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干扰素诱导的跨膜蛋白IFITM3的结构和功能的液体核磁共振与电子顺磁共振研究

摘要第5-7页
Abshact第7-8页
第一章 膜蛋白及其结构研究背景介绍第12-20页
    1.1 膜蛋白概述第12-13页
    1.2 膜蛋白的结构与功能研究方法第13-14页
    1.3 膜蛋白结构研究进展与展望第14-16页
    参考文献第16-20页
第二章 膜蛋白研究的液体核磁共振方法第20-40页
    2.1 液体核磁共振基本理论第20-24页
        2.1.1 核磁共振现象与基本理论概述第20-21页
        2.1.2 弛豫第21-23页
        2.1.3 化学位移第23-24页
    2.2 液体核磁共振研究蛋白质结构的基本实验方法第24-37页
        2.2.1 基本实验技术第24-28页
        2.2.2 一维氢谱实验第28页
        2.2.3 同核多维谱实验第28-30页
        2.2.4 异核多维谱实验第30-34页
        2.2.5 弛豫实验第34-35页
        2.2.6 化学位移归属与结构计算第35-37页
    参考文献第37-40页
第三章 干扰素诱导的跨膜蛋白工FITM3背景介绍第40-52页
    3.1 引言第40-41页
    3.2 IFITM3背景信息第41-45页
    3.3 IFITM3的结构相关信息第45-49页
        3.3.1 拓扑结构模型一第45-46页
        3.3.2 拓扑结构模型二第46-47页
        3.3.3 拓扑结构模型三第47-49页
    参考文献第49-52页
第四章 IFITM3的液体核磁共振研究第52-74页
    4.1 IFITM3同源性分析与结构预测第52-56页
        4.1.1 IFITM3同源性分析第52-53页
        4.1.2 IFITM3的二级结构预测第53-54页
        4.1.3 IFITM3的跨膜特性预测第54-56页
    4.2 实验材料和实验方法第56-62页
        4.2.1 表达载体的构建第56页
        4.2.2 表达条件的优化第56-57页
        4.2.3 目的蛋白质的纯化与去垢剂的筛选第57-58页
        4.2.4 目的蛋白质的鉴定与稳定性分析第58页
        4.2.5 核磁样品准备第58页
        4.2.6 核磁实验条件的优化第58-59页
        4.2.7 核磁实验与数据处理第59页
        4.2.8 化学位移归属与结构计算第59-62页
    4.3 实验结果与讨论第62-71页
        4.3.1 IFITM3表达条件筛选第62-63页
        4.3.2 IFITM3的表达纯化、去垢剂筛选和热稳定性实验第63-64页
        4.3.3 IFITM3在不同温度下的液体核磁光谱第64-65页
        4.3.4 IFITM3的液体核磁共振实验第65-67页
        4.3.5 IFITM3的化学位移归属第67-69页
        4.3.6 IFITM3的结构计算第69-70页
        4.3.7 IFITM3的主链动力学分析第70-71页
    4.4 本章总结第71-72页
    参考文献第72-74页
第五章 工FITM3的电子顺磁共振研究第74-89页
    5.1 电子顺磁共振研究介绍第74-79页
        5.1.1 电子顺磁共振理论简介第74-76页
        5.1.2 电子顺磁共振谱仪简介第76-77页
        5.1.3 位点特异性自旋标记电子顺磁共振第77-79页
    5.2 实验材料与实验方法第79-82页
        5.2.1 突变位点设计第79页
        5.2.2 分子克隆引入半胱氨酸突变第79-81页
        5.2.3 蛋白质表达与纯化第81页
        5.2.4 EPR样品制备第81页
        5.2.5 实验数据采集第81-82页
    5.3 实验结果与讨论第82-87页
        5.3.1 IFITM3各突变体表达纯化结果第82-83页
        5.3.2 IFITM3的CW-EPR实验第83-84页
        5.3.3 IFITM3跨膜区的动力学特征分析第84页
        5.3.4 IFITM3跨膜区位点的易趋性分析第84-87页
    5.4 本章总结第87-88页
    参考文献第88-89页
附录一 常用核磁共振研究的自旋核的物理参数第89-90页
附录二 常用蛋白质表达培养基与纯化缓冲液配方第90-91页
附录三 常用去垢剂参数列表第91-92页
附录四 IFITM3结构计算脚本文件mkpsf.inp第92-96页
附录五 IFITM3结构计算脚本文件anneal.inp第96-104页
附录六 电子顺磁共振研究IFITM3的易趋性数据列表第104-106页
致谢第106-107页
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果第107页

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