| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 本文缩写词 | 第8-9页 |
| 第一章 综述 | 第9-17页 |
| 1 差异表达基因筛选技术研究进展 | 第9-11页 |
| 1.1 mRNA差异显示技术 | 第9页 |
| 1.2 cDNA示差分析技术 | 第9页 |
| 1.3 抑制消减杂交技术 | 第9-10页 |
| 1.4 基因芯片技术 | 第10页 |
| 1.5 基因鉴定集成法 | 第10页 |
| 1.6 数字基因表达谱 | 第10-11页 |
| 1.7 cDNA-AFLP技术 | 第11页 |
| 2 植物抗性相关基因研究进展 | 第11-15页 |
| 2.1 植物抗病基因研究进展 | 第11-14页 |
| 2.1.1 与病原物亲和性因子有关的抗病性 | 第11页 |
| 2.1.2 与病原物不亲和性因子有关的抗病性 | 第11-12页 |
| 2.1.3 信号识别与信号传递 | 第12页 |
| 2.1.4 植物抗病基因的克隆 | 第12-13页 |
| 2.1.5 抗病基因的鉴定 | 第13页 |
| 2.1.6 植物抗病基因的功能 | 第13-14页 |
| 2.2 植物防卫反应基因研究进展 | 第14-15页 |
| 2.2.1 防卫反应发生的特点 | 第14页 |
| 2.2.2 防卫反应基因的研究策略 | 第14页 |
| 2.2.3 防卫反应基因的主要类型 | 第14-15页 |
| 2.2.4 防卫反应基因的表达 | 第15页 |
| 3 论文立项背景及研究意义 | 第15-17页 |
| 3.1 本论文课题来源 | 第15页 |
| 3.2 本论文研究背景和意义 | 第15-16页 |
| 3.3 本论文研究主要内容和技术路线 | 第16-17页 |
| 3.3.1 本论文的主要研究内容 | 第16页 |
| 3.3.2 技术路线 | 第16-17页 |
| 第二章 穗枯病菌诱导的野生车前草抗性相关基因片段筛选 | 第17-45页 |
| 1 材料 | 第17-19页 |
| 1.1 菌种 | 第17页 |
| 1.2 车前草幼苗 | 第17页 |
| 1.3 培养基 | 第17页 |
| 1.4 主要试剂及其配置 | 第17-18页 |
| 1.5 主要仪器和耗材 | 第18页 |
| 1.6 引物合成 | 第18-19页 |
| 2 方法 | 第19-25页 |
| 2.1 接菌诱导 | 第19页 |
| 2.2 总RNA提取 | 第19-20页 |
| 2.3 RNA纯度的检测 | 第20页 |
| 2.4 cDNA合成 | 第20-21页 |
| 2.5 cDNA的检测 | 第21页 |
| 2.6 DNA-AFLP分析 | 第21-25页 |
| 2.6.1 cDNA酶切 | 第21-22页 |
| (1) cDNA样品编号 | 第21页 |
| (2) 内切酶及其缓冲液选择 | 第21-22页 |
| (3) 酶切反应 | 第22页 |
| 2.6.2 酶切片段的连接 | 第22-23页 |
| 2.6.3 预扩增 | 第23-24页 |
| 2.6.4 选择性扩增 | 第24页 |
| 2.6.5 cDNA-AFLP转录图的获得 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-43页 |
| 3.1 样品总RNA提取 | 第25页 |
| 3.2 cDNA合成 | 第25-26页 |
| 3.3 预扩增 | 第26页 |
| 3.4 选择性扩增初步筛选引物 | 第26-27页 |
| 3.5 选择性扩增再次筛选引物 | 第27-33页 |
| 3.6 cDNA-AFLP转录图谱的获得 | 第33-43页 |
| 4 结论与讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 穗枯病菌诱导的野生车前草抗性相关基因片段克隆 | 第45-54页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 1.1 感受态 | 第45页 |
| 1.2 培养基 | 第45页 |
| 1.3 连接载体系统及抗生素 | 第45页 |
| 1.4 试剂及其配置 | 第45页 |
| 1.5 主要仪器和耗材 | 第45-46页 |
| 2 方法 | 第46-48页 |
| 2.1 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第46页 |
| 2.2 差异性片段的回收 | 第46页 |
| 2.3 差异片段的2次扩增 | 第46页 |
| 2.4 PCR产物的割胶回收和纯化 | 第46-47页 |
| 2.5 差异片段的克隆 | 第47页 |
| 2.6 蓝白斑阳性克隆筛选 | 第47-48页 |
| 2.7 重组质粒快速鉴定 | 第48页 |
| 2.8 重组质粒DNA小量提取 | 第48页 |
| 2.9 目的基因组片段的序列的测定 | 第48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-52页 |
| 3.1 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第48-50页 |
| 3.2 差异片段的2次扩增 | 第50页 |
| 3.3 PCR产物的割胶回收 | 第50页 |
| 3.4 差异片段的克隆 | 第50-51页 |
| 3.5 差异片段D1的测序 | 第51-52页 |
| 3.6 差异片段D1的功能分析 | 第52页 |
| 4 结论与讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58页 |