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改造狂犬病毒探索小鼠下丘脑摄食相关核团的神经环路

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
缩略语表(Abbreviation)第9-11页
1 文献综述第11-23页
    1.1 探究动物摄食行为的重要性第11页
    1.2 中枢神经系统的结构和功能第11-12页
    1.3 中枢神经系统对动物摄食行为的调控第12-13页
    1.4 下丘脑在参与动物摄食调节中的作用第13-15页
    1.5 神经环路示踪的意义第15-16页
    1.6 神经环路示踪工具的开发与应用第16-21页
        1.6.1 狂犬病毒在神经示踪技术中的应用第17-19页
        1.6.2 腺相关病毒第19页
        1.6.3 EnvA/TVA system第19-21页
        1.6.4 水泡性口炎病毒第21页
    1.7 CRISPR/Cas9技术第21-23页
    1.8 本课题的实验设计思路第23页
2 目的与意义第23-24页
3 材料与方法第24-37页
    3.1 实验材料第24-26页
        3.1.1 质粒、菌株、细胞系和实验动物第24页
        3.1.2 主要的药品、试剂和仪器第24页
        3.1.3 培养基及其配制第24-25页
        3.1.4 缓冲液(溶液)及其配制第25-26页
    3.2 实验方法第26-37页
        3.2.1 PCR扩增方法第26页
        3.2.2 DNA纯化分离的方法第26-28页
            3.2.2.1 DNA直接纯化分离的方法第26-27页
            3.2.2.2 DNA切胶回收的方法第27页
            3.2.2.3 质粒小提的方法第27-28页
        3.2.3 PCR产物或酶切产物的电泳检测第28页
        3.2.4 脂质体转染细胞的方法第28-29页
        3.2.5 潮霉素筛选稳定表达细胞系第29页
        3.2.6 酶切后连接以及同源重组的方法第29-30页
        3.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备 (氯化钙法)第30页
        3.2.8 狂犬病毒的扩增第30-31页
        3.2.9 假狂犬病毒的包装(用EnvA细胞包装SADΔG-YFP病毒)第31-32页
        3.2.10 狂犬病毒的浓缩第32页
        3.2.11 鼠脑的立体定位注射第32-33页
        3.2.12 腺相关病毒的包装第33-34页
        3.2.13 病毒滴度的测定(荧光斑计数法)第34-35页
        3.2.14 间接免疫荧光法测定病毒毒价第35页
        3.2.15 小鼠心脏灌注第35-36页
        3.2.16 鼠脑切片第36-37页
4 结果与分析第37-51页
    4.1. 摄食相关神经环路的示踪第37-45页
        4.1.1 SADΔG-YFP病毒的扩增第37页
        4.1.2 对下丘脑有轴突投射的神经元全脑内的示踪第37-45页
        4.1.3 小结第45页
    4.2 EnvA/TVA系统的应用第45-48页
        4.2.1 EnvA/TVA系统的构建第45-47页
        4.2.2 EnvA/TVA系统在鼠脑中的应用第47-48页
    4.3 B7B-VSV SAD G细胞系的构建第48-50页
    4.4 总结第50-51页
讨论第51-54页
参考文献第54-59页
致谢第59-60页
附录第60页

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