| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 草兔简介及其危害现状 | 第12页 |
| 1.2 免疫不育技术 | 第12-13页 |
| 1.3 卵透明带简介与研究进展 | 第13-15页 |
| 1.4 痘病毒简介 | 第15-17页 |
| 1.5 抗原传递载体肖普纤维瘤病毒 | 第17-18页 |
| 1.6 穿梭载体pSC11 | 第18-19页 |
| 1.7 基因表达系统 | 第19-20页 |
| 1.8 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 1.9 研究的主要内容 | 第21-22页 |
| 1.9.1 草兔ZP2基因克隆，原核和真核表达 | 第21页 |
| 1.9.2 构建能够表达草兔ZP3基因的重组肖普纤维瘤病毒 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-37页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株与质粒、细胞与病毒 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-37页 |
| 2.2.1 实验一草兔ZP2基因克隆，原核和真核表达 | 第23-33页 |
| 2.2.1.1 草兔卵巢总RNA的提取、纯化及检测 | 第23-25页 |
| 2.2.1.2 cDNA第一链的合成及环化 | 第25页 |
| 2.2.1.3 草兔ZP2基因克隆 | 第25-26页 |
| 2.2.1.4 草兔ZP2基因原核表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.1.5 草兔ZP2基因在E.coli BL21中的诱导表达体系优化及其鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.1.6 草兔ZP2基因真核表达载体的构建 | 第28-29页 |
| 2.2.1.7 含草兔ZP2基因的RK13细胞筛选及纯化 | 第29-31页 |
| 2.2.1.8 稳定荧光RK13细胞中ZP2基因的存在与转录检测 | 第31-32页 |
| 2.2.1.9 稳定荧光RK13细胞中ZP2基因的表达情况检测 | 第32-33页 |
| 2.2.2 实验二构建能够表达草兔ZP3基因的重组肖普纤维瘤病毒 | 第33-37页 |
| 2.2.2.1 重组草兔ZP3-His cDNA克隆 | 第33页 |
| 2.2.2.2 重组穿梭载体pSC11-ZP3-His的构建 | 第33页 |
| 2.2.2.3 重组SFV的构建 | 第33-35页 |
| 2.2.2.4 重组SFV中ZP2基因的存在、转录以及表达检测 | 第35-36页 |
| 2.2.2.5 重组SFV病毒滴度的测定 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-54页 |
| 3.1 实验一草兔ZP2基因克隆，原核和真核表达 | 第37-47页 |
| 3.1.1 草兔ZP2基因克隆 | 第37-38页 |
| 3.1.2 草兔ZP2基因序列的生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 3.1.3 重组原核表达载体pET-28a-hZP2、pET-28a-ZP2f的鉴定 | 第39-40页 |
| 3.1.4 ZP2f、hZP2基因的诱导表达体系优化 | 第40-44页 |
| 3.1.5 hZP2基因表达产物的Western blot检测 | 第44-45页 |
| 3.1.6 重组真核表达载体pEGFP-N1-ZP2的鉴定 | 第45页 |
| 3.1.7 重组RK13细胞的筛选 | 第45-46页 |
| 3.1.8 重组RK13细胞的分析 | 第46-47页 |
| 3.2 实验二构建能够表达草兔ZP3基因的重组肖普纤维瘤病毒 | 第47-54页 |
| 3.2.1 重组草兔ZP3-His cDNA与氨基酸序列分析 | 第47-48页 |
| 3.2.2 重组pSC11-ZP3-His穿梭载体的分析 | 第48-50页 |
| 3.2.3 构建重组SFV的分析 | 第50-52页 |
| 3.2.4 重组SFV效价测定 | 第52-54页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第54-58页 |
| 4.1 讨论 | 第54-56页 |
| 4.1.1 实验一草兔ZP2基因克隆，原核和真核表达 | 第54-55页 |
| 4.1.2 实验二构建能够表达草兔ZP3基因的重组肖普纤维瘤病毒 | 第55-56页 |
| 4.2 结论 | 第56-58页 |
| 4.2.1 实验一草兔ZP2基因克隆，原核和真核表达 | 第56页 |
| 4.2.2 实验二构建能够表达草兔ZP3基因的重组肖普纤维瘤病毒 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
