摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略词 | 第7-11页 |
引言 | 第11-12页 |
第一部分 文献研究 | 第12-26页 |
1 现代医学对功能性便秘的认识 | 第12-17页 |
1.1 功能性便秘的流行病学研究 | 第12-13页 |
1.2 功能性便秘的发病原因 | 第13页 |
1.3 功能性便秘的发病机制 | 第13-16页 |
1.3.1 肠神经递质与功能性便秘 | 第14-15页 |
1.3.2 水通道蛋白与功能性便秘 | 第15-16页 |
1.3.3 Cajal间质细胞与功能性便秘 | 第16页 |
1.4 功能性便秘的治疗方法 | 第16-17页 |
2 中医学对便秘的认识 | 第17-24页 |
2.1 便秘的病名溯源 | 第17-18页 |
2.2 便秘的病因病机 | 第18-21页 |
2.3 功能性便秘的辨证论治 | 第21-24页 |
3 分析与小结 | 第24-26页 |
第二部分 实验研究 | 第26-97页 |
实验1 VIP对功能性便秘大鼠排便及AQP3、cAMP-PKA的影响 | 第26-48页 |
1 实验材料 | 第26-29页 |
1.1 实验动物 | 第26-27页 |
1.2 主要药品及试剂 | 第27-28页 |
1.3 主要仪器设备 | 第28-29页 |
2 实验方法 | 第29-36页 |
2.1 动物分组及给药方法 | 第29-30页 |
2.1.1 动物分组方法 | 第29页 |
2.1.2 造模及给药方法 | 第29-30页 |
2.2 标本采集方法 | 第30页 |
2.3 指标检测方法 | 第30-36页 |
2.3.1 首粒黑便、粪便含水率观测方法 | 第30页 |
2.3.2 结肠肌电检测方法 | 第30-31页 |
2.3.3 ELISA检测血清胃动素、胃泌素、P物质 | 第31-32页 |
2.3.4 Q-PCR法检测大鼠结肠组织中AQP3、cAMP、PKAmRNA表达 | 第32-34页 |
2.3.5 免疫组织化检测结肠组织VIP、AQP3的表达 | 第34-35页 |
2.3.6 Western bolt法检测大鼠结肠组织中VIP、AQP3蛋白的表达 | 第35-36页 |
2.4 统计学处理 | 第36页 |
3 实验结果 | 第36-46页 |
3.1 一般情况 | 第36-38页 |
3.2 VIP对正常及便秘大鼠首粒黑便排出时间及粪便含水率的影响 | 第38-39页 |
3.3 VIP对正常及便秘大鼠在体结肠肌电的影响 | 第39-41页 |
3.4 VIP对正常及便秘大鼠血清中胃动素、胃泌素、P物质含量的影响 | 第41-42页 |
3.5 VIP对正常及便秘大鼠结肠组织中AQP3、cAMP、PKAmRNA相对表达量的影响 | 第42-43页 |
3.6 VIP对正常及便秘大鼠结肠组织中VIP、AQP3蛋白表达水平的影响 | 第43-44页 |
3.7 VIP对正常及便秘大鼠结肠组织VIP、AQP3免疫组化结果的影响 | 第44-46页 |
4 分析与小结 | 第46-48页 |
实验2 cAMP-PKA在VIP-AQP3信号通路中的调控作用 | 第48-69页 |
1 实验材料 | 第48-52页 |
1.1 主要试剂 | 第48-50页 |
1.2 溶液配制 | 第50-51页 |
1.3 主要仪器设备 | 第51-52页 |
2 实验方法 | 第52-57页 |
2.1 SD大鼠结肠上皮细胞分离与培养 | 第52页 |
2.2 细胞分组方法 | 第52页 |
2.3 指标检测方法 | 第52-56页 |
2.3.1 Q-PCR检测结肠上皮细胞中AQP3、cAMP、PKA的mRNA水平 | 第53-54页 |
2.3.2 Western-blot检测结肠上皮细胞中AQP3、cAMP、PKA的蛋白水平 | 第54-56页 |
2.3.3 免疫荧光检测结肠上皮细胞中VIP、AQP3的表达 | 第56页 |
2.3.4 ELISA检测结肠上皮细胞培养上清中5-HT、P物质的含量 | 第56页 |
2.4 统计学处理 | 第56-57页 |
3 实验结果 | 第57-68页 |
3.1 激动剂或抑制剂刺激3h、6h、12h后结肠上皮细胞上清中5-HT、SP的变化 | 第57-60页 |
3.2 激动剂或抑制剂刺激3h、6h、12h后结肠上皮细胞中AQP3、cAMP、PKA mRNA的表达水平 | 第60-65页 |
3.3 激动剂或抑制剂刺激3h、6h、12h后结肠上皮细胞AQP3、cAMP、PKA的蛋白表达水平的变化 | 第65-67页 |
3.4 激动剂或抑制剂刺激6h后结肠上皮细胞VIP、AQP3免疫荧光检测结果 | 第67-68页 |
4 分析与小结 | 第68-69页 |
实验3 硝菔通结方对功能性便秘模型大鼠肠动力及VIP-cAMP-PKA-AQP3通路的干预效应 | 第69-97页 |
1 实验材料 | 第69-70页 |
1.1 实验动物 | 第69页 |
1.2 方药组成及药物制备 | 第69-70页 |
1.3 主要试剂和仪器设备 | 第70页 |
2 实验方法 | 第70-72页 |
2.1 动物分组及给药方法 | 第70-71页 |
2.1.1 动物分组方法 | 第70页 |
2.1.2 动物模型建立方法 | 第70-71页 |
2.1.3 给药方法 | 第71页 |
2.2 标本采集方法 | 第71-72页 |
2.3 指标检测方法 | 第72页 |
2.4 统计学处理 | 第72页 |
3 实验结果 | 第72-95页 |
3.1 一般情况 | 第72-73页 |
3.2 硝菔通结方对功能性便秘大鼠首粒黑便排出时间的影响 | 第73-74页 |
3.3 硝菔通结方对功能性便秘大鼠粪便量的影响 | 第74-75页 |
3.4 硝菔通结方对功能性便秘大鼠粪便含水率的影响 | 第75-76页 |
3.5 硝菔通结方对功能性便秘大鼠体结肠肌电的影响 | 第76-78页 |
3.6 硝菔通结方对功能性便秘大鼠血清中胃动素、胃泌素、P物质、5-HT含量的影响 | 第78-83页 |
3.7 硝菔通结方对功能性便秘大鼠结肠组织中VIP、AQP3、cAMP、PKA mRNA表达水平的影响 | 第83-88页 |
3.8 硝菔通结方对功能性便秘大鼠结肠组织中VIP、AQP3、cAMP、PKA蛋白表达水平的影响 | 第88-90页 |
3.9 硝菔通结方对功能性便秘大鼠结肠组织VIP、AQP3、cAMP、PKA免疫组化表达的影响 | 第90-95页 |
4 分析与小结 | 第95-97页 |
第三部分 讨论 | 第97-112页 |
1 关于复功能性便秘肾虚证候动物模型的实验分析 | 第97-98页 |
2 VIP-cAMP-PKA-AQP3信号通路与功能性便秘的发生 | 第98-101页 |
3 硝菔通结方方药分析 | 第101-104页 |
4 关于硝菔通结方治疗功能性便秘的作用机制探讨 | 第104-112页 |
结论 | 第112-114页 |
创新点 | 第114-115页 |
问题与展望 | 第115-117页 |
致谢 | 第117-118页 |
参考文献 | 第118-128页 |
附图 | 第128-132页 |
附件1:在读期间公开发表的论文、论著及科研成果 | 第132-133页 |