因时空表达分析 | 第90-93页 |
| 3.5.1 SgUGT4时空表达分析 | 第90-91页 |
| 3.5.2 SgUGT6时空表达分析 | 第91-92页 |
| 3.5.3 SgUGT7时空表达分析 | 第92-93页 |
| 3.6 葡萄糖基转移酶基因原核表达分析 | 第93-98页 |
| 3.6.1 原核表达载体构建 | 第93-95页 |
| 3.6.2 原核重组蛋白诱导表达 | 第95-96页 |
| 3.6.3 原核重组蛋白Western blot及纯度分析 | 第96-98页 |
| 3.7 葡萄糖基转移酶基因真核表达分析 | 第98-103页 |
| 3.7.1 真核表达载体构建 | 第98-99页 |
| 3.7.2 毕赤酵母高表达重组子筛选 | 第99-100页 |
| 3.7.3 真核重组蛋白诱导表达 | 第100-102页 |
| 3.7.4 真核重组蛋白Western blot及纯度分析 | 第102-103页 |
| 3.8 重组蛋白体外活性筛选研究 | 第103-104页 |
| 4 讨论 | 第104-108页 |
| 4.1 罗汉果甜苷Ⅴ体内代谢积累规律 | 第104页 |
| 4.2 罗汉果甜苷Ⅴ积累与葡萄糖相关性 | 第104-105页 |
| 4.3 罗汉果醇合成分布与甜苷Ⅴ转基因调控 | 第105页 |
| 4.4 果实中甾体合成对罗汉果苷合成的影响 | 第105-106页 |
| 4.5 罗汉果醇与苷ⅡE、苷Ⅲ合成候选基因筛选 | 第106-107页 |
| 4.6 SgUGT4与罗汉果甜苷Ⅴ合成相关性 | 第107页 |
| 4.7 SgUGT6与SgUGT7功能分析 | 第107-108页 |
| 4.8 葡萄糖基转移酶基因异源重组表达系统选择 | 第108页 |
| 5 结论 | 第108-109页 |
| 6 创新与展望 | 第109-112页 |
| 6.1 创新之处 | 第109-110页 |
| 6.2 问题与展望 | 第110-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-128页 |
| 攻读博士学位期间科研与发表论文情况 | 第128页 |
