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精氨酸激酶在棉铃虫中的表达及调控研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 文献综述第14-24页
   ·精氨酸激酶研究进展第14-18页
     ·精氨酸激酶蛋白性质第14-15页
     ·精氨酸激酶的拷贝数及特异性表达第15-16页
     ·精氨酸激酶与免疫力及抗性的关系第16-17页
     ·精氨酸激酶与过敏源之间的关系第17页
     ·外界物质对精氨酸激酶的影响第17页
     ·精氨酸激酶与肌酸激酶的关系第17-18页
     ·精氨酸激酶在物种分类中的作用第18页
   ·棉铃虫防治工作的研究进展第18-21页
     ·棉铃虫简介第18-19页
     ·Bt 毒素的作用机制第19页
     ·棉铃虫对Bt 毒素的抗性研究进展第19-21页
     ·棉铃虫相关解毒酶的研究进展第21页
   ·精氨酸激酶在农业防治中的研究第21-22页
   ·本文的目的、意义和技术路线第22-24页
     ·目的和意义第22-23页
     ·技术路线第23-24页
第二章 精氨酸激酶基因的克隆及表达第24-35页
   ·材料与方法第24-30页
     ·实验材料与试剂第24页
     ·实验方法第24-30页
   ·结果与分析第30-33页
     ·AK 基因的克隆第30页
     ·AK 蛋白表达载体(pET32a-AK)的构建及验证第30-31页
     ·不同诱导时间下AK 融合蛋白的表达情况第31-32页
     ·不同浓度的IPTG 对AK 融合蛋白表达的影响第32-33页
   ·讨论第33-35页
第三章 精氨酸激酶启动子的克隆第35-43页
   ·实验材料和方法第35-38页
     ·实验材料第35页
     ·实验试剂第35页
     ·实验方法第35-38页
   ·结果与分析第38-41页
     ·棉铃虫DNA 的提取第38页
     ·基因组步移结果第38-39页
     ·AK 基因的序列信息第39-41页
   ·讨论第41-43页
第四章 精氨酸激酶表达的荧光定量分析第43-48页
   ·实验材料和方法第43-44页
     ·实验材料第43页
     ·试剂第43页
     ·实验方法第43-44页
   ·结果与分析第44-46页
     ·荧光定量反应程序的优化第44-45页
     ·荧光定量标准曲线的建立第45-46页
     ·棉铃虫AK 表达的荧光定量分析第46页
   ·讨论第46-48页
第五章 棉铃虫精氨酸激酶的 RNAi 分析第48-60页
   ·实验材料和方法第48-51页
     ·实验材料第48页
     ·试剂第48页
     ·相关溶液的配制第48-49页
     ·实验方法第49-51页
   ·结果与分析第51-58页
     ·RNAi 载体及表达菌株的相关信息第51页
     ·干扰AK 基因载体(RNAi-AK)的构建与验证(饲喂法)第51-52页
     ·转RNAi-AK 菌株RNA 的提取(饲喂法)第52-53页
     ·棉铃虫的饲养及取食细菌与否的鉴定第53页
     ·取食RNAi-AK 菌株后棉铃虫AK 表达量分析第53-54页
     ·取食RNAi-AK 菌株后棉铃虫生态学观测第54-55页
     ·RANi-AK 的构建与验证(注射法)第55-56页
     ·dsRNA 体外的大量合成第56-57页
     ·棉铃虫注射dsRNA 的部位第57页
     ·注射RANi-AK 后AK 表达量分析第57-58页
   ·讨论第58-60页
第六章 精氨酸激酶及抗性相关基因表达量分析第60-66页
   ·实验材料和方法第60页
     ·实验材料第60页
     ·实验试剂第60页
     ·实验方法第60页
   ·结果与分析第60-64页
     ·不同棉铃虫品系相关抗性基因指数扩增期的确定第60-61页
     ·不同棉铃虫品系抗性相关基因表达量分析第61-62页
     ·96S 和Bt-R 棉铃虫品系中AK 的荧光定量分析第62-63页
     ·干涉AK 后96S 棉铃虫品系抗性相关基因的表达量分析第63-64页
   ·讨论第64-66页
第七章 生理指标测定第66-72页
   ·实验材料和方法第66-69页
     ·实验材料第66页
     ·实验试剂第66页
     ·实验方法第66-69页
   ·结果与分析第69-70页
     ·96S 和Bt-R 棉铃虫品系血淋巴中可溶蛋白含量的测定第69页
     ·96S 和Bt-R 棉铃虫品系AK 活力的测定第69-70页
     ·96S 和Bt-R 棉铃虫品系ALP 活性的测定第70页
   ·讨论第70-72页
第八章 结论第72-74页
参考文献第74-82页
致谢第82-83页
作者简历第83页

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