| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第10-22页 |
| 1.1 猪繁殖与呼吸综合征 | 第10-13页 |
| 1.1.1 猪繁殖与呼吸综合征流行病学概述 | 第10-11页 |
| 1.1.2 PRRSV的分子生物学研究 | 第11-13页 |
| 1.1.2.1 病原学和理化特性 | 第11-12页 |
| 1.1.2.2 基因组结构 | 第12-13页 |
| 1.2 猪瘟 | 第13-15页 |
| 1.2.1 猪瘟的流行病学概述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 CSFV的分子生物学研究 | 第14-15页 |
| 1.2.2.1 病原学和理化特性 | 第14-15页 |
| 1.2.2.2 基因组结构 | 第15页 |
| 1.3 猪圆环病毒 | 第15-18页 |
| 1.3.1 猪圆环病毒的流行病学概述 | 第15-16页 |
| 1.3.2 PCV的分子生物学研究 | 第16-18页 |
| 1.3.2.1 病原学和理化特性 | 第16-17页 |
| 1.3.2.2 基因组结构 | 第17-18页 |
| 1.4 针对当前广西地区猪群疫病流行情况的防制建议 | 第18-19页 |
| 1.5 实验研究目的与意义 | 第19-21页 |
| 1.6 技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-33页 |
| 2.1 材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 主要仪器及设备 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 病料 | 第24页 |
| 2.1.4 传代用细胞 | 第24页 |
| 2.1.5 生物学软件 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-33页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第25页 |
| 2.2.2 病料的处理 | 第25-26页 |
| 2.2.3 DNA的提取 | 第26页 |
| 2.2.4 RNA的提取 | 第26页 |
| 2.2.5 cDNA的制备 | 第26-27页 |
| 2.2.6 PCR反应体系 | 第27-28页 |
| 2.2.7 PCR产物的纯化、回收及测序 | 第28页 |
| 2.2.8 病毒培养与分离 | 第28-29页 |
| 2.2.9 编码区的扩增和克隆 | 第29-30页 |
| 2.2.10 参考毒株 | 第30-33页 |
| 第三章 结果与分析 | 第33-56页 |
| 3.1 2011-2012主要疫病病原检测结果 | 第33-42页 |
| 3.1.1 PRRSV(变异株)的RT-PCR检测结果 | 第33-34页 |
| 3.1.2 CSFV的RT-PCR检测结果 | 第34-35页 |
| 3.1.3 PCV-2的PCR检测结果 | 第35-40页 |
| 3.1.4 病原全部检测结果 | 第40-42页 |
| 3.1.4.1 三种疫病总体流行情况 | 第40页 |
| 3.1.4.2 三种疫病混合感染情况 | 第40-42页 |
| 3.2 欧洲型PRRSV(EU-PRRSV) ORF5基因克隆与序列分析 | 第42-56页 |
| 3.2.1 EU-PRRSV的RT-PCR检测结果 | 第42-43页 |
| 3.2.2 EU-PRRSV的分离与鉴定 | 第43-46页 |
| 3.2.2.1 EU-PRRSV在Marc-145中培养 | 第43-44页 |
| 3.2.2.2 EU-PRRSV的形态 | 第44-45页 |
| 3.2.2.3 细胞培养分离的EU-PRRSV的RT-PCR检测 | 第45-46页 |
| 3.2.3 4株EU-PRRSV ORF5基因的克隆 | 第46-48页 |
| 3.2.3.1 EU-PRSSV ORF5基因的全长扩增 | 第46-47页 |
| 3.2.3.2 重组质粒双酶切鉴定结果 | 第47-48页 |
| 3.2.3.3 重组质粒的RT-PCR鉴定 | 第48页 |
| 3.2.4 4株EU-PRRSV ORF5基因的序列分析 | 第48-56页 |
| 3.2.4.1 ORF5的核苷酸序列同源性分析 | 第48-52页 |
| 3.2.4.3 ORF5基因核苷酸进化树分析 | 第52-53页 |
| 3.2.4.4 ORF5基因推导氨基酸位点变异分析 | 第53-56页 |
| 第四章 讨论 | 第56-61页 |
| 4.1 广西PRRSV、CSFV、PCV-2的检出情况 | 第56-57页 |
| 4.2 广西PRRSV、CSFV、PCV-2的混合感染情况 | 第57-58页 |
| 4.3 广西4株EU-PRRSV ORF5基因系统进化分析 | 第58-59页 |
| 4.4 广西4株EU-PRRSV ORF5基因推导GP5氨基酸变异分析 | 第59-61页 |
| 第五章 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及专利情况 | 第69页 |
