| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第13-24页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一章 lncRNAs的生物学功能及作用机制 | 第14-20页 |
| 1.1 lncRNAs的概述 | 第14-15页 |
| 1.1.1 lnc RNAs的定义 | 第14页 |
| 1.1.2 lnc RNs的分类 | 第14页 |
| 1.1.3 lnc RNAs的特性 | 第14-15页 |
| 1.2 lncRNAs的生物学功能 | 第15-16页 |
| 1.2.1 lnc RNA与肝脏糖、脂质代谢 | 第15页 |
| 1.2.2 lnc RNAs与白色、棕色脂肪细胞成脂及产热 | 第15-16页 |
| 1.2.3 lnc RNAs与肌细胞分化及肌肉再生 | 第16页 |
| 1.2.4 lnc RNAs与癌症 | 第16页 |
| 1.3 lncRNAs主要调控机制 | 第16-20页 |
| 1.3.1 lnc RNAs与表观遗传调控 | 第17页 |
| 1.3.2 lnc RNAs与转录调控 | 第17-18页 |
| 1.3.3 lnc RNAs与转录后调控 | 第18-20页 |
| 第二章 Adiponectin的生物学功能 | 第20-24页 |
| 2.1 Adiponectin的概述 | 第20-21页 |
| 2.2 Adiponectin对脂肪的影响 | 第21页 |
| 2.3 Adiponectin对机体糖、脂代谢影响 | 第21-22页 |
| 2.4 Adiponectin的表达调控 | 第22-24页 |
| 实验研究 | 第24-49页 |
| 前言 | 第24-25页 |
| 第三章 Adiponectin AS lncRNA的鉴定及表达 | 第25-31页 |
| 3.1 引言 | 第25页 |
| 3.2 实验材料 | 第25页 |
| 3.3 方法 | 第25-27页 |
| 3.3.1 生物信息分析预测Adiponectin AS lncRNA | 第25页 |
| 3.3.2 Adiponectin AS lncRNA的鉴定 | 第25-26页 |
| 3.3.3 小鼠组织样的采集 | 第26页 |
| 3.3.4 3T3-L1细胞系的培养及其诱导成脂 | 第26页 |
| 3.3.5 半衰期的检测 | 第26页 |
| 3.3.6 荧光原位杂交实验 | 第26页 |
| 3.3.7 C57BL/6 小鼠组织样品及 3T3-L1细胞总RNA提取 | 第26页 |
| 3.3.8 PCR反应程序 | 第26页 |
| 3.3.9 RNA的反转录以及实时定量qPCR | 第26-27页 |
| 3.4 结果与分析 | 第27-30页 |
| 3.4.1 Adiponectin的天然反义转录本的生物信息分析 | 第27-28页 |
| 3.4.2 Adiponectin AS lncRNA的PCR鉴定 | 第28页 |
| 3.4.3 Adiponectin AS lncRNA的组织及时序表达谱 | 第28-29页 |
| 3.4.4 Adiponecin AS lncRNA的核、质定位及半衰期 | 第29-30页 |
| 3.5 讨论 | 第30页 |
| 3.6 小结 | 第30-31页 |
| 第四章 Adiponectin AS lncRNA腺病毒过表达载体的构建与包装 | 第31-35页 |
| 4.1 引言 | 第31页 |
| 4.2 实验材料 | 第31页 |
| 4.3 实验方法 | 第31页 |
| 4.4 结果与分析 | 第31-34页 |
| 4.4.1 目的片段的扩增 | 第31-32页 |
| 4.4.2 腺病毒过表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 4.4.3 重组腺病毒的包装、扩繁、鉴定及滴度测定 | 第33-34页 |
| 4.5 讨论 | 第34页 |
| 4.6 小结 | 第34-35页 |
| 第五章 Adiponectin AS lncRNA抑制前体脂肪细胞分化及其作用的机制 | 第35-41页 |
| 5.1 引言 | 第35页 |
| 5.2 材料 | 第35页 |
| 5.3 方法 | 第35-36页 |
| 5.3.1 小鼠原代前体脂肪细胞的分离、培养 | 第35-36页 |
| 5.3.2 小鼠原代前体脂肪细胞的腺病毒侵染及诱导分化 | 第36页 |
| 5.3.3 细胞样品的RNA提取、反转及实时定量检测 | 第36页 |
| 5.3.4 细胞样品的蛋白提取及Western blotting | 第36页 |
| 5.3.5 油红O染色 | 第36页 |
| 5.3.6 核酸酶保护实验 | 第36页 |
| 5.4 结果与分析 | 第36-39页 |
| 5.4.1 小鼠原代前体脂肪细胞的诱导分化 | 第36-37页 |
| 5.4.2 过表达Adiponectin AS lncRNA抑制小鼠原代前体脂肪细胞的分化 | 第37-38页 |
| 5.4.3 成熟脂肪细胞中Adiponectin AS lnc RNA的定位 | 第38-39页 |
| 5.4.4 核酸酶保护实验的分析 | 第39页 |
| 5.5 讨论 | 第39-40页 |
| 5.6 小结 | 第40-41页 |
| 第六章 Adiponectin AS lncRNA对小鼠糖、脂代谢的影响 | 第41-49页 |
| 6.1 引言 | 第41页 |
| 6.2 试验材料 | 第41页 |
| 6.3 试验方法 | 第41-42页 |
| 6.3.1 腺病毒的纯化 | 第41页 |
| 6.3.2 C57BL/6 小鼠的饲喂及腺病毒处理 | 第41-42页 |
| 6.3.3 C57BL/6 小鼠体重及采食量的统计 | 第42页 |
| 6.3.4 C57BL/6 小鼠的GTT及ITT的检测 | 第42页 |
| 6.3.5 C57BL/6 小鼠血清的收集及脏器组织的采集 | 第42页 |
| 6.3.6 C57BL/6 小鼠脏器组织的冰冻切片、H&E染色及油红O染色 | 第42页 |
| 6.3.7 肝脏、肌肉及血液中甘油三酯的检测 | 第42页 |
| 6.3.8 血液中Adiponectin及Leptin的检测 | 第42页 |
| 6.4 结果与分析 | 第42-48页 |
| 6.4.1 腺病毒处理抑制高脂组小鼠体重 | 第42-43页 |
| 6.4.2 腺病毒处理减少高脂组小鼠脂肪的重量 | 第43-45页 |
| 6.4.3 腺病毒处理提升高脂组小鼠葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性 | 第45页 |
| 6.4.4 腺病毒处理抑制高脂组小鼠脂肪分泌因子和肝脏TG含量 | 第45-47页 |
| 6.4.5 腺病毒处理促进高脂组小鼠肝脏胰岛素信号通路基因表达 | 第47-48页 |
| 6.5 讨论 | 第48页 |
| 6.6 小结 | 第48-49页 |
| 结论、创新点及进一步研究内容 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 附录 | 第58-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73-74页 |
