致谢 | 第3-4页 |
摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第12-25页 |
1.1 研究背景 | 第12页 |
1.2 国内外研究现状 | 第12-19页 |
1.2.1 木材细胞DNA的分布 | 第12-13页 |
1.2.2 木材DNA提取方法 | 第13-15页 |
1.2.2.1 十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法 | 第13-14页 |
1.2.2.2 试剂盒法 | 第14页 |
1.2.2.3 十二烷基硫酸钠(SDS)法 | 第14页 |
1.2.2.4 苯甲酰溴(PTB)法 | 第14页 |
1.2.2.5 不同DNA提取方法的比较 | 第14-15页 |
1.2.3 目的片段的获取 | 第15-16页 |
1.2.3.1 引物的选择与设计 | 第15-16页 |
1.2.3.2 扩增 | 第16页 |
1.2.4 DNA在木材树种鉴别中的应用 | 第16-19页 |
1.2.4.1 测序 | 第16页 |
1.2.4.2 比较变异位点 | 第16-17页 |
1.2.4.3 构建系统进化树 | 第17页 |
1.2.4.4 构建DNA指纹图谱 | 第17-19页 |
1.3 研究目的与意义 | 第19页 |
1.4 研究内容与方法 | 第19-20页 |
1.4.1 木材DNA数量与分布 | 第20页 |
1.4.2 木材DNA提取方法 | 第20页 |
1.4.3 基于DNA条形码的木材鉴别 | 第20页 |
1.5 研究创新 | 第20-21页 |
参考文献 | 第21-25页 |
第二章 木材DNA含量与分布 | 第25-45页 |
2.1 细胞核DNA含量和分布 | 第26-35页 |
2.1.1 试验材料 | 第26-27页 |
2.1.2 试验方法 | 第27-28页 |
2.1.2.1 醋酸洋红染色 | 第27页 |
2.1.2.2 DAPI染色 | 第27页 |
2.1.2.3 统计 | 第27-28页 |
2.1.3 结果与讨论 | 第28-35页 |
2.1.3.1 染色 | 第28-31页 |
2.1.3.2 数量统计 | 第31-33页 |
2.1.3.3 面积统计 | 第33-34页 |
2.1.3.4 DNA激光强度 | 第34-35页 |
2.2 质体DNA含量与分布 | 第35-41页 |
2.2.1 试验材料 | 第35页 |
2.2.2 试验方法 | 第35-36页 |
2.2.2.1 I2-KI染色 | 第35页 |
2.2.2.2 结晶紫染色 | 第35页 |
2.2.2.3 DAPI染色 | 第35页 |
2.2.2.4 统计 | 第35-36页 |
2.2.3 结果与讨论 | 第36-40页 |
2.2.3.1 白木香质体数量与分布 | 第36-38页 |
2.2.3.2 杉木质体数量与分布 | 第38-40页 |
2.2.4 细胞核与质体分布比较 | 第40-41页 |
2.3 DNA含量分布与提取方法 | 第41页 |
2.4 小结 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
第三章 木材DNA提取方法 | 第45-57页 |
3.1 试验材料 | 第45-46页 |
3.2 试验方法 | 第46-49页 |
3.2.1 研磨 | 第46页 |
3.2.2 DNA提取 | 第46-47页 |
3.2.2.1 Plant Genomic DNA Kit方法 | 第46-47页 |
3.2.2.2 Plant Genomic DNA Kit-PTB方法 | 第47页 |
3.2.2.3 DNA浓缩 | 第47页 |
3.2.3 DNA质量检测 | 第47页 |
3.2.4 DNA扩增 | 第47-48页 |
3.2.5 DNA片段检测 | 第48-49页 |
3.2.6 测序 | 第49页 |
3.2.7 序列质量比较 | 第49页 |
3.3 结果与讨论 | 第49-54页 |
3.3.1 研磨 | 第49页 |
3.3.2 优化DNA提取方法 | 第49-52页 |
3.3.2.1 DNA提取 | 第49页 |
3.3.2.2 DNA收集 | 第49-50页 |
3.3.2.3 2 种方法的提取结果 | 第50-52页 |
3.3.3 PCR | 第52-54页 |
3.3.4 序列质量比较 | 第54页 |
3.4 小结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-57页 |
第四章 基于DNA条形码的木材鉴别 | 第57-94页 |
4.1 木材DNA条形码的选择 | 第58-59页 |
4.2 木材DNA序列对比分析 | 第59-64页 |
4.2.1 试验材料 | 第59页 |
4.2.2 试验方法 | 第59-61页 |
4.2.2.1 DNA提取 | 第59页 |
4.2.2.2 DNA扩增 | 第59-60页 |
4.2.2.3 DNA产物回收 | 第60页 |
4.2.2.4 DNA浓缩 | 第60-61页 |
4.2.2.5 测序 | 第61页 |
4.2.2.6 序列分析 | 第61页 |
4.2.3 结果与讨论 | 第61-64页 |
4.2.3.1 多态性位点分布 | 第61-64页 |
4.2.3.2 遗传距离 | 第64页 |
4.3 进化树构建与分析 | 第64-90页 |
4.3.1 试验材料 | 第64页 |
4.3.2 试验方法 | 第64-65页 |
4.3.2.1 系统进化树 | 第64-65页 |
4.3.2.2 树种鉴别 | 第65页 |
4.3.3 结果与讨论 | 第65-90页 |
4.3.3.1 trnL-F序列亲缘关系分析 | 第69-72页 |
4.3.3.2 rbcL序列亲缘关系分析 | 第72-75页 |
4.3.3.3 mat K序列亲缘关系分析 | 第75-78页 |
4.3.3.4 trnH-psb A序列亲缘关系分析 | 第78-81页 |
4.3.3.5 ITS1序列亲缘关系分析 | 第81-85页 |
4.3.3.6 鉴别效果 | 第85-90页 |
4.4 小结 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-94页 |
第五章 总结 | 第94-101页 |
5.1 主要结论 | 第94-95页 |
5.1.1 木材DNA数量和分布 | 第94页 |
5.1.2 木材DNA提取方法 | 第94-95页 |
5.1.3 基于DNA条形码的木材鉴别 | 第95页 |
5.2 DNA技术特点 | 第95-96页 |
5.2.1 DNA技术的优势 | 第95-96页 |
5.2.1.1 准确性和一致性很强 | 第95页 |
5.2.1.2 木材鉴别可能到“种” | 第95-96页 |
5.2.1.3 后续成本低 | 第96页 |
5.2.1.4 国际通用 | 第96页 |
5.2.2 DNA技术的劣势 | 第96页 |
5.2.2.1 木材DNA信息有限 | 第96页 |
5.2.2.2 条形码有效性有限 | 第96页 |
5.2.2.3 建立数据库工作量大耗时 | 第96页 |
5.2.2.4 DNA提取成本较高 | 第96页 |
5.3 展望与建议 | 第96-99页 |
5.3.1 加强木材DNA浓缩技术研究 | 第97页 |
5.3.2 优化更精确高效的统计方法 | 第97页 |
5.3.3 开发更多更典型的DNA条形码 | 第97页 |
5.3.4 加强全球协作 | 第97-98页 |
5.3.5 建立统一开放的木材DNA数据库 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-101页 |
附录 主要缩写词对照表 | 第101-103页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第103页 |