| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-19页 |
| 1.1 植物体对于氮素吸收的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 氮素在植物体生长发育过程中的调控作用 | 第13-14页 |
| 1.1.1.1 氮素对植物体光合速率的调控 | 第13页 |
| 1.1.1.2 氮素对植物体响应氧化胁迫的调控 | 第13-14页 |
| 1.1.1.3 氮素对植物吸收水分的调控 | 第14页 |
| 1.1.1.4 氮素对植物体激素响应的调控 | 第14页 |
| 1.1.2 植物对氮素吸收利用的生理机制 | 第14页 |
| 1.1.3 植物吸收氮素的分子机制 | 第14-15页 |
| 1.1.4 植物适应低氮胁迫的生理机制 | 第15页 |
| 1.1.5 低氮胁迫下相关酶及蛋白质的变化 | 第15页 |
| 1.2 NF-Y类转录因子的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.1 NF-Y转录因子对植物发育的调控 | 第16-17页 |
| 1.2.2 NF-Y转录因子对花期的调控 | 第17页 |
| 1.2.3 NF-Y转录因子对植株响应逆境胁迫的调控 | 第17页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 1.4 技术路线 | 第18-19页 |
| 第二章 材料和方法 | 第19-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 实验试剂与试剂盒 | 第19页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 拟南芥的培养条件 | 第19页 |
| 2.2.2 谷子的培养条件 | 第19页 |
| 2.2.3 谷子低氮胁迫转录组分析 | 第19-20页 |
| 2.2.4 生物信息学分析 | 第20页 |
| 2.2.5 总RNA的提取及反转录 | 第20页 |
| 2.2.6 谷子基因SINF-YA6（SI037269M.G）的扩增及纯化回收 | 第20-22页 |
| 2.2.6.1 谷子总RNA的提取 | 第20页 |
| 2.2.6.2 RNA的反转录 | 第20-21页 |
| 2.2.6.3 谷子基因SiNF-YA6的扩增 | 第21页 |
| 2.2.6.4 PCR产物的纯化回收 | 第21-22页 |
| 2.2.7 载体的连接转化与质粒的提取 | 第22-24页 |
| 2.2.7.1 目的基因与克隆载体的连接 | 第22-23页 |
| 2.2.7.2 目的基因与GFP载体的连接 | 第23页 |
| 2.2.7.3 目的基因与pBI121载体的连接 | 第23页 |
| 2.2.7.4 连接产物的转化 | 第23-24页 |
| 2.2.7.5 质粒的提取 | 第24页 |
| 2.2.8 REAL-TIME PCR分析 | 第24-25页 |
| 2.2.9 SINF-YA6的表达模式 | 第25页 |
| 2.2.10 SINF-YA6的组织特异性表达 | 第25页 |
| 2.2.11 SINF-YA6的亚细胞定位 | 第25-26页 |
| 2.2.12 SINF-YA6过表达拟南芥株系的获得 | 第26-27页 |
| 2.2.12.1 农杆菌感受态的制备 | 第26页 |
| 2.2.12.2 农杆菌转化 | 第26-27页 |
| 2.2.12.3 农杆菌侵染拟南芥 | 第27页 |
| 2.2.13 SINF-YA6过表达拟南芥株系的抗性鉴定 | 第27页 |
| 2.2.14 SINF-YA6过表达拟南芥株系中氮转运相关基因的检测 | 第27页 |
| 2.2.15 Si NF-YA6 过表达拟南芥株系在处理下的的种子萌发测定 | 第27-29页 |
| 2.2.15.1 种子的处理 | 第27-28页 |
| 2.2.15.2 种子发芽率的统计 | 第28-29页 |
| 第三章 结果分析 | 第29-52页 |
| 3.1 SINF-YA6基因的克隆及生物信息学分析 | 第29-31页 |
| 3.2 SINF-YA6的克隆 | 第31-32页 |
| 3.2.1 谷子总RNA的提取 | 第31-32页 |
| 3.2.2 SINF-YA6的扩增与连接转化 | 第32页 |
| 3.3 SINF-YA6表达模式 | 第32-35页 |
| 3.3.1 SINF-YA6对于胁迫处理的响应 | 第32-33页 |
| 3.3.2 SINF-YA6对于激素处理的响应 | 第33-35页 |
| 3.4 SINF-YA6的组织特异性表达 | 第35页 |
| 3.5 SINF-YA6的亚细胞定位分析 | 第35-36页 |
| 3.5.1 SINF-YA6-GFP融合表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.5.2 SINF-YA6-GFP的亚细胞定位 | 第36页 |
| 3.6 转SINF-YA6拟南芥植株抗逆胁迫鉴定结果 | 第36-50页 |
| 3.6.1 PBI121-SINF-YA6载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.6.2 拟南芥SINF-YA6过表达株系的筛选 | 第37-38页 |
| 3.6.3 拟南芥SINF-YA6过表达株系的低氮胁迫鉴定 | 第38-39页 |
| 3.6.4 拟南芥SINF-YA6过表达株系的低磷胁迫鉴定 | 第39-40页 |
| 3.6.5 拟南芥SINF-YA6过表达株系的低钾胁迫鉴定 | 第40-41页 |
| 3.6.6 拟南芥SINF-YA6过表达株系的高盐胁迫鉴定 | 第41-43页 |
| 3.6.7 拟南芥SINF-YA6过表达株系的ABA处理鉴定 | 第43-44页 |
| 3.6.8 拟南芥SINF-YA6过表达株系的PEG处理鉴定 | 第44-45页 |
| 3.6.9 拟南芥SINF-YA6过表达株系萌发期高盐胁迫鉴定 | 第45-46页 |
| 3.6.10拟南芥SINF-YA6过表达株系萌发期PEG处理鉴定 | 第46-48页 |
| 3.6.11拟南芥SINF-YA6过表达株系萌发期ABA处理鉴定 | 第48-49页 |
| 3.6.12拟南芥SINF-YA6过表达株系萌发期MEJA处理鉴定 | 第49-50页 |
| 3.7 SINF-YA6的过表达对氮转运相关基因表达的影响 | 第50-52页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第52-54页 |
| 4.1 结论 | 第52页 |
| 4.2 讨论 | 第52-54页 |
| 4.2.1 谷子SINF-YA6基因正向调控植物体在低氮胁迫下的氮吸收 | 第52页 |
| 4.2.2 SINF-YA6同时定位于细胞核及细胞膜上 | 第52-53页 |
| 4.2.3 SINF-YA6需要形成多聚体才能行使其他功能 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简介 | 第59页 |
