致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1. 文献综述 | 第8-13页 |
1.1 烟草打顶引起的生理变化 | 第8页 |
1.2 烟碱合成调控 | 第8-12页 |
1.2.1 烟碱的合成 | 第8-10页 |
1.2.2 烟碱的调控 | 第10-12页 |
1.3 差异蛋白质组研究 | 第12-13页 |
2. 引言 | 第13-14页 |
3. 材料与方法 | 第14-22页 |
3.1 材料、试剂与仪器 | 第14页 |
3.1.1 材料 | 第14页 |
3.1.2 主要试剂 | 第14页 |
3.1.3 主要仪器 | 第14页 |
3.2 实验方法 | 第14-22页 |
3.2.1 TCA法 | 第14-15页 |
3.2.2 酚法 | 第15页 |
3.2.3 TCA-酚法 | 第15-16页 |
3.2.4 蛋白定量 | 第16-17页 |
3.2.4.1 标准曲线制作 | 第16页 |
3.2.4.2 样品提取液中蛋白质浓度的测定 | 第16-17页 |
3.2.5 蛋白质组实验反应程序及数据分析 | 第17-18页 |
3.2.5.1 单向电泳反应程序 | 第17页 |
3.2.5.2 双向电泳反应程序 | 第17-18页 |
3.2.5.3 数据分析 | 第18页 |
3.2.6 总RNA的提取 | 第18页 |
3.2.7 反转录cDNA第一链 | 第18-19页 |
3.2.8 各基因qRT-PCR验证 | 第19-21页 |
3.2.8.1 引物设计 | 第19-20页 |
3.2.8.2 qRT-PCR反应体系 | 第20页 |
3.2.8.3 qRT-PCR反应程序 | 第20-21页 |
3.2.8.4 数据处理与分析 | 第21页 |
3.2.9 盐处理、生长素与MeJA处理、干旱、低温与叶片伤害处理方法 | 第21-22页 |
3.2.9.1 盐处理 | 第21页 |
3.2.9.2 生长素处理 | 第21页 |
3.2.9.3 MeJA处理 | 第21页 |
3.2.9.4 干旱处理 | 第21-22页 |
3.2.9.5 低温处理 | 第22页 |
3.2.9.6 叶片伤害处理 | 第22页 |
4. 结果与分析 | 第22-44页 |
4.1 烟草根尖组织蛋白质组提取方法的建立 | 第22-26页 |
4.2 烟草根尖组织蛋白质组双向电泳分析 | 第26-28页 |
4.3 差异表达蛋白质与数字基因表达谱的综合分析 | 第28-29页 |
4.4 几个打顶响应蛋白质与基因的表达分析 | 第29-35页 |
4.4.1 总RNA质量检测 | 第29-30页 |
4.4.2 几个打顶响应基因的表达分析 | 第30-35页 |
4.5 烟碱合成相关bHLH转录因子作用分析 | 第35-44页 |
4.5.1 bHLH转录因子家族进化树分析 | 第35-40页 |
4.5.2 烟碱合成关键酶PMT对不同胁迫的响应 | 第40-41页 |
4.5.3 烟碱合成相关bHLH转录因子对不同胁迫的响应 | 第41-44页 |
5. 讨论与结论 | 第44-47页 |
5.1 讨论 | 第44-46页 |
5.2 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
Abstract | 第52-53页 |