| 致谢 | 第7-11页 |
| 中文摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-34页 |
| 1.1 微孢子虫的研究意义 | 第17-19页 |
| 1.2 微孢子虫的生活史 | 第19-22页 |
| 1.3 微孢子虫的侵染方式研究 | 第22-24页 |
| 1.4 生物信息学方法对微孢子虫研究的帮助 | 第24-26页 |
| 1.5 蓖麻毒素及其B链凝集素生物学特性研究 | 第26-30页 |
| 1.5.1 蓖麻毒素的结构、功能及生物学特点 | 第26-28页 |
| 1.5.2 凝集素及Ricin-B-Lectin蛋白的功能研究 | 第28-30页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第30-32页 |
| 1.7 研究内容和技术路线 | 第32-34页 |
| 1.7.1 研究内容 | 第32页 |
| 1.7.2 技术路线 | 第32-34页 |
| 第2章 家蚕微孢子虫发芽孢子和休眠孢子转录组学差异分析 | 第34-60页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-39页 |
| 2.1.1 生物材料 | 第34页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第34-35页 |
| 2.1.3 主要试剂及配制 | 第35-39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-47页 |
| 2.2.1 家蚕微孢子虫繁殖和纯化 | 第39页 |
| 2.2.2 家蚕微孢子虫人工发芽处理 | 第39页 |
| 2.2.3 家蚕微孢子虫NGS和GS处理组总RNA的提取 | 第39-40页 |
| 2.2.4 家蚕微孢子虫NGS和GS处理组转录组测序及序列拼接 | 第40-41页 |
| 2.2.5 家蚕微孢子虫NGS和GS处理组基因功能注释和转录组分析 | 第41页 |
| 2.2.6 家蚕微孢子虫NGS和GS处理组差异表达基因分析 | 第41页 |
| 2.2.7 实时荧光定量PCR验证 | 第41-45页 |
| 2.2.8 总蛋白的提取及Western Blotting验证 | 第45-47页 |
| 2.3 结果 | 第47-57页 |
| 2.3.1 家蚕微孢子虫休眠孢子和发芽孢子比较观察 | 第47-48页 |
| 2.3.2 家蚕微孢子虫转录组序列拼接和分析 | 第48-49页 |
| 2.3.3 基因注释和差异基因表达分析 | 第49-52页 |
| 2.3.4 差异表达基因聚类分析和功能富集性分析 | 第52-55页 |
| 2.3.5 家蚕微孢子虫发芽相关候选基因的预测 | 第55-57页 |
| 2.4 讨论 | 第57-60页 |
| 第3章 家蚕微孢子虫发芽孢子和休眠孢子蛋白质组学Label-free定量分析 | 第60-87页 |
| 3.1 实验材料 | 第60-65页 |
| 3.1.1 生物材料 | 第60页 |
| 3.1.2 主要仪器与设备 | 第60-61页 |
| 3.1.3 主要试剂及配制 | 第61-65页 |
| 3.2 实验方法 | 第65-72页 |
| 3.2.1 家蚕微孢子虫繁殖和纯化 | 第65页 |
| 3.2.2 家蚕微孢子虫人工发芽处理 | 第65页 |
| 3.2.3 家蚕微孢子虫NGS组和GS组总蛋白提取及FASP法酶解处理 | 第65-67页 |
| 3.2.4 家蚕微孢子虫NGS组和GS组总蛋白液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分析 | 第67-68页 |
| 3.2.5 数据的采集与分析 | 第68页 |
| 3.2.6 实时荧光定量PCR验证 | 第68-71页 |
| 3.2.7 Western Blotting检测 | 第71-72页 |
| 3.3 结果 | 第72-82页 |
| 3.3.1 家蚕微孢子虫NGS和GS处理组的比较观察及总蛋白SDS-PAGE电泳检测 | 第72-74页 |
| 3.3.2 家蚕微孢子虫NGS和GS处理组的蛋白质组学Label-free定量分析 | 第74-77页 |
| 3.3.3 家蚕微孢子虫NGS和GS组鉴定蛋白的GO、KEGG和酶分类分析 | 第77-82页 |
| 3.4 讨论 | 第82-87页 |
| 第4章 NbRBL蛋白的表达、定位及其在家蚕微孢子虫侵染过程中的作用研究 | 第87-112页 |
| 4.1 实验材料 | 第87-92页 |
| 4.1.1 生物材料 | 第87页 |
| 4.1.2 主要仪器与设备 | 第87-88页 |
| 4.1.3 主要试剂及配制 | 第88-92页 |
| 4.2 实验方法 | 第92-101页 |
| 4.2.1 NbRBL蛋白序列分析 | 第92页 |
| 4.2.2 NbRBL基因在不同N.bombycis孢子发育过程的表达差异 | 第92-93页 |
| 4.2.3 表达质粒的构建 | 第93-96页 |
| 4.2.4 重组菌的诱导表达及SDS-PAGE分析 | 第96-98页 |
| 4.2.5 Anti-NbRBL多克隆抗体的制备 | 第98页 |
| 4.2.6 Western blotting验证 | 第98页 |
| 4.2.7 间接免疫荧光试验(IFA) | 第98-99页 |
| 4.2.8 NbRBL蛋白对N.bombycis孢子侵染BmN细胞的作用研究 | 第99-101页 |
| 4.3 结果 | 第101-109页 |
| 4.3.1 NbRBL蛋白序列分析 | 第101-102页 |
| 4.3.2 NbRBL基因在不同Nb孢子发育过程的表达差异 | 第102-103页 |
| 4.3.3 NbRBL基因的克隆、原核表达及抗体验证 | 第103-105页 |
| 4.3.4 激光共聚焦显微镜对NbRBL蛋白在家蚕微孢子虫中的定位 | 第105-106页 |
| 4.3.5 NbRBL蛋白在家蚕微孢子虫侵染过程中的作用 | 第106-109页 |
| 4.4 讨论 | 第109-112页 |
| 第5章 研究创新点与展望 | 第112-113页 |
| 5.1 研究创新点 | 第112页 |
| 5.2 研究展望 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-122页 |
| 博士期间发表论文 | 第122-123页 |
| 附录 | 第123-132页 |
