| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第16-23页 |
| 1.1 引言 | 第16-17页 |
| 1.2 肝纤维化概述 | 第17页 |
| 1.3 活化态肝星状细胞 | 第17-18页 |
| 1.4 喜树碱药物概述 | 第18-19页 |
| 1.5 药物传递纳米载体 | 第19-20页 |
| 1.6 靶向肝星状细胞常见配体 | 第20-21页 |
| 1.7 课题的提出和研究方案确定 | 第21-23页 |
| 第2章 聚合物材料的合成及表征 | 第23-33页 |
| 2.1 实验试剂与仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第24页 |
| 2.2 两亲性聚合物的合成 | 第24-26页 |
| 2.2.1 VA-PEG-COOH的合成 | 第24-25页 |
| 2.2.2 NH_2-PCL的合成 | 第25页 |
| 2.2.3 PEG-PCL的合成 | 第25-26页 |
| 2.2.4 VA-PEG-PCL的合成 | 第26页 |
| 2.3 聚合物材料的表征 | 第26页 |
| 2.3.1 核磁共振氢谱(~1H-NMR) | 第26页 |
| 2.3.2 傅里叶变换红外光谱(FT-IR) | 第26页 |
| 2.4 胶束的制备及表征 | 第26-27页 |
| 2.4.1 聚合物胶束的制备 | 第26页 |
| 2.4.2 胶束的粒径和形貌表征 | 第26-27页 |
| 2.4.3 临界胶束浓度(CMC)测定 | 第27页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第27-32页 |
| 2.5.1 聚合物材料的表征 | 第27-31页 |
| 2.5.2 胶束的粒径和形貌表征 | 第31页 |
| 2.5.3 聚合物胶束的CMC测定 | 第31-32页 |
| 2.6 本章小结 | 第32-33页 |
| 第3章 两亲性聚合物胶束生物学表征 | 第33-46页 |
| 3.1 实验试剂与仪器 | 第33-35页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第33-34页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第34页 |
| 3.1.3 细胞模型及实验动物 | 第34-35页 |
| 3.2 空白胶束生物相容性评价 | 第35-36页 |
| 3.2.1 空白胶束细胞毒性实验 | 第35页 |
| 3.2.2 空白胶束溶血率实验 | 第35-36页 |
| 3.3 载尼罗红胶束制备及表征 | 第36页 |
| 3.3.1 载尼罗红胶束制备 | 第36页 |
| 3.3.2 载尼罗红胶束的细胞毒性实验 | 第36页 |
| 3.4 HSC-T6、原代HSCs及HCs细胞对载尼罗红胶束的吞噬研究 | 第36-37页 |
| 3.4.1 原代HSCs和原代HCs细胞分离和培养 | 第36-37页 |
| 3.4.2 HSC-T6细胞吞噬载尼罗红胶束的荧光观察及流式细胞仪分析 | 第37页 |
| 3.4.3 大鼠原代HSCs和HCs细胞吞噬载尼罗红胶束的荧光观察及流式分析 | 第37页 |
| 3.5 载尼罗红胶束体内靶向性研究 | 第37-39页 |
| 3.5.1 小鼠急性肝损伤模型造模及给药 | 第37-38页 |
| 3.5.2 QRT-PCR基因水平分析 | 第38页 |
| 3.5.3 Western Blotting蛋白表达分析 | 第38-39页 |
| 3.5.4 组织学染色分析 | 第39页 |
| 3.5.5 尼罗红体内组织分布 | 第39页 |
| 3.5.6 统计学分析 | 第39页 |
| 3.6 结果与讨论 | 第39-45页 |
| 3.6.1 空白胶束生物相容性考察 | 第39-40页 |
| 3.6.2 载尼罗红胶束的表征 | 第40-41页 |
| 3.6.3 载尼罗红胶束体外靶向性研究 | 第41-43页 |
| 3.6.4 小鼠急性肝损伤模型评价 | 第43-44页 |
| 3.6.5 载尼罗红胶束体内主要器官生物分布研究 | 第44-45页 |
| 3.7 本章小结 | 第45-46页 |
| 第4章 载喜树碱胶束对活化态肝星状细胞的生物学评价 | 第46-53页 |
| 4.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第46页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第46-47页 |
| 4.1.3 细胞模型 | 第47页 |
| 4.2 载喜树碱的两亲性聚合物胶束的制备及表征 | 第47-48页 |
| 4.2.1 载喜树碱胶束的制备 | 第47页 |
| 4.2.2 载喜树碱胶束的粒径及形貌考察 | 第47页 |
| 4.2.3 载喜树碱胶束的载药量及包封率 | 第47页 |
| 4.2.4 载喜树碱胶束体外药物释放行为 | 第47-48页 |
| 4.3 喜树碱及载药胶束对HSC-T6细胞细胞毒性、基因水平和蛋白水平影响 | 第48-49页 |
| 4.3.1 喜树碱及载喜树碱胶束对HSC-T6细胞毒性 | 第48页 |
| 4.3.2 喜树碱对HSC-T6细胞基因水平影响 | 第48-49页 |
| 4.3.3 喜树碱对HSC-T6细胞蛋白表达影响 | 第49页 |
| 4.4 喜树碱及载药胶束对原代HSCs细胞的基因水平影响 | 第49页 |
| 4.5 结果与讨论 | 第49-52页 |
| 4.5.1 载喜树碱胶束的表征 | 第49-50页 |
| 4.5.2 喜树碱对HSC-T6细胞作用 | 第50-52页 |
| 4.5.3 喜树碱及载药胶束对原代HSCs细胞的基因水平影响 | 第52页 |
| 4.6 本章小结 | 第52-53页 |
| 第5章 喜树碱及载药胶束对CCL_4诱导慢性肝纤维化小鼠治疗效果研究 | 第53-64页 |
| 5.1 实验材料 | 第53-55页 |
| 5.1.1 实验试剂 | 第53-54页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第54页 |
| 5.1.3 实验动物 | 第54-55页 |
| 5.2 CCL_4诱导慢性肝纤维化小鼠模型建立及实验安排 | 第55页 |
| 5.2.1 肝纤维化模型建立 | 第55页 |
| 5.2.2 动物分组及给药 | 第55页 |
| 5.2.3 解剖实验及样品收集 | 第55页 |
| 5.3 实验方法 | 第55-57页 |
| 5.3.1 基因水平分析 | 第55-56页 |
| 5.3.2 蛋白表达检测 | 第56页 |
| 5.3.3 免疫组化(IHC)分析 | 第56-57页 |
| 5.3.4 病理组织学分析 | 第57页 |
| 5.3.5 生化水平分析 | 第57页 |
| 5.3.6 统计学分析 | 第57页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第57-63页 |
| 5.4.1 各药物处理组抑制MF表型HSCs糖酵解行为 | 第57-59页 |
| 5.4.2 各药物处理组抑制MF表型HSCs增殖 | 第59-61页 |
| 5.4.3 各药物处理组抑制肝纤维化同时修复肝脏功能 | 第61-63页 |
| 5.5 本章小结 | 第63-64页 |
| 第6章 喜树碱及载喜树碱胶束(叶酸配体)对CCL_4诱导慢性肝纤维化小鼠治疗效果研究 | 第64-69页 |
| 6.1 实验材料 | 第64页 |
| 6.1.1 实验试剂 | 第64页 |
| 6.1.2 实验仪器 | 第64页 |
| 6.1.3 实验动物 | 第64页 |
| 6.2 CCL_4诱导慢性肝纤维化小鼠模型建立及实验安排 | 第64-65页 |
| 6.2.1 肝纤维化模型建立 | 第64-65页 |
| 6.2.2 动物分组及给药 | 第65页 |
| 6.2.3 解剖实验及样品收集 | 第65页 |
| 6.3 实验方法 | 第65页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第65-68页 |
| 6.4.1 各药物处理组抑制MF-HSCs糖酵解行为及异常扩增 | 第65-67页 |
| 6.4.2 各药物处理组抑制肝纤维化及修复肝脏功能 | 第67-68页 |
| 6.5 本章小结 | 第68-69页 |
| 全文结论 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第77-78页 |
| 常用缩略词一览表 | 第78-80页 |
