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结核分枝杆菌PPE家族基因Rv3136影响胞壁重塑及其分子机理

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第1章 文献综述第10-19页
    1.1 结核分枝杆菌细胞壁的组成和特征第11-12页
    1.2 合成结核菌细胞壁的基因及途径第12-16页
        1.2.1 分枝杆菌枝菌酸的合成第12-13页
        1.2.2 分枝杆菌肽聚糖的合成第13-14页
        1.2.3 分枝杆菌阿拉伯半乳聚糖的合成第14页
        1.2.4 分枝杆菌磷脂酰甘露糖苷,脂甘露聚糖和脂阿拉伯甘露聚糖的生物合成第14-16页
        1.2.5 细胞分裂过程中细胞壁的合成第16页
    1.3 细胞壁合成的调控第16-17页
    1.4 展望第17-19页
第2章 前言第19-21页
第3章 实验材料和方法第21-36页
    3.1 实验材料第21-24页
        3.1.1 实验菌株、载体和细胞第21页
        3.1.2 实验用主要试剂第21-22页
        3.1.3 培养基及实验试剂的配制第22-23页
        3.1.4 实验仪器设备第23-24页
    3.2 实验方法第24-36页
        3.2.1 设计与合成引物第24页
        3.2.2 目的基因的获得第24-25页
        3.2.3 目的基因Rv3136的TA克隆第25页
        3.2.4 大肠杆菌DH5a、BL21和JM109感受态制备及转化第25-26页
        3.2.5 Rv3136重组蛋白的表达第26-27页
        3.2.6 耻垢分枝杆菌感受态制备及转化第27-28页
        3.2.7 Western blot检测重组蛋白在耻垢分枝杆菌中的表达第28-29页
        3.2.8 Rv3136(PPE51)重组蛋白在耻垢分枝杆菌中的亚细胞定位分析第29-30页
        3.2.9 重组耻垢分枝杆菌菌落形态观察第30页
        3.2.10 耻垢分枝杆菌生物膜培养第30页
        3.2.11 滑动实验第30页
        3.2.12 扫描电镜观察重组耻垢分枝杆菌菌体形态第30-31页
        3.2.13 重组耻垢分枝杆菌在酸性条件下的存活影响第31页
        3.2.14 重组耻垢分枝杆菌对SDS耐受性检测第31-32页
        3.2.15 重组耻垢分枝杆菌对氧化压力的影响第32页
        3.2.16 溴化已锭(EB)摄入实验第32-33页
        3.2.17 重组耻垢分枝杆菌侵染巨噬细胞后胞内存活率及细胞因子检测第33-34页
        3.2.18 Rv3136对胞壁相关基因转录水平的影响第34-36页
第4章 结果与分析第36-50页
    4.1 RV3136在致病分枝杆菌中是保守蛋白第36页
    4.2 RV3136目的基因扩增和鉴定第36-37页
    4.3 构建大肠杆菌BL21-PET28-RV3136表达菌株第37-38页
    4.4 RV3136重组蛋白在大肠杆菌BL21中表达成功第38页
    4.5 成功构建重组耻垢分枝杆菌MS_RV3136第38-39页
    4.6 RV3136定位在耻垢分枝杆菌细胞壁上第39-40页
    4.7 MS_RV3136菌落形态观察和生物膜形成第40-41页
    4.8 过表达RV3136基因对耻垢分枝杆菌滑动能力的影响第41页
    4.9 过表达RV3136基因对耻垢分枝杆菌菌体形态的影响第41-42页
    4.10 过表达RV3136基因对耻垢分枝杆菌生长速率无显著影响第42页
    4.11 过表达RV3136基因增强耻垢分枝杆菌在低PH环境下的存活能力第42-43页
    4.12 过表达RV3136基因增强了耻垢分枝杆菌对表面压力(SDS)的耐受第43-44页
    4.13 过表达RV3136基因增强耻垢分枝杆菌对H2O2的耐受第44页
    4.14 过表达RV3136基因增强耻垢分枝杆菌对联胺的耐受第44-45页
    4.15 过表达RV3136基因增强耻垢分枝杆菌对异烟肼和万古霉素的耐受第45-46页
    4.16 过表达RV3136基因降低了耻垢分枝杆菌细胞壁的渗透性第46-47页
    4.17 过表达RV3136基因利于耻垢分枝杆菌在THP-1 中存活第47页
    4.18 过表达RV3136基因对巨噬细胞内细胞因子没有明显改变第47-48页
    4.19 RV3136基因可能通过影响胞壁相关基因的转录而改变细胞壁重塑第48-50页
第5章 结论与展望第50-53页
    5.1 结论与分析第50-51页
    5.2 展望第51-53页
参考文献第53-59页
致谢第59-61页
在学期间发表的文章第61页

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