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基于VIP-cAMP-PKA-AQP3通路的硝菔通结方治疗功能性便秘的作用机制研究

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
缩略词第7-11页
引言第11-12页
第一部分 文献研究第12-26页
    1 现代医学对功能性便秘的认识第12-17页
        1.1 功能性便秘的流行病学研究第12-13页
        1.2 功能性便秘的发病原因第13页
        1.3 功能性便秘的发病机制第13-16页
            1.3.1 肠神经递质与功能性便秘第14-15页
            1.3.2 水通道蛋白与功能性便秘第15-16页
            1.3.3 Cajal间质细胞与功能性便秘第16页
        1.4 功能性便秘的治疗方法第16-17页
    2 中医学对便秘的认识第17-24页
        2.1 便秘的病名溯源第17-18页
        2.2 便秘的病因病机第18-21页
        2.3 功能性便秘的辨证论治第21-24页
    3 分析与小结第24-26页
第二部分 实验研究第26-97页
    实验1 VIP对功能性便秘大鼠排便及AQP3、cAMP-PKA的影响第26-48页
        1 实验材料第26-29页
            1.1 实验动物第26-27页
            1.2 主要药品及试剂第27-28页
            1.3 主要仪器设备第28-29页
        2 实验方法第29-36页
            2.1 动物分组及给药方法第29-30页
                2.1.1 动物分组方法第29页
                2.1.2 造模及给药方法第29-30页
            2.2 标本采集方法第30页
            2.3 指标检测方法第30-36页
                2.3.1 首粒黑便、粪便含水率观测方法第30页
                2.3.2 结肠肌电检测方法第30-31页
                2.3.3 ELISA检测血清胃动素、胃泌素、P物质第31-32页
                2.3.4 Q-PCR法检测大鼠结肠组织中AQP3、cAMP、PKAmRNA表达第32-34页
                2.3.5 免疫组织化检测结肠组织VIP、AQP3的表达第34-35页
                2.3.6 Western bolt法检测大鼠结肠组织中VIP、AQP3蛋白的表达第35-36页
            2.4 统计学处理第36页
        3 实验结果第36-46页
            3.1 一般情况第36-38页
            3.2 VIP对正常及便秘大鼠首粒黑便排出时间及粪便含水率的影响第38-39页
            3.3 VIP对正常及便秘大鼠在体结肠肌电的影响第39-41页
            3.4 VIP对正常及便秘大鼠血清中胃动素、胃泌素、P物质含量的影响第41-42页
            3.5 VIP对正常及便秘大鼠结肠组织中AQP3、cAMP、PKAmRNA相对表达量的影响第42-43页
            3.6 VIP对正常及便秘大鼠结肠组织中VIP、AQP3蛋白表达水平的影响第43-44页
            3.7 VIP对正常及便秘大鼠结肠组织VIP、AQP3免疫组化结果的影响第44-46页
        4 分析与小结第46-48页
    实验2 cAMP-PKA在VIP-AQP3信号通路中的调控作用第48-69页
        1 实验材料第48-52页
            1.1 主要试剂第48-50页
            1.2 溶液配制第50-51页
            1.3 主要仪器设备第51-52页
        2 实验方法第52-57页
            2.1 SD大鼠结肠上皮细胞分离与培养第52页
            2.2 细胞分组方法第52页
            2.3 指标检测方法第52-56页
                2.3.1 Q-PCR检测结肠上皮细胞中AQP3、cAMP、PKA的mRNA水平第53-54页
                2.3.2 Western-blot检测结肠上皮细胞中AQP3、cAMP、PKA的蛋白水平第54-56页
                2.3.3 免疫荧光检测结肠上皮细胞中VIP、AQP3的表达第56页
                2.3.4 ELISA检测结肠上皮细胞培养上清中5-HT、P物质的含量第56页
            2.4 统计学处理第56-57页
        3 实验结果第57-68页
            3.1 激动剂或抑制剂刺激3h、6h、12h后结肠上皮细胞上清中5-HT、SP的变化第57-60页
            3.2 激动剂或抑制剂刺激3h、6h、12h后结肠上皮细胞中AQP3、cAMP、PKA mRNA的表达水平第60-65页
            3.3 激动剂或抑制剂刺激3h、6h、12h后结肠上皮细胞AQP3、cAMP、PKA的蛋白表达水平的变化第65-67页
            3.4 激动剂或抑制剂刺激6h后结肠上皮细胞VIP、AQP3免疫荧光检测结果第67-68页
        4 分析与小结第68-69页
    实验3 硝菔通结方对功能性便秘模型大鼠肠动力及VIP-cAMP-PKA-AQP3通路的干预效应第69-97页
        1 实验材料第69-70页
            1.1 实验动物第69页
            1.2 方药组成及药物制备第69-70页
            1.3 主要试剂和仪器设备第70页
        2 实验方法第70-72页
            2.1 动物分组及给药方法第70-71页
                2.1.1 动物分组方法第70页
                2.1.2 动物模型建立方法第70-71页
                2.1.3 给药方法第71页
            2.2 标本采集方法第71-72页
            2.3 指标检测方法第72页
            2.4 统计学处理第72页
        3 实验结果第72-95页
            3.1 一般情况第72-73页
            3.2 硝菔通结方对功能性便秘大鼠首粒黑便排出时间的影响第73-74页
            3.3 硝菔通结方对功能性便秘大鼠粪便量的影响第74-75页
            3.4 硝菔通结方对功能性便秘大鼠粪便含水率的影响第75-76页
            3.5 硝菔通结方对功能性便秘大鼠体结肠肌电的影响第76-78页
            3.6 硝菔通结方对功能性便秘大鼠血清中胃动素、胃泌素、P物质、5-HT含量的影响第78-83页
            3.7 硝菔通结方对功能性便秘大鼠结肠组织中VIP、AQP3、cAMP、PKA mRNA表达水平的影响第83-88页
            3.8 硝菔通结方对功能性便秘大鼠结肠组织中VIP、AQP3、cAMP、PKA蛋白表达水平的影响第88-90页
            3.9 硝菔通结方对功能性便秘大鼠结肠组织VIP、AQP3、cAMP、PKA免疫组化表达的影响第90-95页
        4 分析与小结第95-97页
第三部分 讨论第97-112页
    1 关于复功能性便秘肾虚证候动物模型的实验分析第97-98页
    2 VIP-cAMP-PKA-AQP3信号通路与功能性便秘的发生第98-101页
    3 硝菔通结方方药分析第101-104页
    4 关于硝菔通结方治疗功能性便秘的作用机制探讨第104-112页
结论第112-114页
创新点第114-115页
问题与展望第115-117页
致谢第117-118页
参考文献第118-128页
附图第128-132页
附件1:在读期间公开发表的论文、论著及科研成果第132-133页

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