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miR-30b调节自噬在肝缺血再灌注损伤中的作用

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略语/符号说明第11-12页
前言第12-15页
    研究现状、成果第12-14页
    研究目的、方法第14-15页
一、缺血再灌注对小鼠肝脏miR-30b表达及自噬水平的影响第15-35页
    1.1 对象和方法第15-27页
        1.1.1 实验动物第15页
        1.1.2 主要实验试剂第15-16页
        1.1.3 主要仪器设备第16页
        1.1.4 试剂配制第16-18页
        1.1.5 小鼠肝脏缺血再灌注模型建立第18-19页
        1.1.6 血生化指标检测第19页
        1.1.7 肝组织病理学检测第19-20页
        1.1.8 透射电镜检测第20页
        1.1.9 TUNEL检测凋亡第20-21页
        1.1.10 qRT-PCR检测第21-24页
        1.1.11 蛋白印迹技术检测(Western blot)第24-27页
        1.1.12 统计学处理第27页
    1.2 结果第27-32页
        1.2.1 各组小鼠血清转氨酶的变化第27-28页
        1.2.2 小鼠肝脏病理学表现第28页
        1.2.3 各组小鼠肝组织miR-30b-5p、Atg12 mRNA、Atg5 mRNA的表达变化第28-29页
        1.2.4 TUNEL检测肝细胞凋亡结果第29-30页
        1.2.5 透射电镜观察各组肝组织内自噬体的变化第30-31页
        1.2.6 Western blot结果第31-32页
    1.3 讨论第32-34页
    1.4 小结第34-35页
二、miR-30b对小鼠肝缺血再灌注损伤的影响第35-45页
    2.1 对象和方法第35-39页
        2.1.1 实验动物第35页
        2.1.2 主要实验试剂第35页
        2.1.3 主要仪器设备第35-36页
        2.1.4 试剂配制第36-38页
        2.1.5 小鼠肝脏缺血再灌注模型建立第38页
        2.1.6 血生化指标检测第38页
        2.1.7 肝组织病理学检测第38页
        2.1.8 免疫组织化学技术检测第38页
        2.1.9 TUNEL检测凋亡第38-39页
        2.1.10 蛋白印迹技术检测(Western blot)第39页
        2.1.11 统计学处理第39页
    2.2 结果第39-43页
        2.2.1 各组小鼠血清转氨酶的变化第39-40页
        2.2.2 小鼠肝脏病理学表现第40页
        2.2.3 TUNEL检测肝细胞凋亡结果第40-41页
        2.2.4 免疫组化检测各组肝脏PCNA、Caspase-3 表达与分布第41-42页
        2.2.5 Western blot检测各组肝组织相关凋亡蛋白的表达第42-43页
    2.3 讨论第43-44页
    2.4 小结第44-45页
三、miR-30b调控Atg12对小鼠肝细胞缺氧/复氧诱导自噬的作用第45-66页
    3.1 对象和方法第45-56页
        3.1.1 细胞系第45页
        3.1.2 主要实验试剂第45-46页
        3.1.3 主要仪器设备第46页
        3.1.4 试剂配制第46-48页
        3.1.5 AML12细胞复苏、传代、培养与冻存第48-49页
        3.1.6 双荧光素酶载体构建第49-52页
        3.1.7 miRNA靶基因荧光酶素报告验证第52-53页
        3.1.8 肝细胞系分组及处理第53-54页
        3.1.9 MTT检测细胞存活率第54页
        3.1.10 激光扫描共聚焦显微镜检测第54-55页
        3.1.11 透射电镜检测肝细胞内自噬体第55页
        3.1.12 qRT-PCR检测第55页
        3.1.13 蛋白印迹技术检测(Western blot)第55-56页
        3.1.14 统计学处理第56页
    3.2 结果第56-62页
        3.2.1 miR-30b靶基因的预测及双荧光素酶报告基因检测、分析第56页
        3.2.2 共聚焦显微镜观察各组肝细胞内LC3荧光斑点的数量与分布第56-57页
        3.2.3 透射电镜观察各组肝细胞内自噬体的数量与分布第57-58页
        3.2.4 自噬对缺氧/复氧诱导AML12细胞存活率的影响第58-59页
        3.2.5 miR-30b对缺氧/复氧诱导AML12细胞存活率的影响第59页
        3.2.6 验证Atg12 siRNA的干扰效果第59-60页
        3.2.7 敲低Atg12对缺氧/复氧诱导AML12细胞存活率的影响第60-61页
        3.2.8 miR-30b调节Atg12对缺氧/复氧诱导AML12细胞自噬的影响第61-62页
    3.3 讨论第62-64页
    3.4 小结第64-66页
结论第66-67页
参考文献第67-73页
发表论文和参加科研情况说明第73-76页
附录第76-77页
综述 miRNA与自噬研究进展第77-95页
    综述参考文献第86-95页
致谢第95-96页
个人简历第96页

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