摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
符号说明 | 第14-16页 |
第一章 综述 | 第16-25页 |
1.1 片形吸虫病 | 第17-22页 |
1.1.1 病原体形态 | 第17页 |
1.1.2 片形吸虫的生活史 | 第17页 |
1.1.3 片形吸虫的中间宿主 | 第17-18页 |
1.1.4 片形吸虫病危害 | 第18-20页 |
1.1.5 片形吸虫病诊断的研究进展 | 第20-22页 |
1.2 免疫胶体金技术的研究进展 | 第22-23页 |
1.2.1 胶体金颗粒的制备方法 | 第22-23页 |
1.2.2 免疫胶体金诊断技术的基本原理 | 第23页 |
1.2.3 免疫胶体金技术在寄生虫病诊断中的应用 | 第23页 |
1.3. 本课题研究目的和意义 | 第23-25页 |
第二章 大片形吸虫ES抗原、抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体和兔抗小鼠IgG抗体的制备 | 第25-37页 |
2.1 材料 | 第25-28页 |
2.1.1 实验动物 | 第25页 |
2.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
2.1.3 试剂配制 | 第26-27页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第27-28页 |
2.2 方法 | 第28-32页 |
2.2.1 大片形吸虫分泌排泄抗原的制备 | 第28页 |
2.2.2 ES抗原浓度的测定(BCA法) | 第28页 |
2.2.3 杂交瘤细胞的复苏 | 第28-29页 |
2.2.4 杂交瘤细胞的冻存 | 第29页 |
2.2.5 单克隆抗体的制备 | 第29页 |
2.2.6 单抗纯化 | 第29-30页 |
2.2.7 单抗效价的测定 | 第30-31页 |
2.2.8 单抗纯度的鉴定 | 第31页 |
2.2.9 单抗浓度的测定 | 第31页 |
2.2.10 兔抗小鼠IgG二抗的制备和纯化 | 第31-32页 |
2.3 结果 | 第32-34页 |
2.3.1 ES抗原浓度和7D1单抗浓度测定 | 第32页 |
2.3.2 7D1单抗效价的测定 | 第32页 |
2.3.3 7D1单抗纯度的鉴定 | 第32-34页 |
2.3.4 兔抗小鼠IgG效价的测定 | 第34页 |
2.3.5 兔抗小鼠IgG浓度的测定 | 第34页 |
2.4 讨论 | 第34-37页 |
2.4.1 抗原抗体的制备 | 第34页 |
2.4.2 ES抗原的诊断意义 | 第34-35页 |
2.4.3 杂交瘤细胞的培养 | 第35页 |
2.4.4 抗体纯化 | 第35-37页 |
第三章 大片形吸虫病免疫胶体金诊断试纸条的研制 | 第37-63页 |
3.1 材料 | 第37-38页 |
3.1.1 主要试剂 | 第37页 |
3.1.2 试剂配制 | 第37-38页 |
3.1.3 主要仪器 | 第38页 |
3.2 方法 | 第38-46页 |
3.2.1 玻璃器皿的处理 | 第38-39页 |
3.2.2 胶体金溶液的制备 | 第39页 |
3.2.3 制备胶体金质量的鉴定 | 第39-40页 |
3.2.4 胶体金溶液的稳定性试验 | 第40页 |
3.2.5 纳米金颗粒的选择 | 第40页 |
3.2.6 金标抗体的制备与纯化 | 第40-41页 |
3.2.7 金标抗体活性鉴定 | 第41-42页 |
3.2.8 胶体金诊断试纸的制备 | 第42-45页 |
3.2.9 试纸条质量评估 | 第45页 |
3.2.10 试纸条检测效果的评价与初步应用 | 第45-46页 |
3.2.11 统计分析 | 第46页 |
3.3 结果 | 第46-58页 |
3.3.1 胶体金的制备 | 第46页 |
3.3.2 胶体金质量的鉴定 | 第46-48页 |
3.3.3 胶体金稳定性试验 | 第48-50页 |
3.3.4 胶体金粒径大小的选择 | 第50-51页 |
3.3.5 金标抗体的制备 | 第51-52页 |
3.3.6 金标抗体活性鉴定 | 第52-53页 |
3.3.7 胶体金诊断试纸条的制备 | 第53-55页 |
3.3.8 试纸条质量评估 | 第55-57页 |
3.3.9 试纸条临床诊断结果评估 | 第57-58页 |
3.4 讨论 | 第58-63页 |
3.4.1 试纸条的研制 | 第58-59页 |
3.4.2 试纸条的应用 | 第59页 |
3.4.3 胶体金的鉴定 | 第59页 |
3.4.4 胶体金标记抗体 | 第59-60页 |
3.4.5 金标抗体活性的鉴定 | 第60页 |
3.4.6 待检样本的选择与处理 | 第60-61页 |
3.4.7 标记用抗体和检测线抗体的选择与优化 | 第61页 |
3.4.8 稳定剂使用 | 第61页 |
3.4.9 试纸条和夹心ELISA法正确率的评估及原因分析 | 第61-62页 |
3.4.10 试纸条存在的不足 | 第62-63页 |
第四章 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第73页 |