| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| ·研究背景 | 第13-14页 |
| ·赤霉素的生理作用及合成代谢途径 | 第14-17页 |
| ·赤霉素的发现及生理作用 | 第14页 |
| ·赤霉素的生物合成代谢途径 | 第14-16页 |
| ·赤霉素的调节 | 第16-17页 |
| ·赤霉素合成关键酶的研究进展 | 第17-18页 |
| ·古巴焦磷酸合成酶（Copalyl pyrophosphate synthase，CPS）及其基因 | 第17页 |
| ·内根-贝壳杉烯合成酶（Ent-kaurene synthase，KS）及其基因 | 第17页 |
| ·内根-贝壳杉烯氧化酶（Ent-kaurene oxidase，KO）及其基因 | 第17页 |
| ·GA20-氧化酶及其基因 | 第17-18页 |
| ·GA3β-羟化酶及其基因 | 第18页 |
| ·赤霉素矮化突变体研究 | 第18页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 ‘中矮1 号’GA20-氧化酶和贝壳杉烯氧化酶基因的克隆 | 第20-45页 |
| ·材料和试剂 | 第20页 |
| ·试验材料 | 第20页 |
| ·克隆菌株及载体 | 第20页 |
| ·酶及生化试剂 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-28页 |
| ·梨叶片总RNA 提取 | 第20-21页 |
| ·总RNA 纯化 | 第21页 |
| ·反转录体系及程序 | 第21-22页 |
| ·目的基因中间片段的克隆 | 第22-24页 |
| ·目的中间片段的胶回收纯化 | 第24页 |
| ·回收片段和载体连接 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的转化 | 第25页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第25页 |
| ·序列分析 | 第25页 |
| ·3′末端和5′末端的获得 | 第25-27页 |
| ·‘中矮1 号’GA20-氧化酶基因及贝壳杉烯氧化酶基因全长的获得 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-42页 |
| ·梨叶片总RNA 提取 | 第28页 |
| ·目的基因中间片段的克隆 | 第28-30页 |
| ·目的基因的3′RACE 克隆 | 第30-32页 |
| ·目的基因的5′RACE 克隆 | 第32-35页 |
| ·全长基因的克隆 | 第35-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| ·高质量梨叶片总RNA 的提取 | 第42-43页 |
| ·关于RACE 克隆基因 | 第43-45页 |
| 第三章 GA20-氧化酶和贝壳杉烯氧化酶基因的表达分析 | 第45-53页 |
| ·材料和试剂 | 第45页 |
| ·试验材料 | 第45页 |
| ·菌株及载体 | 第45页 |
| ·酶及其他生化试剂 | 第45页 |
| ·试验方法 | 第45-48页 |
| ·GA20-氧化酶和贝壳杉烯氧化酶基因的编码区分析 | 第45-46页 |
| ·GA20-氧化酶和贝壳杉烯氧化酶基因荧光定量表达分析 | 第46-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-51页 |
| ·不同时期叶片总RNA 提取结果 | 第48页 |
| ·GA20-氧化酶和贝壳杉烯氧化酶基因的编码区比较 | 第48-49页 |
| ·GA20-氧化酶和贝壳杉烯氧化酶基因荧光定量表达分析 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简历 | 第61页 |
