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橘青霉veA的全局性调控作用及其分子机制

摘要第5-8页
Abstract第8-11页
第1章 综述第12-26页
    1.1 丝状真菌的网络调控研究进展第12-19页
        1.1.1 丝状真菌概况第12-14页
        1.1.2 丝状真菌的次级代谢调控途径第14-16页
        1.1.3 丝状真菌的菌丝发育与分子调控第16-17页
        1.1.4 丝状真菌的应激调控研究进展第17-19页
    1.2 Velvet复合体第19-20页
    1.3 veA的研究进展第20-22页
        1.3.1 veA调控丝状真菌菌丝发育和繁殖第20-21页
        1.3.2 veA调控丝状真菌次级代谢过程第21页
        1.3.3 veA调控丝状真菌的应激反应第21-22页
        1.3.4 veA调控作用受光照影响第22页
    1.4 橘青霉的分子调控研究与本课题的提出第22-26页
        1.4.1 橘青霉的分子调控机制研究进展第22-23页
        1.4.2 本课题的提出第23-26页
第2章 实验材料和方法第26-38页
    2.1 实验材料第26-29页
        2.1.1 菌株和质粒第26页
        2.1.2 培养基第26-27页
        2.1.3 抗生素第27-28页
        2.1.4 所用引物第28-29页
        2.1.5 实验试剂第29页
        2.1.6 主要仪器第29页
    2.2 实验方法第29-38页
        2.2.1 菌种培养条件第29-31页
        2.2.2 质粒提取第31页
        2.2.3 酶切、连接第31页
        2.2.4 转化及转化子验证第31-33页
        2.2.5 转化子菌落形态观察第33页
        2.2.6 转化子菌丝发育观察第33页
        2.2.7 孢子计数第33-34页
        2.2.8 橘青霉DNA提取第34页
        2.2.9 RNA提取、纯化和质量检测第34-36页
        2.2.10 RT-qPCR分析第36-37页
        2.2.11 转化子发酵及美伐他汀的HPLC检测第37页
        2.2.12 序列分析工具及结果统计学分析第37-38页
第3章 实验结果与分析第38-56页
    3.1 veA过表达菌株的构建第38-40页
        3.1.1 过表达载体pGiHTGi-veA的构建第38-39页
        3.1.2 veA过表达菌株的筛选与鉴定第39-40页
    3.2 橘青霉veA过表达菌株veA基因的转录水平分析第40-41页
        3.2.1 橘青霉中veA过表达后veA基因转录水平的检测第40-41页
        3.2.2 光照对veA基因转录的影响第41页
    3.3 veA对橘青霉生长发育的影响第41-47页
        3.3.1 veA对橘青霉菌落形态的影响第41-43页
        3.3.2 veA对橘青霉无性繁殖的影响第43-45页
        3.3.3 无性繁殖相关基因abaA基因和brlA基因的转录水平变化第45-47页
    3.4 veA对橘青霉体内美伐他汀生物合成的影响第47-50页
        3.4.1 veA过表达对橘青霉发酵菌体干重及产量的影响第47-48页
        3.4.2 美伐他汀生物合成基因的表达量变化第48-50页
    3.5 veA影响橘青霉对外界压力的耐受第50-56页
        3.5.1 外界压力对橘青霉WT菌株和OE::veA菌株菌落的影响第50-53页
        3.5.2 veA调控橘青霉耐受H_2O_2的分子机制第53-55页
        3.5.3 Kcl中和veA对橘青霉分生孢子的负调控第55-56页
第4章 讨论第56-60页
    4.1 光照促进橘青霉veA基因的表达第56页
    4.2 橘青霉veA基因负调控分生孢子的形成第56-57页
    4.3 橘青霉中veA基因调控美伐他汀生物合成过程第57-58页
    4.4 橘青霉中veA基因参与渗透压等耐受调控第58-60页
第5章 总结第60-62页
    5.1 总结第60页
    5.2 创新点第60页
    5.3 展望第60-62页
参考文献第62-68页
附录第68-70页
硕士期间发表的论文和奖励情况第70-72页
致谢第72-73页

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