| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 卵母细胞冷冻保存的研究进展 | 第10页 |
| 1.2 卵母细胞冷冻的原理 | 第10-11页 |
| 1.2.1 冷冻过程对卵母细胞的影响 | 第10页 |
| 1.2.2 诱发结晶 | 第10-11页 |
| 1.2.3 解冻对卵母细胞的影响 | 第11页 |
| 1.3 卵母细胞冷冻保存方法 | 第11-12页 |
| 1.3.1 慢速冷冻法 | 第11页 |
| 1.3.2 玻璃化冷冻 | 第11-12页 |
| 1.4 冷冻保护剂 | 第12-13页 |
| 1.4.1 渗透性冷冻保护剂 | 第13页 |
| 1.4.2 非渗透性保护剂 | 第13页 |
| 1.4.3 其他冷冻保护剂 | 第13页 |
| 1.5 冷冻载体 | 第13-15页 |
| 1.5.1 普通细管法 | 第14页 |
| 1.5.2 开放式拉长塑料细管(OPS管) | 第14页 |
| 1.5.3 开放式毛细玻璃管法(GMP) | 第14页 |
| 1.5.4 电镜铜网法 | 第14页 |
| 1.5.5 冷冻环法 | 第14-15页 |
| 1.6 冷冻损伤的类型 | 第15-16页 |
| 1.6.1 低温损伤 | 第15-16页 |
| 1.6.2 冷冻保护剂化学毒性 | 第16页 |
| 1.6.3 冰晶损伤 | 第16页 |
| 1.6.4 渗透压 | 第16页 |
| 1.7 低温冷冻对卵母细胞的影响 | 第16-19页 |
| 1.7.1 透明带 | 第16-17页 |
| 1.7.2 颗粒细胞 | 第17页 |
| 1.7.3 细胞骨架 | 第17页 |
| 1.7.4 线粒体 | 第17-18页 |
| 1.7.5 分子损伤 | 第18-19页 |
| 2 驴卵母细胞成熟体系的建立 | 第19-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 操作液 | 第19页 |
| 2.1.4 卵母细胞体外成熟液 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 卵巢的采集 | 第20页 |
| 2.2.2 卵母细胞的采集 | 第20-21页 |
| 2.2.3 卵母细胞的体外成熟培养 | 第21页 |
| 2.2.4 卵母细胞体外成熟情况的检查 | 第21-22页 |
| 2.3 试验设计 | 第22页 |
| 2.4 数据处理 | 第22页 |
| 2.5 结果与分析 | 第22-23页 |
| 2.5.1 不同采集卵母细胞方法的比较 | 第22页 |
| 2.5.2 不同培养体系对驴未成熟卵泡卵母细胞体外成熟的影响 | 第22-23页 |
| 2.5.3 不同培养时间对驴未成熟卵泡卵母细胞体外成熟的影响 | 第23页 |
| 2.6 讨论 | 第23-25页 |
| 2.6.1 不同收集卵母细胞方法的分析 | 第24页 |
| 2.6.2 不同培养体系对驴未成熟卵泡卵母细胞体外成熟的影响 | 第24页 |
| 2.6.3 不同培养时间对驴未成熟卵泡卵母细胞体外成熟的影响 | 第24-25页 |
| 3 驴卵母细胞GV期玻璃化冷冻体系的建立及冷冻对微观结构的损伤 | 第25-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第25页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第25页 |
| 3.1.3 主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 3.2.1 GV期卵母细胞的判断 | 第26-27页 |
| 3.2.2 玻璃化冷冻前处理 | 第27-29页 |
| 3.2.3 解冻后卵母细胞的成熟培养 | 第29页 |
| 3.2.4 卵母细胞体外成熟情况的检查 | 第29页 |
| 3.2.5 卵母细胞微丝染色的步骤 | 第29页 |
| 3.2.6 卵母细胞线粒体染色的步骤 | 第29页 |
| 3.3 试验设计 | 第29-32页 |
| 3.3.1 卵母细胞解冻后形态的观察 | 第30-31页 |
| 3.3.2 不同浓度冷冻保护剂对冷冻效果的影响 | 第31页 |
| 3.3.3 不同冷冻载体对冷冻效果的影响 | 第31-32页 |
| 3.3.4 冷冻对GV期卵母细胞微丝的影响 | 第32页 |
| 3.3.5 冷冻对GV期卵母细胞线粒体分布的影响 | 第32页 |
| 3.4 数据分析 | 第32页 |
| 3.5 实验结果与分析 | 第32-36页 |
| 3.5.1 不同浓度冷冻保护剂对冷冻效果的影响 | 第32页 |
| 3.5.2 不同冷冻载体对冷冻效果的影响 | 第32-33页 |
| 3.5.3 冷冻对GV期卵母细胞微丝的影响 | 第33-35页 |
| 3.5.4 冷冻对GV期卵母细胞线粒体分布的影响 | 第35-36页 |
| 3.6 讨论 | 第36-39页 |
| 4 全文结论 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-49页 |
| 作者简介 | 第49页 |
