| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第12-18页 |
| 1.1 课题来源、研究的目的和意义 | 第12页 |
| 1.2 国内外研究概况 | 第12-14页 |
| 1.3 论文的主要研究内容 | 第14-15页 |
| 参考文献 | 第15-18页 |
| 第二章 BAG-1在人肝细胞肝癌中的表达及临床意义 | 第18-38页 |
| 第一节 材料与方法 | 第20-27页 |
| 1.1 研究资料及仪器设备 | 第20-24页 |
| 1.1.1 组织标本 | 第20页 |
| 1.1.1.1 标本收集 | 第20页 |
| 1.1.1.2 病例随访 | 第20页 |
| 1.1.2 试剂及配置 | 第20-23页 |
| 1.1.2.1 Westernblot | 第20-22页 |
| 1.1.2.2 石蜡切片免疫组化 | 第22-23页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第23-24页 |
| 1.2 实验流程与方法 | 第24-27页 |
| 1.2.1 Westernblot | 第24-25页 |
| 1.2.1.1 组织蛋白提取 | 第24页 |
| 1.2.1.2 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第24-25页 |
| 1.2.1.3 免疫印迹法检测蛋白质 | 第25页 |
| 1.2.2 石蜡切片的免疫组化 | 第25-27页 |
| 1.2.2.1 两步法免疫组化 | 第25-27页 |
| 1.2.2.2 免疫组化结果判断 | 第27页 |
| 1.2.2.3 统计学处理 | 第27页 |
| 第二节 结果 | 第27-34页 |
| 2.1 BAG-1在肝细胞肝癌组织中的表达 | 第27-30页 |
| 2.2 核表达BAG-1与临床病理学参数的关系 | 第30-31页 |
| 2.3 预后分析 | 第31-34页 |
| 2.3.1 核表达BAG-1在肝细胞肝癌中生存率的评价 | 第31页 |
| 2.3.2 log-rank单因素生存分析以及Cox比例风险模型多因素生存分析 | 第31-34页 |
| 第三节 讨论 | 第34-35页 |
| 第四节 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-38页 |
| 第三章 BAG-1介导肝癌细胞多柔比星耐药性的机制及对肝癌细胞增值调节的作用 | 第38-61页 |
| 第一节 材料与方法 | 第40-48页 |
| 1.1 研究资料及仪器设备 | 第40-43页 |
| 1.1.1 细胞株 | 第40页 |
| 1.1.2 试剂配置 | 第40-43页 |
| 1.1.2.1 细胞培养 | 第40页 |
| 1.1.2.2 CCK-8细胞活力测定 | 第40-41页 |
| 1.1.2.3 免疫荧光化学 | 第41页 |
| 1.1.2.4 报告基因活性测定 | 第41-42页 |
| 1.1.2.5 原位末端转移酶标记技术(Tunel) | 第42页 |
| 1.1.2.6 流式细胞术 | 第42-43页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第43页 |
| 1.2 方法 | 第43-48页 |
| 1.2.1 Westernblot | 第43页 |
| 1.2.1.1 细胞蛋白质的提取及含量测定 | 第43页 |
| 1.2.1.2 SDS-PAGE凝胶电泳及Western印迹法检测(同第二章) | 第43页 |
| 1.2.2 CCK-8测定细胞增殖活力 | 第43-44页 |
| 1.2.3 泛素依赖的蛋白酶体降解实验 | 第44页 |
| 1.2.4 BAG-1小干扰片段的设计合成以及转染 | 第44-45页 |
| 1.2.5 NF-κB报告基因活性测定 | 第45-46页 |
| 1.2.5.1 细胞培养、刺激以及转染 | 第45页 |
| 1.2.5.2 细胞裂解物的制备 | 第45页 |
| 1.2.5.3 数据测量 | 第45-46页 |
| 1.2.6 细胞免疫荧光 | 第46页 |
| 1.2.7 原位末端转移酶标记技术(Tunel) | 第46-47页 |
| 1.2.8 流式细胞分析 | 第47页 |
| 1.2.9 统计学分析 | 第47-48页 |
| 第二节 结果 | 第48-56页 |
| 2.1 不同肝癌细胞的BAG-1表达以及对多柔比星的敏感性差异 | 第48-49页 |
| 2.2 多柔比星刺激下BAG-1、相关凋亡蛋白检测及机制探讨 | 第49-50页 |
| 2.3 BAG-1介导多柔比星引起的NF-κB活化 | 第50-52页 |
| 2.3.1 BAG-1SiRNA干扰效率以及BCL-2的检测 | 第50页 |
| 2.3.2 BAG-1潜在激活NF-κB并导致多柔比星介导的NF-κB活化 | 第50-52页 |
| 2.4 BAG-1介导肝癌细胞HepG2耐药性及其机制探讨 | 第52-54页 |
| 2.5 BAG-1对肝癌细胞增殖能力的影响 | 第54-56页 |
| 第三节 讨论 | 第56-58页 |
| 第四节 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 英文縮写词表 | 第61-62页 |
| 综述 | 第62-70页 |
| 综述参考文献 | 第67-70页 |
| 在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第70-71页 |
| 在国内外刊物上发表的论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
