| 中文摘要 | 第12-20页 |
| 英文摘要 | 第20-27页 |
| 符号说明 | 第28-31页 |
| 第一部分 靶向TLR5的放射性核素标记抗体对雷帕霉素治疗的同种移植物动态监测 | 第31-47页 |
| 序言 | 第31-33页 |
| 材料和方法 | 第33-41页 |
| 一、实验材料 | 第33-35页 |
| 二、实验仪器 | 第35-36页 |
| 三、实验方法 | 第36-41页 |
| 1. 建立小鼠同种异体皮肤移植模型 | 第36页 |
| 2. 同种移植模型分组 | 第36页 |
| 3. Iodogen法制备~(131)I碘化标记TLR5单抗及放射化学纯度分析 | 第36-37页 |
| 4. 脾单个核细胞悬液制备 | 第37页 |
| 5. 放射性配体与受体结合分析实验(RBA)鉴定标记化合物生物学活性 | 第37-38页 |
| 6. ~(131)I-anti-TLR5 mAb在同种移植模型中的体内生物学分布 | 第38-39页 |
| 7. ~(131)Ianti-TLR5 mAb同种移植模型动态全身磷屏自显影显像 | 第39页 |
| 8. TLR5在移植皮肤部位免疫组织化学染色 | 第39-40页 |
| 9. TLR5表达与~(131)I-anti-TLR5 mAb的放射性活度相关性分析 | 第40页 |
| 10. 统计学分析 | 第40-41页 |
| 实验结果 | 第41-44页 |
| 一、~(131)I-anti-TLR5 mAb制备和生物学活性鉴定 | 第41页 |
| 1. 放射性碘化标记anti-TLR5 mAb | 第41页 |
| 2. ~(131)I-anti-TLR5 mAb的生物学活性检测 | 第41页 |
| 3. ~(131)I-anti-TLR5 mAb体外稳定性 | 第41页 |
| 二、~(131)I-anti-TLR5 mAb在同种异体移植模型中生物学分布 | 第41-42页 |
| 1. 雷帕霉素治疗组 | 第41-42页 |
| 2. 同种排斥对照组 | 第42页 |
| 3. Anti-TLR5 mAb阻断组 | 第42页 |
| 三 ~(131)I-anti-TLR5 mAb在同种异体移植模型中的动态磷屏自显影显像 | 第42-43页 |
| 1. 雷帕霉素治疗组 | 第42页 |
| 2. 同种排斥对照组 | 第42页 |
| 3. Anti-TLR5 mAb阻断组 | 第42-43页 |
| 4. 图像半定量分析 | 第43页 |
| 四、TLR5在移植皮肤部位免疫组织化学染色 | 第43页 |
| 五、TLR5表达与~(131)I-anti-TLR5 mAb放射性活度值的相关性分析 | 第43-44页 |
| 讨论 | 第44-47页 |
| 第二部分 ~(131)I-anti TLR5 mAb/~(131)I-IgG/~(18)F-FDG在雷帕霉素处理的同种移植模型中显像价值的评价 | 第47-59页 |
| 前言 | 第47-49页 |
| 材料和方法 | 第49-54页 |
| 一、实验材料 | 第49-50页 |
| 二、实验仪器 | 第50-51页 |
| 三、实验方法 | 第51-54页 |
| 1. 建立小鼠同种异体皮肤移植模型 | 第51页 |
| 2. 同种移植模型分组 | 第51页 |
| 3. Iodogen法制备~(131)I碘化标记TLR5及对照同种型IgG | 第51-52页 |
| 4. ~(131)I-IgG在同种移植模型中的体内生物学分布 | 第52页 |
| 5. ~(131)I-anti-TLR5 mAb在同种移植模型中动态全身磷屏自显影显像分析 | 第52页 |
| 6. ~(131)I-IgG在同种移植模型中的动态全身磷屏自显影显像分析 | 第52-53页 |
| 7. ~(18)F-FDG在同种移植模型中的动态全身磷屏自显影显像分析 | 第53页 |
| 8. 统计学分析 | 第53-54页 |
| 实验结果 | 第54-56页 |
| 一、~(131)I-anti-TLR5 mAb制备 | 第54页 |
| 二、~(131)I-IgG制备和体外稳定性 | 第54页 |
| 1. ~(131)I-IgG的放射性碘化标记结果 | 第54页 |
| 2. 体外稳定性 | 第54页 |
| 三、~(131)I-IgG在雷帕霉素治疗的同种移植模型中的体内生物学分布 | 第54页 |
| 四、~(131)I-IgG在同种移植模型中的动态全身磷屏自显影显像分析 | 第54-55页 |
| 1. 雷帕霉素治疗组 | 第54页 |
| 2. 排斥对照组 | 第54-55页 |
| 五、~(18)F-FDG在同种移植模型中的动态全身磷屏自显影显像分析 | 第55页 |
| 1. 雷帕霉素治疗组 | 第55页 |
| 2. 排斥对照组 | 第55页 |
| 六、动态全身磷屏自显影显像半定量分析 | 第55-56页 |
| 讨论 | 第56-59页 |
| 第三部分 同种移植排斥过程中自噬分子的表达及意义 | 第59-77页 |
| 前言 | 第59-62页 |
| 材料与方法 | 第62-71页 |
| 一、实验材料 | 第62-66页 |
| 二、实验仪器 | 第66-67页 |
| 三、实验方法 | 第67-71页 |
| 1. 小鼠同种皮肤移植模型的建立 | 第67页 |
| 2. 受体小鼠脾细胞提取 | 第67页 |
| 3. 移植皮肤和受体脾细胞RNA的提取 | 第67-68页 |
| 4. cDNA的合成 | 第68-69页 |
| 5. 荧光实时定量PCR | 第69页 |
| 6. 移植皮肤和受体脾细胞总蛋白的提取 | 第69-70页 |
| 7. SDS-PAGE电泳 | 第70-71页 |
| 8. 同种移植排斥过程中移植皮肤部位TLR5的表达与自噬发生水平的相关性分析 | 第71页 |
| 9. 统计学分析 | 第71页 |
| 实验结果 | 第71-74页 |
| 一、荧光实时定量PCR测定自噬相关基因Beclin1和Atg5的表达 | 第71-72页 |
| 1. Beclin1在同种移植和雷帕霉素治疗组模型脾细胞的表达 | 第71-72页 |
| 2. Atg5在同种移植和雷帕霉素治疗组模型脾细胞的表达 | 第72页 |
| 3. Beclin1在同种移植和雷帕霉素治疗组模型皮肤的表达 | 第72页 |
| 4. Atg5在同种移植和雷帕霉素治疗组模型皮肤的表达 | 第72页 |
| 二、荧光实时定量PCR测定自噬相关蛋白Beclin1、Atg5、LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的表达 | 第72-73页 |
| 1. 在同种移植模型和雷帕霉素治疗组模型脾细胞的表达 | 第72-73页 |
| 2. 在同种移植模型和雷帕霉素治疗组模型移植皮肤部位的表达 | 第73页 |
| 三.同种移植排斥过程中移植皮肤部位TLR5的表达与自噬发生水平的相关性分析 | 第73-74页 |
| 讨论 | 第74-77页 |
| 全文小结 | 第77-78页 |
| 论文创新点 | 第78-79页 |
| 附图表 | 第79-98页 |
| 参考文献 | 第98-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 攻读硕博研究生期间发表的学术论文目录 | 第108-109页 |
| 攻读硕博研究生期间参与科研项目情况 | 第109-110页 |
| 攻读硕博研究生期间获得奖励情况 | 第110-111页 |
| 已发表SCI论文 | 第111-150页 |
| Paper One | 第111-132页 |
| Paper Two | 第132-150页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第150页 |