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猪戊型肝炎病毒ORF2基因的原核表达及单克隆抗体的制备

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 绪论第12-24页
   ·研究背景第12页
   ·研究现状第12-24页
     ·戊型肝炎病毒的流行病学第12-13页
     ·戊型肝炎病毒的理化特征第13-14页
     ·戊型肝炎病毒的基因型第14-15页
     ·戊型肝炎病毒的基因组第15-16页
     ·戊型肝炎病毒的细胞培养第16-17页
     ·致病性第17页
     ·戊型肝炎的临床症状和病理变化第17-18页
     ·戊型肝炎的检测第18-20页
     ·疫苗的研究第20-22页
     ·戊型肝炎病毒的抗原位点第22-24页
第二章 戊型肝炎病毒ORF2基因的原核表达第24-52页
   ·材料第24页
     ·病毒血清第24页
     ·菌株载体与酶类第24页
     ·试剂与仪器第24页
   ·实验方法第24-34页
     ·病毒总RNA提取第24-25页
     ·目的基因的表达第25-29页
     ·原核表达载体的构建第29-30页
     ·目的蛋白的诱导表达第30-33页
     ·工程菌的大量表达第33页
     ·重组蛋白的纯化第33页
     ·动物实验第33-34页
   ·结果与分析第34-49页
     ·HEVORF2序列抗原性,亲水性和信号肽的预测分析第34-35页
     ·目的基因的PCR扩增第35-37页
     ·重组克隆载体的PCR及酶切鉴定第37-39页
     ·序列测定与分析第39-42页
     ·重组表达质粒的酶切鉴定第42页
     ·目的片段的表达及检测第42-45页
     ·表达产物的纯化效果与蛋白浓度的测定第45-47页
     ·目的蛋白的Western-Blot鉴定第47-49页
   ·讨论第49-52页
第三章 单克隆抗体的制备第52-59页
   ·实验材料第52-53页
     ·细胞株、实验动物第52页
     ·试剂和仪器第52页
     ·免疫原的准备第52-53页
   ·实验方法第53-54页
     ·动物免疫第53页
     ·细胞准备及融合第53页
     ·杂交瘤细胞的筛选及鉴定第53页
     ·单克隆抗体腹水的制备及单抗的纯化第53-54页
     ·纯化单克隆抗体的酶联免疫吸附(EL!S)A及Wsetern一Blto检测第54页
   ·结果与分析第54-57页
     ·筛选方法中最佳杭原的包被浓度和最佳血清稀释度的确定第54-55页
     ·抗体的间接ELlsA方法检测效果第55-56页
     ·杂交瘤细胞株的建立第56-57页
   ·讨论第57-59页
第四章 全文结论第59-60页
参考文献第60-66页
致谢第66-67页
作者简介第67页

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