第一章 玉米脆秆突变体基因初定位 | 第7-48页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩写名词表 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 植物细胞壁的结构 | 第11-13页 |
1.2 脆秆性状研究进展 | 第13-14页 |
1.3 COBRA研究进展 | 第14-15页 |
1.4 影响三大成分降解转化因子的研究进展 | 第15-17页 |
1.5 研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-31页 |
2.1 材料来源 | 第18页 |
2.2 遗传群体的构建、田间性状的考察 | 第18页 |
2.3 主要使用仪器和试剂 | 第18-19页 |
2.4 植株叶片DNA的提取 | 第19页 |
2.5 叶片脆性考察 | 第19页 |
2.6 其他生物形状考察 | 第19-20页 |
2.7 叶脉、茎秆组织的显微学观察 | 第20页 |
2.8 脆性基因的克隆 | 第20-24页 |
2.8.1 引物设计 | 第20-21页 |
2.8.2 PCR体系 | 第21页 |
2.8.3 PCR产物的回收 | 第21-22页 |
2.8.4 TA克隆 | 第22页 |
2.8.5 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第22-23页 |
2.8.6 菌落PCR | 第23-24页 |
2.8.7 质粒DNA的提取 | 第24页 |
2.9 成熟植株秸秆三大成分与产糖 | 第24-28页 |
2.9.1 生物质稀酸预处理及酶解 | 第24-25页 |
2.9.2 生物质稀碱预处理及酶解 | 第25页 |
2.9.3 细胞壁多糖成分提取和测定 | 第25-26页 |
2.9.4 细胞壁木质素含量测定 | 第26-27页 |
2.9.5 比色法测定六碳糖和五碳糖 | 第27页 |
2.9.7 纤维素Cr I测定 | 第27-28页 |
2.9.8 扫描电镜观察 | 第28页 |
2.10 图位克隆粗定位、精细定位 | 第28-31页 |
2.10.1 试剂和仪器 | 第28-29页 |
2.10.2 SSR标记PCR体系和扩增 | 第29页 |
2.10.3 聚丙烯酰胺凝胶的制作及电泳 | 第29-31页 |
3 结果与分析 | 第31-46页 |
3.1 脆杆突变体的形态观察 | 第31-32页 |
3.2 脆性考察 | 第32-33页 |
3.3 生物学性状考察 | 第33-34页 |
3.4 脆杆突变体茎秆组织扫描电镜观察 | 第34-37页 |
3.5 茎秆细胞壁成分测定 | 第37-39页 |
3.6 成熟期秸秆降解转化效率测定 | 第39-41页 |
3.7 Zong31、突变体Y04在bk2区域的扩增 | 第41-43页 |
3.8 脆杆突变体Y04基因bk图位克隆 | 第43-46页 |
4 讨论与展望 | 第46-48页 |
第二章 芒草农杆菌介导转基因体系初探 | 第48-72页 |
摘要 | 第48-49页 |
Abstract | 第49-50页 |
缩写名词表 | 第50-51页 |
1 论文综述 | 第51-57页 |
1.1 芒草的种类、分布、产量、作为能源作物的特殊性 | 第51页 |
1.2 农杆菌在单子叶植物遗传转化的研究进展 | 第51-54页 |
1.2.1 农杆菌转化的机理与特点 | 第51-52页 |
1.2.2 影响农杆菌介导单子叶植物遗传转化的因素 | 第52-54页 |
1.3 芒草组织培养和遗传转化的研究进展 | 第54-55页 |
1.4 基因枪轰击转化的研究进展 | 第55-57页 |
1.4.1 基因枪转化的基本原理和特点 | 第56页 |
1.4.2 影响基因枪转化的因素 | 第56-57页 |
2 材料和方法 | 第57-63页 |
2.1 材料 | 第57-58页 |
2.1.1 植物材料 | 第57页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第57页 |
2.1.3 培养基配方 | 第57-58页 |
2.2 试验方法 | 第58-63页 |
2.2.1 愈伤组织的准备 | 第58-59页 |
2.2.2 农杆菌活化培养 | 第59页 |
2.2.3 农杆菌侵染 | 第59-60页 |
2.2.4 选择培养 | 第60页 |
2.2.5 分化培养及生根培养 | 第60页 |
2.2.6 基因枪轰击转化法 | 第60-63页 |
3 结果与分析 | 第63-69页 |
3.1 活性炭对芒W70、W89诱导愈伤率的影响 | 第63-64页 |
3.2 菌液浓度对转化效率的影响 | 第64-66页 |
3.3 侵染液中乙酰丁香酮浓度对转化效率的影响 | 第66-67页 |
3.4 侵染过程中表面活性剂TWEEN-20、silwet L-77 对转化效率的影响 | 第67-68页 |
3.5 超声波处理对转化效率的影响 | 第68页 |
3.6 基因枪方法 | 第68-69页 |
4.讨论 | 第69-72页 |
参考文献 | 第72-82页 |
附录 1 | 第82-85页 |
附录 2 | 第85-88页 |
个人简历 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |