英文缩略词表 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一部分 肿瘤坏死因子α诱导RIP1激酶依赖的Bid剪切介导L929-A细胞死亡 | 第11-35页 |
1 前言 | 第11-14页 |
2 材料和方法 | 第14-18页 |
2.1 材料 | 第14-15页 |
2.1.1 细胞株 | 第14页 |
2.1.2 常用试剂盒 | 第14页 |
2.1.3 主要试剂 | 第14-15页 |
2.1.4 主要仪器 | 第15页 |
2.1.5 其他化学试剂 | 第15页 |
2.2 实验方法 | 第15-18页 |
2.2.1 细胞培养 | 第15页 |
2.2.2 细胞计数 | 第15页 |
2.2.3 细胞存活检测 | 第15-16页 |
2.2.4 活性氧检测 | 第16页 |
2.2.5 胞内钙离子检测 | 第16页 |
2.2.6 蛋白印迹 | 第16-17页 |
2.2.7 RIP1 siRNA转染 | 第17页 |
2.2.8 统计学分析 | 第17-18页 |
3 结果 | 第18-32页 |
3.1 TNFα对L929-A细胞的毒性检测 | 第18-19页 |
3.2 敲低 RIP1 蛋白或采用 RIP1 激酶抑制剂 Nec-1可以阻断TNFα对细胞的损伤 | 第19-24页 |
3.2.1 敲低RIP1激酶蛋白能阻断TNFα对细胞的损伤 | 第19-21页 |
3.2.2 RIP1 激酶抑制剂 Nec-1能阻断TNFα对细胞的损伤 | 第21-24页 |
3.3 TNFα的细胞毒性效果可以通过敲低Bid蛋白所拮抗 | 第24-26页 |
3.4 Caspase-3 抑制剂z-DEVD不能拮抗TNFα的细胞毒性 | 第26-28页 |
3.5 活性氧清除剂对TNFα诱导细胞毒性的影响 | 第28-29页 |
3.6 活性氧清除剂对过氧化氢诱导细胞毒性的影响 | 第29-32页 |
4 讨论 | 第32-35页 |
第二部分 RIP1激酶依赖的Bid剪切通过介导线粒体功能抑制启动细胞死亡 | 第35-45页 |
1 前言 | 第35页 |
2 材料和方法 | 第35-37页 |
2.1 材料 | 第35页 |
2.1.1 主要试剂盒 | 第35页 |
2.1.2 主要试剂 | 第35页 |
2.2 实验方法 | 第35-37页 |
2.2.1 分离线粒体 | 第35页 |
2.2.2 线粒体呼吸链复合体I-V活性测定 | 第35-36页 |
2.2.3 线粒体膜电位检测 | 第36页 |
2.2.4 ATP浓度测定 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-43页 |
3.1 RIP1、Caspase-8、Bid蛋白的线粒体定位 | 第37-38页 |
3.2 TNF对线粒体呼吸链复合体I-V(MRC I-V)的影响 | 第38页 |
3.3 TNFα诱导的Bid剪切对细胞线粒体功能的影响 | 第38-39页 |
3.4 RIP1蛋白及其激酶活性对TNFα介导的线粒体呼吸链复合体Ⅲ功能抑制及MMP、ATP的下降具有重要的作用 | 第39-41页 |
3.2.1 敲低RIP1蛋白能拮抗TNFα对MRC Ⅲ、MMP、ATP的影响 | 第39-40页 |
3.2.2 RIP1激酶抑制剂Nec-1 能拮抗TNFα对MRC Ⅲ、MMP、ATP的影响 | 第40-41页 |
3.5 敲低Bid蛋白对TNFα介导的线粒体呼吸链复合体Ⅲ、MMP、ATP的影响 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
综述 | 第53-59页 |
参考文献 | 第56-59页 |
硕士期间发表文章 | 第59-60页 |
附件 | 第60-61页 |
个人简历 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |