摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第1章 引言 | 第9-16页 |
1.1 miR398的发现 | 第9页 |
1.2 miR398的功能 | 第9-14页 |
1.2.1 miR398与生物胁迫 | 第9-10页 |
1.2.2 miR398与非生物胁迫 | 第10-11页 |
1.2.3 miR398的目的基因 | 第11-13页 |
1.2.4 miR398的调控因子 | 第13-14页 |
1.3 人工miRNA(amiRNA)的研究进展和研究意义 | 第14-15页 |
1.3.1 amiRNA的特点 | 第14页 |
1.3.2 amiRNA的设计方法 | 第14页 |
1.3.3 amiRNA的研究进展和意义 | 第14-15页 |
1.4 本论文的研究意义 | 第15-16页 |
第2章 AmiR398a的构建与转化巨尾桉 | 第16-55页 |
2.1 材料和试剂 | 第16-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-39页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第39-54页 |
2.4.1 miR398a的a,b,c片段的合成 | 第39-40页 |
2.4.2 miR398a的d片段的合成 | 第40页 |
2.4.3 miR398a与pMD18-T克隆载体的连接 | 第40-41页 |
2.4.4 重组质粒的PCR验证 | 第41-42页 |
2.4.5 T-miR398a测序结果 | 第42-43页 |
2.4.6 克隆载体与二元表达载体的质粒提取 | 第43-44页 |
2.4.7 回收产物的酶切 | 第44-45页 |
2.4.8 目的片段粘性末端补平 | 第45页 |
2.4.9 pBI121单酶切产物与amiR398a/b补平产物的连接后的PCR验证 | 第45-47页 |
2.4.10 Bam HI单酶切验证amiR398a的插入方向 | 第47-48页 |
2.4.11 pBI398a的 1,2,20,25 号质粒测序结果 | 第48-50页 |
2.4.12 二元表达载体pBI398a转化土壤农杆菌后的质粒提取 | 第50-51页 |
2.4.13 质粒LBA398a的PCR验证 | 第51-52页 |
2.4.14 土壤农杆菌介导的巨尾桉转化 | 第52-54页 |
2.5 讨论 | 第54-55页 |
第3章 AmiR398b/c的构建与转化巨尾桉 | 第55-74页 |
3.1 材料和试剂 | 第55-56页 |
3.2 实验方法 | 第56-60页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第60-73页 |
3.3.1 miR398b/c的a,b,c片段的合成 | 第60-61页 |
3.3.2 miR398b/c的d片段的合成 | 第61-62页 |
3.3.3 miR398b/c与pMD18-T克隆载体的连接 | 第62-63页 |
3.3.4 重组质粒的PCR验证 | 第63页 |
3.3.5 测序结果 | 第63-65页 |
3.3.6 克隆载体与二元表达载体的质粒提取 | 第65页 |
3.3.7 回收产物的酶切 | 第65-66页 |
3.3.8 目的片段粘性末端补平 | 第66-67页 |
3.3.9 pBI121单酶切产物与amiR398b/c补平产物的连接后的PCR验证 | 第67-68页 |
3.3.10 Bam HI单酶切验证目的片段插入的方向 | 第68-69页 |
3.3.11 pBI398b/c的9号和11号测序结果 | 第69-70页 |
3.3.12 二元表达载体LBA398b/c转化土壤农杆菌后的质粒提取 | 第70-71页 |
3.3.13 质粒LBA398b/c的PCR验证 | 第71-72页 |
3.3.14 土壤农杆菌介导的巨尾桉转化 | 第72-73页 |
3.4 讨论 | 第73-74页 |
第4章 结论与展望 | 第74-75页 |
4.1 主要结论 | 第74页 |
4.2 进一步的工作方向 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
个人简历 | 第80页 |