摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
缩略词表(ABBREVIATION) | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-26页 |
1.1 藻胆体 | 第13-15页 |
1.2 藻胆蛋白 | 第15-16页 |
1.3 藻胆体的终端能量发射器 | 第16-20页 |
1.3.1 别藻蓝蛋白B (AP-B) | 第18页 |
1.3.2 核膜连接蛋白(ApcE) | 第18-20页 |
1.4 光系统和光合作用 | 第20-21页 |
1.5 非光化学淬灭(NPQ) | 第21-23页 |
1.6 状态转换 | 第23-24页 |
1.7 课题的设计及研究意义 | 第24-26页 |
2 AP-B结构与功能的研究 | 第26-71页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 材料和仪器 | 第26-31页 |
2.2.1 主要材料 | 第26-27页 |
2.2.2 主要试剂 | 第27-31页 |
2.2.3 主要仪器 | 第31页 |
2.3 实验方法 | 第31-48页 |
2.3.1 突变藻质粒的构建 | 第31-38页 |
2.3.2 藻种的纯化 | 第38-39页 |
2.3.3 突变体的筛选 | 第39页 |
2.3.4 藻细胞的培养 | 第39-40页 |
2.3.5 目的蛋白的纯化 | 第40-41页 |
2.3.6 目的蛋白质组分鉴定 | 第41-44页 |
2.3.7 目的蛋白光谱分析 | 第44页 |
2.3.8 目的蛋白相关参数的计算 | 第44-45页 |
2.3.9 目的蛋白聚集态分析 | 第45-46页 |
2.3.10 目的蛋白的电镜实验 | 第46页 |
2.3.11 目的蛋白结晶条件的筛选 | 第46页 |
2.3.12 目的蛋白晶体衍射数据的收集与处理 | 第46-47页 |
2.3.13 AP-B在溶剂中聚集条件的筛选 | 第47页 |
2.3.14 AP-B光谱分析 | 第47页 |
2.3.15 AP-B摩尔消光系数及荧光量子产率的计算 | 第47页 |
2.3.16 AP-B聚集态的分析 | 第47-48页 |
2.3.17 AP-B结晶条件的筛选 | 第48页 |
2.4 结果分析与讨论 | 第48-68页 |
2.4.1 目的蛋白的SDS-PAGE分析 | 第48-49页 |
2.4.2 目的蛋白的双向电泳分析 | 第49-50页 |
2.4.3 目的蛋白聚集态分析 | 第50-51页 |
2.4.4 目的蛋白的光谱分析 | 第51-53页 |
2.4.5 目的蛋白相关参数的计算 | 第53-54页 |
2.4.6 目的蛋白的电镜结果 | 第54页 |
2.4.7 目的蛋白的结晶条件的筛选 | 第54-55页 |
2.4.8 AP-B晶体结构分析 | 第55-59页 |
2.4.9 AP-B聚集条件的分析 | 第59-64页 |
2.4.10 AP-B光谱分析 | 第64-65页 |
2.4.11 AP-B聚集态的分析 | 第65-67页 |
2.4.12 AP-B的晶体 | 第67-68页 |
2.5 小结 | 第68-71页 |
3 APCE与非光化学淬灭(NPQ)和状态转换关系的研究 | 第71-118页 |
3.1 引言 | 第71-72页 |
3.2 材料和仪器 | 第72-74页 |
3.2.1 主要材料 | 第72页 |
3.2.2 主要试剂 | 第72-74页 |
3.2.3 主要仪器 | 第74页 |
3.3 实验方法 | 第74-83页 |
3.3.1 质粒的构建 | 第74-77页 |
3.3.2 缺失体的筛选 | 第77页 |
3.3.3 藻的培养条件 | 第77-78页 |
3.3.4 生长曲线的测定 | 第78页 |
3.3.5 叶绿素a含量的测定 | 第78-79页 |
3.3.6 藻蓝蛋白CPC含量的测定 | 第79页 |
3.3.7 藻胆体的制备及分析 | 第79-81页 |
3.3.8 室温叶绿素荧光的测定 | 第81页 |
3.3.9 藻细胞吸收光谱与荧光光谱分析 | 第81-82页 |
3.3.10 藻细胞光合作用活性与呼吸作用活性的测定 | 第82-83页 |
3.4 结果与分析 | 第83-113页 |
3.4.1 缺失体质粒构建与检测 | 第83-85页 |
3.4.2 藻胆体的制备 | 第85-86页 |
3.4.3 目的藻胆体的SDS-PAGE | 第86-87页 |
3.4.4 目的藻胆体的光谱分析 | 第87-89页 |
3.4.5 不同培养条件下缺失藻与WT间生长曲线比较 | 第89-90页 |
3.4.6 不同缺失藻与WT内含物的差异 | 第90-91页 |
3.4.7 不同光照培养条件下藻细胞的吸收光谱和荧光光谱分析 | 第91-97页 |
3.4.8 快速光响应曲线 | 第97-98页 |
3.4.9 蓝光引发的非光化学淬灭(NPQ)和状态转换分析 | 第98-105页 |
3.4.10 白光和蓝光条件下藻细胞叶绿素荧光的改变 | 第105-108页 |
3.4.11 不同光照条件下的 77 K荧光光谱分析 | 第108-110页 |
3.4.12 红光条件下藻细胞叶绿素荧光的改变 | 第110页 |
3.4.13 藻细胞呼吸作用与光合作用活性的测定 | 第110-111页 |
3.4.14 葡萄糖对PAM的影响 | 第111-113页 |
3.5 小结 | 第113-118页 |
3.5.1 生理状态分析 | 第113-114页 |
3.5.2 藻细胞吸收光谱分析 | 第114页 |
3.5.3 藻细胞荧光光谱分析 | 第114-115页 |
3.5.4 藻胆体荧光光谱分析 | 第115页 |
3.5.5 叶绿素荧光恢复分析 | 第115-116页 |
3.5.6 非光化学淬灭(NPQ) | 第116页 |
3.5.7 状态转换分析 | 第116-118页 |
4 本论文总结与讨论 | 第118-119页 |
参考文献 | 第119-132页 |
附录1 攻读学位期间发表的学术论文 | 第132-133页 |
致谢 | 第133-134页 |