摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1 引言 | 第9-17页 |
1.1 中间锦鸡儿简述 | 第9页 |
1.2 黄酮类化合物由苯丙烷代谢途径产生 | 第9页 |
1.3 黄酮类化合物概述 | 第9-14页 |
1.3.1 黄酮类化合物的分类 | 第9-11页 |
1.3.2 黄酮类化合物是植物生长发育和适应环境的重要物质 | 第11页 |
1.3.3 黄酮类化合物在制药方面的应用 | 第11页 |
1.3.4 黄酮生物合成的调控 | 第11-12页 |
1.3.5 黄酮的生物合成 | 第12-14页 |
1.4 CHI基因家族 | 第14-17页 |
1.4.1 CHI基因家族在黄酮代谢通路中所处的位置 | 第14页 |
1.4.2 CHI的分类及进化 | 第14-16页 |
1.4.3 CHIL基因亚家族的研究进展 | 第16-17页 |
1.5 研究的目的与意义 | 第17页 |
2 材料与方法 | 第17-23页 |
2.1 试验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第17-18页 |
2.1.2 菌株与质粒载体 | 第18页 |
2.1.3 实验药品及仪器 | 第18-19页 |
2.1.4 引物合成与测序 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-23页 |
2.2.1 植物材料及处理方法 | 第19页 |
2.2.2 中间锦鸡儿和拟南芥RNA的提取及cDNA的获得 | 第19-20页 |
2.2.3 荧光定量PCR | 第20页 |
2.2.4 cDNA末端快速扩增(RACE) | 第20页 |
2.2.5 目的片段与表达载体的连接 | 第20页 |
2.2.6 全长片段的获得及与表达载体的连接 | 第20-21页 |
2.2.7 目的片段的生物信息学分析 | 第21页 |
2.2.8 表达载体的构建 | 第21页 |
2.2.9 农杆菌感受态的制备与转化及拟南芥的转化 | 第21页 |
2.2.10 WESTERN BLOT | 第21-22页 |
2.2.11 总黄酮含量测定 | 第22页 |
2.2.12 启动子的克隆及分析 | 第22页 |
2.2.13 电解质渗出率测量 | 第22-23页 |
3 结果与分析 | 第23-31页 |
3.1 CiCHIL序列3'RACE和cDNA及gDNA克隆 | 第23页 |
3.2 CiCHIL基因序列分析 | 第23-24页 |
3.3 CiCHIL蛋白的生物信息学分析 | 第24-25页 |
3.4 CiCHIL蛋白序列进化树的构建 | 第25-27页 |
3.5 各过表达植物株系基因表达量分析 | 第27页 |
3.6 Western Blot | 第27-28页 |
3.7 过表达株系总黄酮含量的测定 | 第28-29页 |
3.8 CiCHIL启动子的克隆及顺式作用元件的分析 | 第29页 |
3.9 CiCHIL对UV-B处理有响应 | 第29-30页 |
3.10 紫外胁迫下过表达CiCHIL对膜质的影响 | 第30-31页 |
4. 讨论与结论 | 第31-33页 |
4.1 讨论 | 第31-32页 |
4.1.1 过表达CiCHIL可以提高植株体内总黄酮含量 | 第31页 |
4.1.2 CiCHIL过表达有利于促进植物体内黄酮类化合物的合成 | 第31页 |
4.1.3 CiCHIL受UV-B诱导同时过表达CiCHIL对植物抵抗UV-B胁迫有帮助 | 第31-32页 |
4.2 结论 | 第32-33页 |
致谢 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-42页 |
作者简介 | 第42页 |