摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第1章 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 结核分枝杆菌细胞壁的组成和特征 | 第11-12页 |
1.2 合成结核菌细胞壁的基因及途径 | 第12-16页 |
1.2.1 分枝杆菌枝菌酸的合成 | 第12-13页 |
1.2.2 分枝杆菌肽聚糖的合成 | 第13-14页 |
1.2.3 分枝杆菌阿拉伯半乳聚糖的合成 | 第14页 |
1.2.4 分枝杆菌磷脂酰甘露糖苷,脂甘露聚糖和脂阿拉伯甘露聚糖的生物合成 | 第14-16页 |
1.2.5 细胞分裂过程中细胞壁的合成 | 第16页 |
1.3 细胞壁合成的调控 | 第16-17页 |
1.4 展望 | 第17-19页 |
第2章 前言 | 第19-21页 |
第3章 实验材料和方法 | 第21-36页 |
3.1 实验材料 | 第21-24页 |
3.1.1 实验菌株、载体和细胞 | 第21页 |
3.1.2 实验用主要试剂 | 第21-22页 |
3.1.3 培养基及实验试剂的配制 | 第22-23页 |
3.1.4 实验仪器设备 | 第23-24页 |
3.2 实验方法 | 第24-36页 |
3.2.1 设计与合成引物 | 第24页 |
3.2.2 目的基因的获得 | 第24-25页 |
3.2.3 目的基因Rv3136的TA克隆 | 第25页 |
3.2.4 大肠杆菌DH5a、BL21和JM109感受态制备及转化 | 第25-26页 |
3.2.5 Rv3136重组蛋白的表达 | 第26-27页 |
3.2.6 耻垢分枝杆菌感受态制备及转化 | 第27-28页 |
3.2.7 Western blot检测重组蛋白在耻垢分枝杆菌中的表达 | 第28-29页 |
3.2.8 Rv3136(PPE51)重组蛋白在耻垢分枝杆菌中的亚细胞定位分析 | 第29-30页 |
3.2.9 重组耻垢分枝杆菌菌落形态观察 | 第30页 |
3.2.10 耻垢分枝杆菌生物膜培养 | 第30页 |
3.2.11 滑动实验 | 第30页 |
3.2.12 扫描电镜观察重组耻垢分枝杆菌菌体形态 | 第30-31页 |
3.2.13 重组耻垢分枝杆菌在酸性条件下的存活影响 | 第31页 |
3.2.14 重组耻垢分枝杆菌对SDS耐受性检测 | 第31-32页 |
3.2.15 重组耻垢分枝杆菌对氧化压力的影响 | 第32页 |
3.2.16 溴化已锭(EB)摄入实验 | 第32-33页 |
3.2.17 重组耻垢分枝杆菌侵染巨噬细胞后胞内存活率及细胞因子检测 | 第33-34页 |
3.2.18 Rv3136对胞壁相关基因转录水平的影响 | 第34-36页 |
第4章 结果与分析 | 第36-50页 |
4.1 RV3136在致病分枝杆菌中是保守蛋白 | 第36页 |
4.2 RV3136目的基因扩增和鉴定 | 第36-37页 |
4.3 构建大肠杆菌BL21-PET28-RV3136表达菌株 | 第37-38页 |
4.4 RV3136重组蛋白在大肠杆菌BL21中表达成功 | 第38页 |
4.5 成功构建重组耻垢分枝杆菌MS_RV3136 | 第38-39页 |
4.6 RV3136定位在耻垢分枝杆菌细胞壁上 | 第39-40页 |
4.7 MS_RV3136菌落形态观察和生物膜形成 | 第40-41页 |
4.8 过表达RV3136基因对耻垢分枝杆菌滑动能力的影响 | 第41页 |
4.9 过表达RV3136基因对耻垢分枝杆菌菌体形态的影响 | 第41-42页 |
4.10 过表达RV3136基因对耻垢分枝杆菌生长速率无显著影响 | 第42页 |
4.11 过表达RV3136基因增强耻垢分枝杆菌在低PH环境下的存活能力 | 第42-43页 |
4.12 过表达RV3136基因增强了耻垢分枝杆菌对表面压力(SDS)的耐受 | 第43-44页 |
4.13 过表达RV3136基因增强耻垢分枝杆菌对H2O2的耐受 | 第44页 |
4.14 过表达RV3136基因增强耻垢分枝杆菌对联胺的耐受 | 第44-45页 |
4.15 过表达RV3136基因增强耻垢分枝杆菌对异烟肼和万古霉素的耐受 | 第45-46页 |
4.16 过表达RV3136基因降低了耻垢分枝杆菌细胞壁的渗透性 | 第46-47页 |
4.17 过表达RV3136基因利于耻垢分枝杆菌在THP-1 中存活 | 第47页 |
4.18 过表达RV3136基因对巨噬细胞内细胞因子没有明显改变 | 第47-48页 |
4.19 RV3136基因可能通过影响胞壁相关基因的转录而改变细胞壁重塑 | 第48-50页 |
第5章 结论与展望 | 第50-53页 |
5.1 结论与分析 | 第50-51页 |
5.2 展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59-61页 |
在学期间发表的文章 | 第61页 |