摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第1章 绪论 | 第7-15页 |
1.1 无脊椎动物先天免疫系统概述 | 第7页 |
1.2 甲壳类动物的免疫机制 | 第7页 |
1.3 甲壳动物抗菌肽 | 第7-9页 |
1.4 先天免疫信号通路 | 第9-12页 |
1.4.1 JAK/STAT信号通路 | 第9-10页 |
1.4.2 Toll信号通路 | 第10页 |
1.4.3 IMD信号通路 | 第10-12页 |
1.5 国内外研究现状综述 | 第12-13页 |
1.5.1 抗菌肽的研究 | 第12-13页 |
1.5.2 IMD信号通路关键基因的研究 | 第13页 |
1.6 本课题的研究内容、意义及技术路线 | 第13-15页 |
1.6.1 研究内容 | 第13页 |
1.6.2 研究意义 | 第13-14页 |
1.6.3 技术路线 | 第14-15页 |
第2章 罗氏沼虾Relish基因克隆和功能研究 | 第15-44页 |
2.1 引言 | 第15页 |
2.2 材料和方法 | 第15-29页 |
2.2.1 菌株、病毒和载体 | 第15-16页 |
2.2.2 试剂和仪器 | 第16页 |
2.2.3 主要试剂配方 | 第16-19页 |
2.2.4 实验材料 | 第19页 |
2.2.5 罗氏沼虾的免疫刺激 | 第19页 |
2.2.6 罗氏沼虾的总RNA提取 | 第19-20页 |
2.2.7 罗氏沼虾第一链cDNA合成 | 第20页 |
2.2.8 罗氏沼虾Relish的克隆 | 第20-22页 |
2.2.9 罗氏沼虾Relish的重组表达 | 第22-24页 |
2.2.10 MrRelish重组蛋白表达 | 第24-25页 |
2.2.11 MrRelish的组织分布以及在肝胰腺中受病原刺激表达模式研究 | 第25页 |
2.2.12 昆虫过表达载体构建,细胞培养与转染 | 第25-26页 |
2.2.13 RNA干扰实验 | 第26-29页 |
2.3 结果 | 第29-42页 |
2.3.1 MrRelish全长cDNA克隆和序列分析 | 第29-38页 |
2.3.2 MrRelish蛋白RHD结构域(MrRHD)的重组表达和纯化 | 第38页 |
2.3.3 MrRelish的组织分布 | 第38-39页 |
2.3.4 MrRelish在鳃组织中受鳗弧菌刺激表达模式 | 第39-40页 |
2.3.5 在果蝇S2细胞中过表达MrRHD对抗菌肽的诱导表达 | 第40页 |
2.3.6 在鳃组织中干扰MrRelish对抗菌肽表达的影响 | 第40-42页 |
2.4 讨论 | 第42-44页 |
第3章 罗氏沼虾IMD基因克隆和功能研究 | 第44-54页 |
3.1 引言 | 第44页 |
3.2 材料和方法 | 第44-47页 |
3.2.1 实验材料 | 第44页 |
3.2.2 罗氏沼虾的免疫刺激 | 第44-45页 |
3.2.3 罗氏沼虾的总RNA提取及第一链cDNA合成 | 第45页 |
3.2.4 罗氏沼虾IMD的克隆 | 第45页 |
3.2.6 罗氏沼虾IMD的重组表达 | 第45-46页 |
3.2.7 MrIMD蛋白表达 | 第46页 |
3.2.7.1 蛋白试表达 | 第46页 |
3.2.8 MrIMD组织分布以及表达模式分析 | 第46-47页 |
3.2.9 IMD基因过表达载体构建,细胞培养与转染 | 第47页 |
3.3 结果 | 第47-53页 |
3.3.1 MrIMD全长cDNA克隆,多序列比对以及进化树分析 | 第47-49页 |
3.3.2 MrIMD重组表达和纯化 | 第49-50页 |
3.3.3 MrIMD的组织分布实验 | 第50-51页 |
3.3.4 MrIMD在肝胰腺和鳃中受病原刺激的表达模式 | 第51-52页 |
3.3.5 MrIMD的过表达对抗菌肽基因的诱导表达 | 第52-53页 |
3.4 讨论 | 第53-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |