| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 主要符号对照表 | 第9-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-33页 |
| 1.1 植物的免疫系统 | 第10-13页 |
| 1.2 植物的模式识别 | 第13-15页 |
| 1.3 LRR结构域的结构特点 | 第15-17页 |
| 1.4 MAMP：细菌鞭毛蛋白 | 第17-18页 |
| 1.5 细菌鞭毛蛋白的模式识别受体 | 第18-23页 |
| 1.5.1 引子：动物中细菌鞭毛蛋白的模式识别受体 | 第18-19页 |
| 1.5.2 植物中细菌鞭毛蛋白作用基序的发现 | 第19-21页 |
| 1.5.3 拟南芥中细菌鞭毛蛋白受体FLS2的发现 | 第21-22页 |
| 1.5.4 细菌鞭毛蛋白受体FLS2的结构特点 | 第22-23页 |
| 1.6 共受体BAK1的发现及在植物免疫信号通路中的功能 | 第23-24页 |
| 1.7 flg22诱导植物免疫信号激活机制的研究现状 | 第24-30页 |
| 1.7.1 引子：动物TLRs的激活机制研究 | 第24-26页 |
| 1.7.2 植物RK信号机制的结构研究现状 | 第26页 |
| 1.7.3 植物FLS2免疫信号机制研究现状 | 第26-30页 |
| 1.8 FLS2信号的关闭 | 第30页 |
| 1.9 植物免疫与发育之间的平衡 | 第30-31页 |
| 1.10 本文的研究目的、技术路线与研究意义 | 第31-33页 |
| 第2章 材料和方法 | 第33-52页 |
| 2.1 引言 | 第33页 |
| 2.2 实验材料 | 第33-38页 |
| 2.2.1 相关基因的获取 | 第33-34页 |
| 2.2.2 载体 | 第34-35页 |
| 2.2.3 菌株和细胞株 | 第35页 |
| 2.2.4 试剂 | 第35-36页 |
| 2.2.5 耗材和仪器 | 第36-37页 |
| 2.2.6 常用缓冲液配置 | 第37页 |
| 2.2.7 常用培养基配置 | 第37-38页 |
| 2.3 实验方法 | 第38-52页 |
| 2.3.1 目的基因克隆及载体构建 | 第38-42页 |
| 2.3.2 蛋白的表达与纯化 | 第42-49页 |
| 2.3.3 flg22诱导的FLS2-BAK1复合物的体外重组 | 第49-50页 |
| 2.3.4 目的蛋白结晶 | 第50-52页 |
| 第3章 蛋白表达纯化及复合物体外重组 | 第52-74页 |
| 3.1 引言 | 第52页 |
| 3.2 目的蛋白表达克隆的构建 | 第52-55页 |
| 3.2.1 目的蛋白克隆及载体的确立 | 第52-55页 |
| 3.2.2 目的蛋白基因克隆结果 | 第55页 |
| 3.3 FLS2蛋白的表达与纯化 | 第55-60页 |
| 3.3.1 野生型FLS2的表达与纯化 | 第55-57页 |
| 3.3.2 突变体FLS2的表达与纯化 | 第57-60页 |
| 3.4 BAK1蛋白的表达与纯化 | 第60-66页 |
| 3.4.1 SERK家族蛋白的表达与纯化尝试 | 第60-61页 |
| 3.4.2 BAK1杂交蛋白的表达与纯化尝试 | 第61-65页 |
| 3.4.3 野生型BAK1的表达与纯化 | 第65-66页 |
| 3.5 flg22诱导FLS2-BAK1异源复合物的体外重组 | 第66-69页 |
| 3.5.1 体外pull down实验检测flg22与FLS2、BAK1的相互作用 | 第66-67页 |
| 3.5.2 凝胶过滤层析检测flg22与FLS2、BAK1的相互作用 | 第67-69页 |
| 3.6 蛋白的糖基化处理 | 第69-73页 |
| 3.6.1 糖苷酶的选择 | 第69-72页 |
| 3.6.2 蛋白的去糖基化 | 第72-73页 |
| 3.7 小结 | 第73-74页 |
| 第4章 蛋白结晶及X射线晶体学初步分析 | 第74-80页 |
| 4.1 引言 | 第74页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第74-79页 |
| 4.2.1 晶体生长条件初筛 | 第74-75页 |
| 4.2.2 FLS2△ LRR2-6 蛋白晶体优化 | 第75-76页 |
| 4.2.3 FLS2-flg22-BAK1蛋白晶体优化 | 第76-78页 |
| 4.2.4 晶体的数据收集和结构修正 | 第78-79页 |
| 4.3 小结 | 第79-80页 |
| 第5章 FLS2-flg22-BAK1复合物的结构和功能分析 | 第80-96页 |
| 5.1 引言 | 第80页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第80-95页 |
| 5.2.1 复合物FLS2-flg22-BAK1的整体结构 | 第80-82页 |
| 5.2.2 复合物中受体FLS2的结构 | 第82-83页 |
| 5.2.3 复合物中共受体BAK1的结构 | 第83页 |
| 5.2.4 FLS2识别flg22的结构基础 | 第83-88页 |
| 5.2.5 FLS2突变体的结构功能分析 | 第88-89页 |
| 5.2.6 FLS2与BAK1的直接相互作用 | 第89-92页 |
| 5.2.7 BAK1对复合物中flg22的识别 | 第92-95页 |
| 5.3 小结 | 第95-96页 |
| 第6章 博士期间其他研究工作 | 第96-106页 |
| 6.1 植物激素BR诱导BRI1起始生长发育信号的研究进展 | 第96-98页 |
| 6.2 BL诱导BRI1-BAK1异源复合物的体外重组 | 第98页 |
| 6.3 BRI1-BL-BAK1复合物结晶及衍射数据收集 | 第98-101页 |
| 6.4 BRI1-BL-BAK1复合物的结构分析 | 第101-104页 |
| 6.4.1 BRI1-BL-BAK1的整体结构 | 第101-102页 |
| 6.4.2 BAK1对复合物中BL的识别 | 第102-104页 |
| 6.4.3 BRI1与BAK1的直接相互作用 | 第104页 |
| 6.5 总结与讨论 | 第104-106页 |
| 第7章 讨论与展望 | 第106-114页 |
| 7.1 讨论 | 第106-112页 |
| 7.1.1 flg22诱导FLS2信号激活机制 | 第106-108页 |
| 7.1.2 BAK1的功能是作为共受体 | 第108页 |
| 7.1.3 受体激酶的二聚化激活机制 | 第108-110页 |
| 7.1.4 植物受体激酶的LRR结构 | 第110-111页 |
| 7.1.5 植物免疫与发育之间的平衡 | 第111-112页 |
| 7.2 展望 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-124页 |
| 致谢 | 第124-127页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第127页 |
