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TLR5靶向同种移植物放射性实时监测及自噬在同种排斥中的调节机制

中文摘要第12-20页
英文摘要第20-27页
符号说明第28-31页
第一部分 靶向TLR5的放射性核素标记抗体对雷帕霉素治疗的同种移植物动态监测第31-47页
    序言第31-33页
    材料和方法第33-41页
        一、实验材料第33-35页
        二、实验仪器第35-36页
        三、实验方法第36-41页
            1. 建立小鼠同种异体皮肤移植模型第36页
            2. 同种移植模型分组第36页
            3. Iodogen法制备~(131)I碘化标记TLR5单抗及放射化学纯度分析第36-37页
            4. 脾单个核细胞悬液制备第37页
            5. 放射性配体与受体结合分析实验(RBA)鉴定标记化合物生物学活性第37-38页
            6. ~(131)I-anti-TLR5 mAb在同种移植模型中的体内生物学分布第38-39页
            7. ~(131)Ianti-TLR5 mAb同种移植模型动态全身磷屏自显影显像第39页
            8. TLR5在移植皮肤部位免疫组织化学染色第39-40页
            9. TLR5表达与~(131)I-anti-TLR5 mAb的放射性活度相关性分析第40页
            10. 统计学分析第40-41页
    实验结果第41-44页
        一、~(131)I-anti-TLR5 mAb制备和生物学活性鉴定第41页
            1. 放射性碘化标记anti-TLR5 mAb第41页
            2. ~(131)I-anti-TLR5 mAb的生物学活性检测第41页
            3. ~(131)I-anti-TLR5 mAb体外稳定性第41页
        二、~(131)I-anti-TLR5 mAb在同种异体移植模型中生物学分布第41-42页
            1. 雷帕霉素治疗组第41-42页
            2. 同种排斥对照组第42页
            3. Anti-TLR5 mAb阻断组第42页
        三 ~(131)I-anti-TLR5 mAb在同种异体移植模型中的动态磷屏自显影显像第42-43页
            1. 雷帕霉素治疗组第42页
            2. 同种排斥对照组第42页
            3. Anti-TLR5 mAb阻断组第42-43页
            4. 图像半定量分析第43页
        四、TLR5在移植皮肤部位免疫组织化学染色第43页
        五、TLR5表达与~(131)I-anti-TLR5 mAb放射性活度值的相关性分析第43-44页
    讨论第44-47页
第二部分 ~(131)I-anti TLR5 mAb/~(131)I-IgG/~(18)F-FDG在雷帕霉素处理的同种移植模型中显像价值的评价第47-59页
    前言第47-49页
    材料和方法第49-54页
        一、实验材料第49-50页
        二、实验仪器第50-51页
        三、实验方法第51-54页
            1. 建立小鼠同种异体皮肤移植模型第51页
            2. 同种移植模型分组第51页
            3. Iodogen法制备~(131)I碘化标记TLR5及对照同种型IgG第51-52页
            4. ~(131)I-IgG在同种移植模型中的体内生物学分布第52页
            5. ~(131)I-anti-TLR5 mAb在同种移植模型中动态全身磷屏自显影显像分析第52页
            6. ~(131)I-IgG在同种移植模型中的动态全身磷屏自显影显像分析第52-53页
            7. ~(18)F-FDG在同种移植模型中的动态全身磷屏自显影显像分析第53页
            8. 统计学分析第53-54页
    实验结果第54-56页
        一、~(131)I-anti-TLR5 mAb制备第54页
        二、~(131)I-IgG制备和体外稳定性第54页
            1. ~(131)I-IgG的放射性碘化标记结果第54页
            2. 体外稳定性第54页
        三、~(131)I-IgG在雷帕霉素治疗的同种移植模型中的体内生物学分布第54页
        四、~(131)I-IgG在同种移植模型中的动态全身磷屏自显影显像分析第54-55页
            1. 雷帕霉素治疗组第54页
            2. 排斥对照组第54-55页
        五、~(18)F-FDG在同种移植模型中的动态全身磷屏自显影显像分析第55页
            1. 雷帕霉素治疗组第55页
            2. 排斥对照组第55页
        六、动态全身磷屏自显影显像半定量分析第55-56页
    讨论第56-59页
第三部分 同种移植排斥过程中自噬分子的表达及意义第59-77页
    前言第59-62页
    材料与方法第62-71页
        一、实验材料第62-66页
        二、实验仪器第66-67页
        三、实验方法第67-71页
            1. 小鼠同种皮肤移植模型的建立第67页
            2. 受体小鼠脾细胞提取第67页
            3. 移植皮肤和受体脾细胞RNA的提取第67-68页
            4. cDNA的合成第68-69页
            5. 荧光实时定量PCR第69页
            6. 移植皮肤和受体脾细胞总蛋白的提取第69-70页
            7. SDS-PAGE电泳第70-71页
            8. 同种移植排斥过程中移植皮肤部位TLR5的表达与自噬发生水平的相关性分析第71页
            9. 统计学分析第71页
    实验结果第71-74页
        一、荧光实时定量PCR测定自噬相关基因Beclin1和Atg5的表达第71-72页
            1. Beclin1在同种移植和雷帕霉素治疗组模型脾细胞的表达第71-72页
            2. Atg5在同种移植和雷帕霉素治疗组模型脾细胞的表达第72页
            3. Beclin1在同种移植和雷帕霉素治疗组模型皮肤的表达第72页
            4. Atg5在同种移植和雷帕霉素治疗组模型皮肤的表达第72页
        二、荧光实时定量PCR测定自噬相关蛋白Beclin1、Atg5、LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的表达第72-73页
            1. 在同种移植模型和雷帕霉素治疗组模型脾细胞的表达第72-73页
            2. 在同种移植模型和雷帕霉素治疗组模型移植皮肤部位的表达第73页
        三.同种移植排斥过程中移植皮肤部位TLR5的表达与自噬发生水平的相关性分析第73-74页
    讨论第74-77页
全文小结第77-78页
论文创新点第78-79页
附图表第79-98页
参考文献第98-107页
致谢第107-108页
攻读硕博研究生期间发表的学术论文目录第108-109页
攻读硕博研究生期间参与科研项目情况第109-110页
攻读硕博研究生期间获得奖励情况第110-111页
已发表SCI论文第111-150页
    Paper One第111-132页
    Paper Two第132-150页
学位论文评阅及答辩情况表第150页

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