中文摘要 | 第5-9页 |
英文摘要 | 第9-13页 |
前言 | 第14-22页 |
材料和方法 | 第22-34页 |
1. 材料 | 第22-25页 |
1.1 常规试剂 | 第22页 |
1.2 Western blot 所需的主要试剂 | 第22页 |
1.3 质粒、宿主菌 | 第22页 |
1.4 细胞系 | 第22页 |
1.5 细胞生物学实验所需试剂 | 第22页 |
1.6 特殊试剂盒 | 第22-23页 |
1.7 主要溶液的配制 | 第23-24页 |
1.8 主要仪器 | 第24-25页 |
2. 方法 | 第25-34页 |
2.1 细胞培养 | 第25-26页 |
2.2 转染实验 | 第26页 |
2.3 慢病毒包装实验 | 第26页 |
2.4 细胞增殖检测 | 第26-27页 |
2.5 UGT1A9过表达质粒构建 | 第27-31页 |
2.6 重叠PCR法构建双荧光突变体质粒 | 第31-32页 |
2.7 双荧光素酶报告基因分析 | 第32页 |
2.8 质谱分析相关实验 | 第32-34页 |
结果 | 第34-46页 |
1. 细胞系中CYP3A4及UGT1A9的表达 | 第34-35页 |
2. 生物信息学软件预测作用于UGT1A9的miRNA | 第35页 |
3. 细胞SMMC-7721中筛选miRNA | 第35-36页 |
4. 利用报告基因实验筛选候选miRNA | 第36-37页 |
5. 肝癌组织中miRNA和UGT1A9表达情况及相关性分析 | 第37-40页 |
6. 突变体质粒验证miRNA | 第40页 |
7. 索拉非尼刺激下细胞系增殖情况不同 | 第40-41页 |
8. UGT1A9表达对细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
9. miRNA对索拉非尼代谢的影响 | 第42-43页 |
10. 结合UGT1A9表达分析索拉非尼病人预后 | 第43-45页 |
11. 索拉非尼转运体对预后的影响 | 第45-46页 |
讨论 | 第46-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
综述 | 第57-63页 |
参考文献 | 第61-63页 |
致谢 | 第63页 |