| 致谢 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 木聚糖 | 第10-11页 |
| 1.2 木聚糖酶 | 第11-18页 |
| 1.2.1 木聚糖酶的来源 | 第11-12页 |
| 1.2.2 木聚糖酶的分类 | 第12-13页 |
| 1.2.3 木聚糖酶的作用机制 | 第13-14页 |
| 1.2.4 木聚糖酶的应用 | 第14-16页 |
| 1.2.5 木聚糖酶热稳定性的影响因素 | 第16-18页 |
| 1.3 同源建模与定点突变 | 第18-19页 |
| 1.3.1 同源建模 | 第18页 |
| 1.3.2 定点突变 | 第18-19页 |
| 1.4 论文主要研究内容及创新点 | 第19-20页 |
| 第二章 耐高温木聚糖酶Xyn10A的表达 | 第20-31页 |
| 2.1 实验仪器与材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂与酶 | 第20-21页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第21页 |
| 2.1.4 培养基及溶液配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-27页 |
| 2.2.1 PCR扩增 | 第22-25页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建 | 第25页 |
| 2.2.3 重组质粒的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.4 重组蛋白的诱导表达 | 第26页 |
| 2.2.5 重组蛋白SDS-PAGE分析 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第27-30页 |
| 2.3.1 重组质粒的构建 | 第27-29页 |
| 2.3.2 重组蛋白的表达和纯化 | 第29-30页 |
| 2.4 本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 木聚糖酶Xyn10A的催化残基研究 | 第31-42页 |
| 3.1 实验仪器与材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂与酶 | 第31页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第31页 |
| 3.1.4 培养基及溶液配置 | 第31-32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-36页 |
| 3.2.1 PCR扩增 | 第32-33页 |
| 3.2.2 突变质粒的构建 | 第33页 |
| 3.2.3 突变质粒的鉴定 | 第33-34页 |
| 3.2.4 原始和突变木聚糖酶的诱导表达 | 第34页 |
| 3.2.5 原始和突变木聚糖酶SDS-PAGE分析 | 第34页 |
| 3.2.6 蛋白质浓度测定方法 | 第34-35页 |
| 3.2.7 原始酶和突变木聚糖酶的酶活测定 | 第35-36页 |
| 3.2.8 原始酶和突变木聚糖酶的酶学性质测定 | 第36页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第36-41页 |
| 3.3.1 突变质粒的构建 | 第36-37页 |
| 3.3.2 原始酶和突变木聚糖酶的低温诱导和纯化 | 第37-38页 |
| 3.3.3 原始酶和突变木聚糖酶的酶学性质 | 第38-41页 |
| 3.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 木聚糖酶Xyn10A的Ca~(2+)结合区域研究 | 第42-54页 |
| 4.1 实验仪器与材料 | 第42页 |
| 4.1.1 菌株与质粒 | 第42页 |
| 4.1.2 主要试剂与酶 | 第42页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第42页 |
| 4.1.4 培养基及溶液配置 | 第42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-46页 |
| 4.2.1 木聚糖酶Xyn10A结构模拟 | 第42页 |
| 4.2.2 PCR扩增 | 第42-45页 |
| 4.2.3 突变质粒的构建 | 第45页 |
| 4.2.4 突变质粒的鉴定 | 第45页 |
| 4.2.5 突变木聚糖酶的诱导表达 | 第45页 |
| 4.2.6 突变木聚糖酶SDS-PAGE分析 | 第45页 |
| 4.2.7 蛋白质浓度测定方法 | 第45页 |
| 4.2.8 突变木聚糖酶的酶活测定 | 第45-46页 |
| 4.2.9 突变木聚糖酶的酶学性质测定 | 第46页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第46-53页 |
| 4.3.1 Ca~(2+)突变位点的确定 | 第46-47页 |
| 4.3.2 突变质粒的构建 | 第47-48页 |
| 4.3.3 突变木聚糖酶的低温诱导和纯化 | 第48页 |
| 4.3.4 突变木聚糖酶的酶学性质 | 第48-53页 |
| 4.4 本章小结 | 第53-54页 |
| 第五章 木聚糖酶Xyn10A Ca~(2+)结合区域定点突变及其热稳定性研究 | 第54-63页 |
| 5.1 实验仪器与材料 | 第54页 |
| 5.1.1 菌株与质粒 | 第54页 |
| 5.1.2 主要试剂与酶 | 第54页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第54页 |
| 5.1.4 培养基及溶液配置 | 第54页 |
| 5.2 实验方法 | 第54-57页 |
| 5.2.1 PCR扩增 | 第54-56页 |
| 5.2.2 突变质粒的构建 | 第56页 |
| 5.2.3 突变质粒的鉴定 | 第56页 |
| 5.2.4 突变木聚糖酶的诱导表达 | 第56页 |
| 5.2.5 突变木聚糖酶SDS-PAGE分析 | 第56页 |
| 5.2.6 蛋白质浓度测定方法 | 第56页 |
| 5.2.7 突变木聚糖酶的酶活测定 | 第56页 |
| 5.2.8 突变木聚糖酶的酶学性质测定 | 第56-57页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第57-62页 |
| 5.3.1 Ca~(2+)突变位点的确定 | 第57页 |
| 5.3.2 突变质粒的构建 | 第57页 |
| 5.3.3 突变木聚糖酶的低温诱导和纯化 | 第57-58页 |
| 5.3.4 突变木聚糖酶的酶学性质 | 第58-62页 |
| 5.4 本章小结 | 第62-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
