摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第13-32页 |
1.1 Cell-in-cell背景介绍 | 第13-25页 |
1.1.1 Cell-in-cell的定义 | 第13页 |
1.1.2 Cell-in-cell的发展历程 | 第13-14页 |
1.1.3 Cell-in-cell的分类 | 第14-18页 |
1.1.3.1 Entosis | 第15-16页 |
1.1.3.2 Emperitosis | 第16-18页 |
1.1.3.3 Cannibalism | 第18页 |
1.1.4 Cell-in-cell的生物学意义 | 第18-20页 |
1.1.4.1 Cell-in-cell对免疫细胞分化成熟的保育作用 | 第19页 |
1.1.4.2 维持免疫自稳 | 第19-20页 |
1.1.5 Cell-in-cell的临床意义 | 第20-22页 |
1.1.5.1 Cell-in-cell与肿瘤的关系 | 第20-21页 |
1.1.5.2 Cell-in-cell与炎症的关系 | 第21-22页 |
1.1.6 Cell-in-cell的理论模式 | 第22-25页 |
1.1.6.1 Cell-in-cell互作的细胞选择模式 | 第22-23页 |
1.1.6.2 Cell-in-cell互作的细胞微环境应激模式 | 第23-25页 |
1.2 病毒感染宿主细胞的研究进展 | 第25-29页 |
1.2.1 病毒的定义 | 第25页 |
1.2.2 病毒的感染方式 | 第25-29页 |
1.2.2.1 裸病毒感染 | 第26-27页 |
1.2.2.2 细胞接触传染 | 第27-28页 |
1.2.2.3 内吞途径感染 | 第28-29页 |
1.2.3 病毒感染非易感细胞的研究进展 | 第29页 |
1.3 本课题的目的意义和研究内容 | 第29-32页 |
1.3.1 目的意义 | 第29-30页 |
1.3.2 研究内容 | 第30-31页 |
1.3.3 技术路线 | 第31-32页 |
第二章 病原微生物感染时体内cell-in-cell的研究 | 第32-45页 |
2.1 前言 | 第32-33页 |
2.2 材料与方法 | 第33-37页 |
2.2.1 实验标本 | 第33页 |
2.2.2 组织切片染色相关试剂 | 第33页 |
2.2.3 组织切片HE染色 | 第33-34页 |
2.2.4 免疫组化及荧光染色 | 第34-35页 |
2.2.5 原位杂交 | 第35-36页 |
2.2.6 电镜样品制作 | 第36页 |
2.2.7 结核分歧杆菌抗酸染色 | 第36-37页 |
2.3 结果与讨论 | 第37-43页 |
2.3.1 鼻咽癌患者肿瘤微环境中存在cell-in-cell结构 | 第37-40页 |
2.3.2 艾滋病人肠道上皮组织中存在cell-in-cell结构 | 第40-42页 |
2.3.3 结核病人的病灶中存在cell-in-cell结构 | 第42-43页 |
2.4 本章小结 | 第43-45页 |
第三章 Cell-in-cell介导EB病毒在胞内感染非易感上皮细胞的研究 | 第45-74页 |
3.1 前言 | 第45-47页 |
3.2 材料与方法 | 第47-52页 |
3.2.1 细胞系 | 第47页 |
3.2.2 抗体和荧光染料 | 第47页 |
3.2.3 体外cell-in-cell体系构建和cell-in-cell统计 | 第47-48页 |
3.2.4 活细胞观察cell-in-cell发生后细胞命运 | 第48-49页 |
3.2.5 流式细胞仪分选发生cell-in-cell的细胞群 | 第49页 |
3.2.6 电镜样品制备及观察 | 第49-50页 |
3.2.7 细胞荧光染色和拍摄 | 第50-51页 |
3.2.8 细胞溶酶体标记 | 第51页 |
3.2.9 EB病毒的获得 | 第51页 |
3.2.10 培养上清中EB病毒定量 | 第51页 |
3.2.11 病毒的感染和检测 | 第51-52页 |
3.2.12 EB病毒的测序 | 第52页 |
3.3 结果与讨论 | 第52-70页 |
3.3.1 体外B淋巴细胞可以进入上皮细胞形成cell-in-cell结构 | 第52-54页 |
3.3.2 Cell-in-cell过程诱导EBV-eGFP Akata细胞中潜伏EB病毒的裂解复制 | 第54-57页 |
3.3.3 Cell-in-cell过程介导CNE-2 细胞感染EB病毒 | 第57-61页 |
3.3.4 CNE-2 细胞经胞内感染后会产生嗜性和毒力变化的病毒 | 第61-66页 |
3.3.5 正常上皮细胞系也可以通过in-cell infection的方式感染EB病毒 | 第66-68页 |
3.3.6 Cell-in-cell中效应细胞内EB病毒的活化依赖PI3K/AKT信号通路 | 第68-70页 |
3.4 本章小结 | 第70-74页 |
第四章 Cell-in-cell介导HIV-1 传播至上皮细胞的作用研究 | 第74-91页 |
4.1 前言 | 第74页 |
4.2 材料与方法 | 第74-81页 |
4.2.1 细胞系 | 第74-75页 |
4.2.2 病毒和质粒 | 第75页 |
4.2.3 质粒转染和病毒收集 | 第75-76页 |
4.2.4 抗体和荧光染料 | 第76页 |
4.2.5 细胞培养上清中HIV-1 p24检测 | 第76-77页 |
4.2.6 HIV-1 感染实验 | 第77页 |
4.2.7 体外cell-in-cell体系构建和cell-in-cell统计 | 第77-78页 |
4.2.8 Cell-in-cell结构和HIV-1 p24荧光染色 | 第78-79页 |
4.2.9 上皮细胞中HIV-1 常见受体分析 | 第79页 |
4.2.10 HIV-1 潜伏细胞株C11中病毒激活的检测 | 第79-80页 |
4.2.11 电镜样品制备及观察 | 第80-81页 |
4.3 结果与讨论 | 第81-88页 |
4.3.1 HIV-1 阳性的T淋巴细胞可以与上皮细胞发生cell-in-cell | 第81-82页 |
4.3.2 上皮细胞与H9/IIIB发生cell-in-cell后胞内可检测HIV-1 p24及病毒颗粒 | 第82-84页 |
4.3.3 上皮细胞不表达HIV-1 常见受体但支持HIV-1 的复制 | 第84-85页 |
4.3.4 Cell-in-cell无法有效介导HIV-1 对上皮细胞的产出性感染 | 第85-87页 |
4.3.5 细胞间接触作用不影响潜伏HIV-1 的激活 | 第87-88页 |
4.4 本章小结 | 第88-91页 |
结论和展望 | 第91-96页 |
参考文献 | 第96-107页 |
附录 | 第107-109页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第109-110页 |
致谢 | 第110-112页 |
附件 | 第112页 |