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Cell-in-cell介导病毒感染非易感细胞的机制及生物学效应研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第一章 绪论第13-32页
    1.1 Cell-in-cell背景介绍第13-25页
        1.1.1 Cell-in-cell的定义第13页
        1.1.2 Cell-in-cell的发展历程第13-14页
        1.1.3 Cell-in-cell的分类第14-18页
            1.1.3.1 Entosis第15-16页
            1.1.3.2 Emperitosis第16-18页
            1.1.3.3 Cannibalism第18页
        1.1.4 Cell-in-cell的生物学意义第18-20页
            1.1.4.1 Cell-in-cell对免疫细胞分化成熟的保育作用第19页
            1.1.4.2 维持免疫自稳第19-20页
        1.1.5 Cell-in-cell的临床意义第20-22页
            1.1.5.1 Cell-in-cell与肿瘤的关系第20-21页
            1.1.5.2 Cell-in-cell与炎症的关系第21-22页
        1.1.6 Cell-in-cell的理论模式第22-25页
            1.1.6.1 Cell-in-cell互作的细胞选择模式第22-23页
            1.1.6.2 Cell-in-cell互作的细胞微环境应激模式第23-25页
    1.2 病毒感染宿主细胞的研究进展第25-29页
        1.2.1 病毒的定义第25页
        1.2.2 病毒的感染方式第25-29页
            1.2.2.1 裸病毒感染第26-27页
            1.2.2.2 细胞接触传染第27-28页
            1.2.2.3 内吞途径感染第28-29页
        1.2.3 病毒感染非易感细胞的研究进展第29页
    1.3 本课题的目的意义和研究内容第29-32页
        1.3.1 目的意义第29-30页
        1.3.2 研究内容第30-31页
        1.3.3 技术路线第31-32页
第二章 病原微生物感染时体内cell-in-cell的研究第32-45页
    2.1 前言第32-33页
    2.2 材料与方法第33-37页
        2.2.1 实验标本第33页
        2.2.2 组织切片染色相关试剂第33页
        2.2.3 组织切片HE染色第33-34页
        2.2.4 免疫组化及荧光染色第34-35页
        2.2.5 原位杂交第35-36页
        2.2.6 电镜样品制作第36页
        2.2.7 结核分歧杆菌抗酸染色第36-37页
    2.3 结果与讨论第37-43页
        2.3.1 鼻咽癌患者肿瘤微环境中存在cell-in-cell结构第37-40页
        2.3.2 艾滋病人肠道上皮组织中存在cell-in-cell结构第40-42页
        2.3.3 结核病人的病灶中存在cell-in-cell结构第42-43页
    2.4 本章小结第43-45页
第三章 Cell-in-cell介导EB病毒在胞内感染非易感上皮细胞的研究第45-74页
    3.1 前言第45-47页
    3.2 材料与方法第47-52页
        3.2.1 细胞系第47页
        3.2.2 抗体和荧光染料第47页
        3.2.3 体外cell-in-cell体系构建和cell-in-cell统计第47-48页
        3.2.4 活细胞观察cell-in-cell发生后细胞命运第48-49页
        3.2.5 流式细胞仪分选发生cell-in-cell的细胞群第49页
        3.2.6 电镜样品制备及观察第49-50页
        3.2.7 细胞荧光染色和拍摄第50-51页
        3.2.8 细胞溶酶体标记第51页
        3.2.9 EB病毒的获得第51页
        3.2.10 培养上清中EB病毒定量第51页
        3.2.11 病毒的感染和检测第51-52页
        3.2.12 EB病毒的测序第52页
    3.3 结果与讨论第52-70页
        3.3.1 体外B淋巴细胞可以进入上皮细胞形成cell-in-cell结构第52-54页
        3.3.2 Cell-in-cell过程诱导EBV-eGFP Akata细胞中潜伏EB病毒的裂解复制第54-57页
        3.3.3 Cell-in-cell过程介导CNE-2 细胞感染EB病毒第57-61页
        3.3.4 CNE-2 细胞经胞内感染后会产生嗜性和毒力变化的病毒第61-66页
        3.3.5 正常上皮细胞系也可以通过in-cell infection的方式感染EB病毒第66-68页
        3.3.6 Cell-in-cell中效应细胞内EB病毒的活化依赖PI3K/AKT信号通路第68-70页
    3.4 本章小结第70-74页
第四章 Cell-in-cell介导HIV-1 传播至上皮细胞的作用研究第74-91页
    4.1 前言第74页
    4.2 材料与方法第74-81页
        4.2.1 细胞系第74-75页
        4.2.2 病毒和质粒第75页
        4.2.3 质粒转染和病毒收集第75-76页
        4.2.4 抗体和荧光染料第76页
        4.2.5 细胞培养上清中HIV-1 p24检测第76-77页
        4.2.6 HIV-1 感染实验第77页
        4.2.7 体外cell-in-cell体系构建和cell-in-cell统计第77-78页
        4.2.8 Cell-in-cell结构和HIV-1 p24荧光染色第78-79页
        4.2.9 上皮细胞中HIV-1 常见受体分析第79页
        4.2.10 HIV-1 潜伏细胞株C11中病毒激活的检测第79-80页
        4.2.11 电镜样品制备及观察第80-81页
    4.3 结果与讨论第81-88页
        4.3.1 HIV-1 阳性的T淋巴细胞可以与上皮细胞发生cell-in-cell第81-82页
        4.3.2 上皮细胞与H9/IIIB发生cell-in-cell后胞内可检测HIV-1 p24及病毒颗粒第82-84页
        4.3.3 上皮细胞不表达HIV-1 常见受体但支持HIV-1 的复制第84-85页
        4.3.4 Cell-in-cell无法有效介导HIV-1 对上皮细胞的产出性感染第85-87页
        4.3.5 细胞间接触作用不影响潜伏HIV-1 的激活第87-88页
    4.4 本章小结第88-91页
结论和展望第91-96页
参考文献第96-107页
附录第107-109页
攻读博士学位期间取得的研究成果第109-110页
致谢第110-112页
附件第112页

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