| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略语(Abbreviations) | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-37页 |
| 1.1 肿瘤转移的研究进展 | 第15-25页 |
| 1.1.1 肿瘤转移的研究现状 | 第15-17页 |
| 1.1.1.1 肿瘤手术后的生存者面临肿瘤转移的恐惧 | 第15-16页 |
| 1.1.1.2 化疗药物不能预防肿瘤转移 | 第16-17页 |
| 1.1.2 肿瘤转移相关生物学过程的研究进展 | 第17-25页 |
| 1.1.2.1 细胞粘附与肿瘤转移 | 第17-20页 |
| 1.1.2.2 细胞EMC降解与肿瘤转移 | 第20页 |
| 1.1.2.3 细胞运动迁移与肿瘤转移 | 第20-22页 |
| 1.1.2.4 血管生成与肿瘤转移 | 第22-23页 |
| 1.1.2.5 上皮间质转化与肿瘤转移 | 第23-24页 |
| 1.1.2.6 细胞凋亡与肿瘤转移 | 第24-25页 |
| 1.2 避孕药用于预防肿瘤转移的研究进展 | 第25-28页 |
| 1.2.1 避孕药预防肿瘤转移的药理基础 | 第25-27页 |
| 1.2.2 长期口服避孕药降低癌症死亡率的研究 | 第27-28页 |
| 1.3 米非司酮及其代谢产物美她司酮的研究进展 | 第28-35页 |
| 1.3.1 米非司酮简介 | 第28页 |
| 1.3.2 米非司酮的药物代谢动力学性质 | 第28-30页 |
| 1.3.3 美她司酮的简介 | 第30-31页 |
| 1.3.4 米非司酮抗肿瘤作用研究进展 | 第31-35页 |
| 1.3.4.1 米非司酮抗乳腺癌的研究 | 第31-32页 |
| 1.3.4.2 米非司酮抗脑膜瘤的研究 | 第32页 |
| 1.3.4.3 米非司酮抗胶质瘤的研究 | 第32-33页 |
| 1.3.4.4 米非司酮抗前列腺癌的研究 | 第33页 |
| 1.3.4.5 米非司酮抗卵巢癌的研究 | 第33-34页 |
| 1.3.4.6 米非司酮抗子宫内膜癌的研究 | 第34页 |
| 1.3.4.7 米非司酮抗胃癌的研究 | 第34-35页 |
| 1.4 本论文的主要研究内容及创新点 | 第35-37页 |
| 1.4.1 本论文的主要研究内容 | 第35-36页 |
| 1.4.2 本论文的创新点 | 第36-37页 |
| 第二章 美她司酮的合成、表征及理化性质研究 | 第37-48页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第37页 |
| 2.1.1 药品与试剂 | 第37页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第37页 |
| 2.2 美她司酮合成方法的选择 | 第37-39页 |
| 2.3 合成工艺研究 | 第39-42页 |
| 2.3.1 反应条件的优化 | 第39-41页 |
| 2.3.1.1 无机碱的选取 | 第39-40页 |
| 2.3.1.2 反应温度优化 | 第40页 |
| 2.3.1.3 反应时间优化 | 第40-41页 |
| 2.3.2 合成工艺研究总结 | 第41-42页 |
| 2.3.3 小试工艺验证试验 | 第42页 |
| 2.3.4 中试放大试验 | 第42页 |
| 2.4 美她司酮的结构表征 | 第42-46页 |
| 2.4.1 表征实验方法 | 第43页 |
| 2.4.1.1 样品的熔点测定 | 第43页 |
| 2.4.1.2 样品的紫外光谱测定 | 第43页 |
| 2.4.1.3 样品的红外光谱测定 | 第43页 |
| 2.4.1.4 样品的核磁共振波谱测定 | 第43页 |
| 2.4.1.5 样品的质谱测定 | 第43页 |
| 2.4.2 样品表征结果 | 第43-46页 |
| 2.4.2.1 样品的熔点 | 第43-44页 |
| 2.4.2.2 紫外光谱分析 | 第44页 |
| 2.4.2.3 红外光谱鉴定 | 第44页 |
| 2.4.2.4 核磁共振鉴定 | 第44-46页 |
| 2.4.2.5 质谱鉴定 | 第46页 |
| 2.5 纯度鉴定 | 第46-47页 |
| 2.6 溶解性 | 第47页 |
| 2.7 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 美她司酮与米非司酮在大鼠体内的药动学性别差异研究 | 第48-67页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第48-50页 |
| 3.1.1 主要药品与试剂 | 第48页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第48-49页 |
| 3.1.3 色谱及质谱条件 | 第49-50页 |
| 3.1.4 标准溶液及内标溶液的制备 | 第50页 |
| 3.1.5 实验动物 | 第50页 |
| 3.2 实验方法 | 第50-54页 |
| 3.2.1 大鼠血浆中美她司酮定量分析方法的建立 | 第50-52页 |
| 3.2.1.1 血浆样品预处理 | 第50-51页 |
| 3.2.1.2 分析方法的验证 | 第51-52页 |
| 3.2.2 美她司酮在大鼠体内的药动学性别差异研究 | 第52页 |
| 3.2.2.1 给药方案与血浆样品采集 | 第52页 |
| 3.2.2.2 药动学数据处理 | 第52页 |
| 3.2.3 大鼠血浆中米非司酮和美她司酮定量分析方法的建立 | 第52-54页 |
| 3.2.3.1 血浆样品预处理 | 第52页 |
| 3.2.3.2 分析方法的验证 | 第52-54页 |
| 3.2.4 米非司酮在大鼠体内的药动学性别差异研究 | 第54页 |
| 3.2.4.1 给药方案与血浆样品采集 | 第54页 |
| 3.2.4.2 药动学数据处理 | 第54页 |
| 3.3 实验结果 | 第54-63页 |
| 3.3.1 大鼠血浆中美她司酮定量分析方法的建立 | 第54-56页 |
| 3.3.1.1 方法的选择性 | 第54页 |
| 3.3.1.2 标准曲线制备 | 第54-56页 |
| 3.3.1.3 方法的准确度和精密度 | 第56页 |
| 3.3.1.4 提取回收率 | 第56页 |
| 3.3.1.5 基质效应 | 第56页 |
| 3.3.1.6 样品稳定性 | 第56页 |
| 3.3.2 美她司酮在大鼠体内的药动学性别差异研究 | 第56-58页 |
| 3.3.3 大鼠血浆中米非司酮和美她司酮定量分析方法的建立 | 第58-61页 |
| 3.3.3.1 方法的选择性 | 第58-60页 |
| 3.3.3.2 标准曲线制备 | 第60页 |
| 3.3.3.3 方法的准确度和精密度 | 第60页 |
| 3.3.3.4 提取回收率 | 第60-61页 |
| 3.3.3.5 基质效应 | 第61页 |
| 3.3.3.6 样品稳定性 | 第61页 |
| 3.3.4 米非司酮在大鼠体内的药动学性别差异研究 | 第61-63页 |
| 3.4 讨论 | 第63-66页 |
| 3.4.1 质谱和色谱条件的优化 | 第63-65页 |
| 3.4.2 样品前处理方法 | 第65页 |
| 3.4.3 大鼠血浆中米非司酮和美她司酮定量分析方法的建立 | 第65页 |
| 3.4.4 美她司酮和米非司酮在大鼠体内药动学的性别差异 | 第65-66页 |
| 3.5 小结 | 第66-67页 |
| 第四章 美她司酮长期给药的毒性研究 | 第67-74页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第67-68页 |
| 4.1.1 主要实验材料 | 第67页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第67-68页 |
| 4.1.3 实验动物 | 第68页 |
| 4.1.4 常用溶液的配制 | 第68页 |
| 4.2 实验方法 | 第68-70页 |
| 4.2.1 实验分组 | 第68-69页 |
| 4.2.2 长期毒性实验 | 第69页 |
| 4.2.3 血常规分析 | 第69页 |
| 4.2.4 组织切片 | 第69-70页 |
| 4.3 实验结果 | 第70-72页 |
| 4.3.1 美她司酮对小鼠体重和器官重量的影响 | 第70页 |
| 4.3.2 美她司酮对小鼠血常规的影响 | 第70-71页 |
| 4.3.3 美她司酮对小鼠组织切片的影响 | 第71-72页 |
| 4.4 讨论 | 第72-73页 |
| 4.5 小结 | 第73-74页 |
| 第五章 美她司酮的体外抗肿瘤细胞增殖活性研究 | 第74-82页 |
| 5.1 实验材料与仪器 | 第74-76页 |
| 5.1.1 主要药品与试剂 | 第74页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第74-75页 |
| 5.1.3 常用溶液的配制 | 第75-76页 |
| 5.2 实验方法 | 第76-77页 |
| 5.2.1 受试细胞 | 第76页 |
| 5.2.2 细胞培养 | 第76页 |
| 5.2.3 MTT法检测目标药物对癌细胞增殖的抑制作用 | 第76-77页 |
| 5.2.4 美她司酮对肿瘤细胞集落形成的作用 | 第77页 |
| 5.2.5 统计学处理 | 第77页 |
| 5.3 实验结果 | 第77-80页 |
| 5.3.1 美她司酮对肿瘤细胞增殖的抑制作用 | 第77-79页 |
| 5.3.1.1 美她司酮对HT-29细胞增殖的抑制作用 | 第77页 |
| 5.3.1.2 美她司酮对B16F10细胞增殖的抑制作用 | 第77-78页 |
| 5.3.1.3 美她司酮对其它肿瘤细胞增殖的抑制作用 | 第78-79页 |
| 5.3.2 美她司酮对肿瘤细胞集落形成的影响 | 第79-80页 |
| 5.3.2.1 美她司酮对HT-29细胞集落形成的影响 | 第79-80页 |
| 5.3.2.2 美她司酮对B16F10细胞集落形成的影响 | 第80页 |
| 5.4 讨论 | 第80-81页 |
| 5.4.1 美她司酮对肿瘤细胞增殖的影响 | 第80-81页 |
| 5.4.2 美她司酮对肿瘤细胞集落形成的影响 | 第81页 |
| 5.5 小结 | 第81-82页 |
| 第六章 美她司酮抑制结肠癌细胞HT-29和黑色素瘤细胞B16F10增殖的作用机制初探 | 第82-96页 |
| 6.1 实验材料与仪器 | 第82-83页 |
| 6.1.1 主要药品与试剂 | 第82页 |
| 6.1.2 主要仪器 | 第82页 |
| 6.1.3 实验试剂配制 | 第82-83页 |
| 6.2 实验方法 | 第83-85页 |
| 6.2.1 普通倒置显微镜形态学观察 | 第83页 |
| 6.2.2 DAPI细胞形态学观察 | 第83页 |
| 6.2.3 PI单染检测细胞周期相分布 | 第83-84页 |
| 6.2.4 Annexin V-PE/7-AAD检测 | 第84页 |
| 6.2.5 线粒体膜电位检测 | 第84页 |
| 6.2.6 Caspase-3活性检测 | 第84-85页 |
| 6.2.7 统计学处理 | 第85页 |
| 6.3 实验结果 | 第85-92页 |
| 6.3.1 普通倒置显微镜下细胞形态学观察 | 第85页 |
| 6.3.2 DAPI染色细胞形态观察 | 第85-86页 |
| 6.3.2.1 HT-29细胞的DAPI染色观察 | 第85-86页 |
| 6.3.2.2 B16F10细胞的DAPI染色观察 | 第86页 |
| 6.3.3 美她司酮对细胞周期的影响 | 第86-88页 |
| 6.3.3.1 美她司酮对人结肠癌HT-29细胞周期的影响 | 第86-87页 |
| 6.3.3.2 美她司酮对鼠黑色素瘤B16F10细胞周期的影响 | 第87-88页 |
| 6.3.4 Annexin V-PE/7-AAD检测 | 第88-89页 |
| 6.3.4.1 HT-29胞的Annexin V-PE/7-AAD检测 | 第88-89页 |
| 6.3.4.2 B16F10细胞的Annexin V-PE/7-AAD检测 | 第89页 |
| 6.3.5 线粒体膜电位检测 | 第89-91页 |
| 6.3.5.1 HT-29细胞的线粒体膜电位检测 | 第90页 |
| 6.3.5.2 B16F10细胞的线粒体膜电位检测 | 第90-91页 |
| 6.3.6 Caspase-3酶活性检测 | 第91-92页 |
| 6.4 讨论 | 第92-95页 |
| 6.4.1 普通光镜及荧光显微镜观察 | 第92-93页 |
| 6.4.2 流式细胞术 | 第93-94页 |
| 6.4.3 线粒体信号通路 | 第94-95页 |
| 6.5 小结 | 第95-96页 |
| 第七章 美她司酮干预结肠癌细胞粘附、侵袭、转移作用及其机理初探 | 第96-119页 |
| 7.1 实验材料与仪器 | 第96-101页 |
| 7.1.1 主要药品与试剂 | 第96-97页 |
| 7.1.2 主要仪器 | 第97-98页 |
| 7.1.3 实验试剂配制 | 第98-101页 |
| 7.2 实验方法 | 第101-108页 |
| 7.2.1 细胞划痕实验 | 第101页 |
| 7.2.2 Transwell侵袭实验 | 第101-102页 |
| 7.2.3 内皮细胞的制备、培养与鉴定 | 第102页 |
| 7.2.4 粘附实验 | 第102-103页 |
| 7.2.4.1 美她司酮干预HT-29细胞与基质成分FN的粘附 | 第102-103页 |
| 7.2.4.2 美她司酮干预结肠癌HT-29细胞与HUVECs的粘附 | 第103页 |
| 7.2.5 抗体阻断结肠癌HT-29细胞与HUVECs的粘附 | 第103-104页 |
| 7.2.6 流式细胞仪法检测粘附分子蛋白表达 | 第104页 |
| 7.2.7 BCA蛋白定量 | 第104页 |
| 7.2.8 Western blotting法检测粘附分子表达 | 第104-106页 |
| 7.2.9 Trizol法提取RNA | 第106页 |
| 7.2.10 紫外分光光度仪测定RNA的浓度和纯度 | 第106-107页 |
| 7.2.11 RT-PCR检测粘附蛋白相关基因表达 | 第107页 |
| 7.2.12 体内结肠癌转移模型 | 第107-108页 |
| 7.2.13 统计学分析 | 第108页 |
| 7.3 实验结果 | 第108-114页 |
| 7.3.1 美她司酮对结肠癌细胞迁移、侵袭的影响 | 第108-109页 |
| 7.3.2 美她司酮对结肠癌细胞与基质粘附的影响 | 第109页 |
| 7.3.3 美她司酮对结肠癌细胞与HUVECs粘附的影响 | 第109-112页 |
| 7.3.3.1 HUVECs细胞的鉴定 | 第109-110页 |
| 7.3.3.2 HT-29细胞与HUVECs粘附过程的优化 | 第110页 |
| 7.3.3.3 美她司酮的加药方式干预结肠癌细胞与HUVECs的粘附差异 | 第110-112页 |
| 7.3.3.4 美她司酮对结肠癌细胞与HUVECs静、动态粘附的影响 | 第112页 |
| 7.3.4 美她司酮对HT-29细胞与HUVECs粘附分子表达的影响 | 第112-114页 |
| 7.3.4.1 美她司酮对结肠癌细胞HT-29粘附分子表达的影响 | 第112-113页 |
| 7.3.4.2 美她司酮对HUVECs粘附分子表达的影响 | 第113-114页 |
| 7.3.5 美她司酮对CT26细胞在BALB/c小鼠体内转移的影响 | 第114页 |
| 7.4 讨论 | 第114-118页 |
| 7.4.1 美她司酮干预结肠癌细胞与血管内膜的粘附 | 第116-117页 |
| 7.4.1.1 美她司酮对人脐静脉内皮细胞HUVECs粘附分子表达的影响 | 第116-117页 |
| 7.4.1.2 美她司酮对结肠癌细胞HT-29粘附分子表达的影响 | 第117页 |
| 7.4.2 美她司酮干预结肠癌细胞HT-29的迁移和侵袭 | 第117-118页 |
| 7.4.3 美她司酮对CT26细胞在BALB/c小鼠体内转移的影响 | 第118页 |
| 7.5 小结 | 第118-119页 |
| 第八章 美她司酮干预黑色素瘤细胞粘附、侵袭、转移作用及其机理初探 | 第119-137页 |
| 8.1 实验材料与仪器 | 第119-121页 |
| 8.1.1 主要药品与试剂 | 第119-120页 |
| 8.1.2 主要仪器 | 第120页 |
| 8.1.3 常用试剂配制 | 第120-121页 |
| 8.2 实验方法 | 第121-126页 |
| 8.2.1 细胞划痕实验 | 第121-122页 |
| 8.2.2 肿瘤细胞Transwell侵袭实验 | 第122页 |
| 8.2.3 粘附实验 | 第122-123页 |
| 8.2.4 明胶酶谱实验 | 第123页 |
| 8.2.5 流式细胞仪检测B16F10细胞表面粘附分子表达 | 第123页 |
| 8.2.6 抗体阻断黑色素瘤细胞与FN的粘附 | 第123页 |
| 8.2.7 Western Blotting检测 | 第123-124页 |
| 8.2.8 RT-PCR检测 | 第124-125页 |
| 8.2.9 B16F10细胞黑色素含量的测定 | 第125页 |
| 8.2.10 小鼠肺转移模型的建立与美她司酮的体内抗转移 | 第125-126页 |
| 8.2.11 统计方法 | 第126页 |
| 8.3 实验结果 | 第126-132页 |
| 8.3.1 美她司酮对黑色素瘤细胞迁移、侵袭的影响 | 第126-127页 |
| 8.3.1.1 美她司酮对黑色素瘤细胞迁移的影响 | 第126页 |
| 8.3.1.2 美她司酮对黑色素瘤细胞侵袭的影响 | 第126-127页 |
| 8.3.2 美她司酮对黑色素瘤细胞粘附的影响 | 第127-128页 |
| 8.3.3 美她司酮对B16F10细胞的黑色素含量的影响 | 第128-129页 |
| 8.3.4 美她司酮抑制B16F10细胞侵袭转移相关分子机制的研究 | 第129页 |
| 8.3.5 美她司酮抑制B16F10细胞粘附相关分子机制的研究 | 第129-131页 |
| 8.3.6 美她司酮对B16F10细胞在C57BL/6小鼠体内转移的影响 | 第131-132页 |
| 8.4 讨论 | 第132-136页 |
| 8.4.1 美她司酮抑制黑色素瘤细胞的迁移和侵袭 | 第134页 |
| 8.4.2 美她司酮干预黑色素瘤细胞的粘附 | 第134-135页 |
| 8.4.3 美她司酮抑制B16F10细胞的黑色素含量 | 第135页 |
| 8.4.4 美她司酮干预B16F10细胞在C57BL/6小鼠中的转移 | 第135-136页 |
| 8.5 小结 | 第136-137页 |
| 结论 | 第137-138页 |
| 展望 | 第138-139页 |
| 参考文献 | 第139-154页 |
| 致谢 | 第154-155页 |
| 附录 | 第155-161页 |
| 个人简历 | 第161-162页 |
